血液中脑膜炎奈瑟菌的分离鉴定药敏试验及临床分析
【关键词】 脑膜炎奈瑟菌
流脑至今仍是世界各国非常关注的一种常见的急性呼吸道传染病，其病原菌就是脑膜炎奈瑟菌。此菌经呼吸道进入机体，突破血脑屏障入侵颅脑，引起急性脑脊髓炎，甚至引发暴发性流行［1］。据WHO最近报告，进入20世纪90年代后期，在非洲的一些国家内又出现了流脑新的周期流行，1996年至1998年共报告了265 454例，病死率为10％~20％。此外，在冰岛、苏格兰和英格兰等地也报道［2］过此病发病增多，并出现局部地区流行。除脑脊液外，此菌在血液中也时有发现，且不时出现于成人身上，傅萍［4］就曾于2003年报道过一中年患者的血液中培养出一例A型脑膜炎奈瑟菌。笔者也于2005年3月通过血培养发现1例，现报告如下。
1 临床资料
患者，女，18岁，是一个系统性红斑狼疮的病人，于2005年3月6日入院。患者高热，肢体抽搐，无寒战，神志不清伴呕吐，初疑为神经系统感染，但头部CT未见异常，脑脊液压力正常，其常规及生化检查：WBC 30×106／L，RBC 540×109／L，蛋白质定性为阴性，GLU 0.09 mmol/L，Cl 125 mmol/L，涂片未见细菌，培养亦未见细菌生长。但血液分析发现：WBC 14．2×109/L，分类N 73％，L 23％，M 4％。3月9日抽取血液，经全自动血液分析仪培养及一系列生化试验，鉴定为脑膜炎奈瑟菌。将鉴定及药敏结果及时上报相关临床科室，经青霉素类及头孢类的联合用药，2 d后症状基本消失，4 d后病情基本稳定。翌日，因病人家属以无法支付医疗费用为由要求出院，之后无法跟踪。
2 培养鉴定
于患者高热期间，按常规无菌抽取血液5 ml~10 ml分别注入SA(需氧)和SN(厌氧)培养瓶，贴上标签立即送检，标本送至微生物室后，立即置入Bact／Alert―240血培养仪中进行全天24 h监测，约于8 h~10 h后提示阳性。立即将标本取出，接种于血平板和选择性子板(胆盐平板)，分别置35 ℃-CO2及35 ℃-O2培养箱，且于35 ℃―CO2培养箱中加种奈瑟菌分离培养专用的巧克力平板，经18 h~24 h，发现35％-CO2培养箱中的巧克力平板及血平板有细小光滑、灰白或灰褐色、半透明、圆形凸起的类似奈瑟菌的菌落生长，其余平板无菌生长，经涂片染色镜检，为革兰阴性双球状、肾形成双排列、坦面相对的球菌，疑为脑膜炎奈瑟菌，且立即向临床进行初步报告。
3 生化特征
使用手工与ATB Expression―Api-NH鉴定试纸同步进行检测鉴定，测得其生化结果见表1。
表1 脑膜炎奈瑟菌的生化特征(略)
ATB Expression―Api-NH测得其生物系统编码为5002，鉴定几率99.9％，鉴于上述特征，可确定为脑膜炎奈瑟菌。取24 h纯培养的菌落，经奈瑟菌血清凝集试验，确定为A群。
4 药敏试验
主要采用M-H纸片扩散法(K―B法)，使用英国OXOID公司的产品，且用ATCC―49226(淋病奈瑟菌)、ATCC―49619(肺炎链球菌)，严格按照NCCLS规定的标准进行质量控制。测得的结果见表2。
表2 脑膜炎奈瑟菌的药敏试验结果(略)
注：S：敏感，R：耐药
由药敏试验结果可知，此菌对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类，单环β内酰胺类以至碳青霉烯类等抗生素均敏感，在上并不困难。
5 讨论
在我国流行的脑脊髓膜炎以A群为多见。我国过去也是流脑高发病的国家之一，虽然目前发病率己受控制，但局部流行仍可发生，而今，我国国内人口流动日趋广泛，国际交往日益濒繁，这无疑增加了此病传播流行的机会，及近年来湖北、广东等省己出现了成年病人患病比例上升的现象，应引起高度重视。
脑膜炎奈瑟菌可寄生于正常人的鼻咽部，其携带率可达5%~15％，大多数情况下仅表现为鼻咽炎，只有当机体抵抗力下降时才可引发感染，而感染者大多为15岁以下的儿童［3］。但脑膜炎奈瑟菌也是流行性脑脊髓膜炎的病原菌，而人类正是其唯一宿主，感染后若不及时救冶，病死率极高。
本菌对体外环境的要求较高，抵抗力弱，且有自溶现象。故在标本采集后应立即送往临床微生物实验室，或用专用培养基进行病床旁接种后立即孵育培养，否则，易出现假阴性结果，对临床的诊治带来误导。脑膜炎奈瑟菌在发病初期大多在于血液内，但血培养阳性检出率仅为50％~60％，若时机把握不好，检出率会大大降低，甚至为阴性，故此，血样的采集必须在患者高热期间及使用抗生素之前。此次本菌在一免疫系统性疾病患者血中的检出，无疑对临床的诊断、治疗以及实验室的培养鉴定与药敏试验均有着较重要指导性意义。
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［1］ 刘长云，童详华.聚合酶链反应检测脑膜炎奈瑟菌DNA片段［J］.中华医学检验杂志，1996，19(2)：109.
［2］ 孙银燕，胡敬绪.脑膜炎奈瑟菌AcpsBompc偶联物的免疫原性、安全性和稳定性［J］.中华微生物学和免疫学杂志，2002，22(2)：170174.
［3］ 密新昌.一起脑脊髓膜炎暴发流行的检验结果分析［J］.中华实用中西医杂志，2004，4(17)：229230.
［4］ 傅萍.从血液培养中分离出一株A群施膜炎奈瑟菌［J］.实用医技杂志，2002，9(8)：586.
