离子选择性电极法测定离子钙

【关键词】  离子选择性电极法

　　［关键词］ 离子选择性电极法；测定；离子钙
   
　　Measurement Ion Calcium with ISE   
　　Key words:ISE; Measurement; Ion Calcium

    钙是体内生存离不开的元素，离子钙是生理活性钙，它比总钙更能反映出体内钙的代谢状态。钙的正常值范围小，更需要掌握其特点，创造良好的实验条件，用离子选择性电极法(ISE)测定钙优点较多，比EDTA滴定法精确度大，我们用ISE法测钙收到满意效果。

　　1  资料与方法

　　1.1  资料  来源门诊病例52例，其中有小儿惊厥(1／12岁～10／12岁)6例，晚期孕妇(22岁～37岁)15例，关节疼痛、四肢活动受限的老年人(58岁～70岁)11例共32例为症状组，正常体检20例为正常组。

　　1.2  仪器

　　1.2.1  仪器  AFT500D电解质系列分析仪：深圳康立仪器有限公司提供。

　　1.2.2  试剂  EDTA滴定法测钙试剂盒：北京北化精细化学品有限责任公司提供。

　　1.3  方法

　　1.3.1  抽早晨空腹静脉血时，分别注入二支干燥试管内，一支定为一组，另一支定为二组。

　　1.3.2  一组测定

　　1.3.2.1  抽血后立即分离血清，同时用ISE法和EDTA滴定法；二种方向各测其钙值。

　　1.3.2.2  用ISE法测定离子钙 

　　按仪器要求进行开机、活化、标定，待通过后进行血清吸样、测定，这一系列全由微机控制，电脑打印出结果。下面列表五项分别观察。

　　1.3.2.3  用EDTA滴定法测总钙 

　　取0.1 ml血清于15 mm×150 mm试管内；另设标准管加标准液0．1 ml；各加0.2 mol／L的NaOH溶液1 ml；各加钙红指示剂2滴；滴加EDTA Na2溶液，边加边摇动试管，直至管内淡红色液变为淡兰色为终点，记录各管EDTA Na2用量；：测定管EDTANa2用量(ml)    标准管EDTANa2用量(ml)×2.5=mmol／L。

　　1.3.3  二组测定

　　1.3.3.1  抽血后标本放置3 h后离出血请进行测定。

　　1.3.3.2  按一组的二种方法测定其离子钙和总钙。

　　2  结果

　　见表1～表5。表1到表4可以看出各组各方法测定的结果正常组与症状组比较均有明显差别(P<0.01)。表1  一组ISE浊测离子钙结果比较（略）注：P<0.01差别有显著意义。表2  一组EDTA滴定法测总钙结果比较表（略）注：P＜0.01差别有显著意义。表3  二组ISE浊测离子钙结果比较（略）注：P<0.01差别有显著意义表4  二组EDTA滴定法测总钙结果比较（略）注：P<0.01差别有显著意义表5  ISE法一组与二组值比较（略）注：正常组P>0.05差别无显著意义。症状组P<0.01差别有显著意义。

　　从表5看出，用ISE法测定离子钙，正常组的一组与二组差别不大(P>0.05)，而症状组就有显著的差别(P<0.01)。

　　一组测定，ISE法，正常组CV是4．65%，症状组CV是5．59％；EDTA滴定法测定正常组CV是5.56%；症状组CV是6.79％，由此看来，ISE法精密度高于EDTA滴定法，二组测定基本相似。

　　3  讨论

　　经过统计处理，从表1到表4中可以看出各组各方法测定的结果，正常组与症状组比较均有显著的差别P<0．01，即低钙可以引起各种临床症状，说明钙在人体生存中占有重要地位。

　　因为离子钙比总钙更能反映出体内钙代谢的状态。ISE法测的就是离子钙，本法选择性变，标本用量少，操作简便，程序由微机控制，优点较多。从一组测定结果来看，正常组CV：4．65％，症状组CV：5.59%，EDTA滴定法正常组CV：5.56%症状组CV：6.79％，说明ISE法精密度变于EDTA滴定法。

　　EDTA滴定法测的是人体的总钙，本法测定时钙红指示剂在碱性溶液中不稳定，终点不易观察，测定管和标准管变色有时不太一致，终点不好掌握，测定时必须了解，掌握其特点后加以改进以达到检验要求。

　　血液离体后CO2会很快丢失，使pH值升高，导致结合钙增加，离子钙测定偏低，经过统计学处理，从表5看出，标本放置3 h后再离心测定(即二组测定)，钙值偏低，症状组P<0．01，所以在采血后要尽快分离出血清进行测定(1 h之内)，这样才能使效果满意。