50例血小板减少标本结果分析

                     作者：章小东，彭兰芬，黄文彩，尹艳丹，余小丹

【关键词】  CD

　　［摘要］ 目的：探讨CD1700血细胞分析仪血小板(PLT)检测结果偏低的原因,选择正确的方法进行复查,保证PLT检测质量。方法：对50例CD1700血细胞分析仪上检测结果偏低的标本涂片镜检,重新采集静脉血,分别在CD1700(预稀释法)上和用手工法进行复查。对血涂片存在PLT聚集的抗凝血在首次检测30 min后在CD1700上再复查一次。结果：有40例标本血涂片PLT形态正常,无PLT聚集,重新采血复查PLT,两种方法结果仍偏低,与复查前差异无显著性(P>0.05)。10例标本血涂片上PLT存在着不同程度的聚集,重新采血复查PLT,两种方法结果均正常,与复查前差异有显著性(P＜0.01) 。10例标本中有2例在CD1700上复查结果正常。结论：对各种原因引起PLT检测结果偏低者,应进行人工镜检血涂片和PLT手工计数,或在其他仪器上检测,同时要提高采集血涂标本的质量。

　　［关键词］ CD1700血细胞分析仪;血小板聚集;复查

　　Results Analyse to 50 Cases of Thrombocytopenia Specimens

　　Abstract：Objective To explore the reasons that result in platelets analysis results on low side which analysed in haematology analyzer CD1700 in order to select correct methods to reexamine them and then guarantee the quality of platelet analysises.Methods 50 Cases of thrombocytopenia speciments analysed in haematology analyzer CD1700 were made into bolld smears and examined in microscope,and the suffers of these speciments were collected blood again from vein 50 samples of blood were analysed separately in haematology analyzer CD1700 (prediluted method) and with manual method.The speciments which with platelet aggragation in blood smears were analysed in CD-1700 30 minutes after first analysed.Results In 40 Cases of speciments the shapes of platelets was normal and there were not the low side and were not different from which analysed first time(P>0.05).For 10 Cases of speciments with plateiet aggregation of differents degrees in blood smears the platelet results reexamined with two methods were different from the results analysed fist time(P<0.01).And two speciment of the ten was analysed again 30 minutes afer fist analysed,the result was normal.Conclusion Thrombocytopenia results caused by kins of reasons should be analysed by examining blood smears in microscope,and pletlets were analysed with manual method or in other haematology analyzer,simultane the quality of collecting blood speciments should be improved.

　　Key words：Haematology analyzer CD1700;Pletlet/ aggregation;Reexamine

　　随着全自动血液分析仪日益普及和使用,大大提高了血常规检测结果的精确性和准确性,用CD1700血细胞分析仪进行血细胞分析时常遇到血小板(PLT)直方图异常且PLT数目减少的样本,PLT直方图上偶尔出现“LYM RO”或“RM”提示，笔者就50例PLT数量减少的病例进行预稀释计数、手工计数，报道如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　仪器　试剂CD1700血细胞分析仪(美国雅倍) 及配套质控、定标试剂，仪器均经校正。

　　1.2　PLT稀释液(许汝和氏法)　用于显微镜计数(手工法),按《全国临床检验操作规程(第二版)》配制。

　　1.3　EDTAK2真空抗凝管　湖北金杏专用EDTAK2凝血管。

　　1.4　实验方法　对50例CD1700血细胞分折仪上检测结果偏低的标本涂片镜检,并对患者重新采集静脉血,分别在CD1700(预稀释法)上和用手工法进行复查。两种方法复查结果正常者30分种后用抗凝血在CD1700上再复查一次。

　　1.5　检测结果　作配对t检验。

　　2　结果

　　对50例PLT结果偏低的患者重新采集静脉血用CD1700血细胞分析仪检测(预稀释法)和手工计数复查,其中40例患者结果仍偏低,复查前后差异无显著性(P>0.05)。血涂片PLT均匀分布,形态大致正常;另10例标本血涂片上PLT存在着不同程度的聚集。对此10例患者用上述两种方法复查后PLT结果正常,与复查前比差异有显著性(P<0.01)。对上述10例已检测过的抗凝标本(检测后30 min)在CD1700上重新检测一次,发现其中2例标本30 min后复查结果正常(复查前为62×109/L,复查后为203×109/L),其余8例标本PLT结果仍然偏低,见表1。

　　表1　25例低值PLT复查前后结果比较（略）

　　注：复查后与复查前作t检验P<0.01。

　　3　讨论

　　由于CD1700血液分析仪不能将大PLT与小RBC分开,致使许多大PLT被当做RBC而未计入PLT中,还有一些体积微小的PLT也不被计入PLT中。由于PLT的黏附和聚集作用,导致循环中的PLT数量相对减少,影响仪器PLT计数,造成PLT计数值偏低，其降低的轻重程度不尽相同。首次检查PLT,出现PLT减少，应复查PLT。CD1700血细胞分析仪在PLT减少时给予提示,在PLT直方图中可能有“LYM RO”或“RM”提示,表示PLT有聚集、大PLT，甚者会引起白细胞(WBC)检测结果的减少。笔者对50例PLT结果偏低的标本进行血片镜检,有10例标本存在着PLT聚集。然后对这50例PLT结果偏低的患者重新采集静脉血用CD1700血细胞分析仪检测(预稀释法)和手工计数复查进行复查,其中40例患者(PLT无凝集组)结果仍偏低,复查前后差异无显著性(P>0.05)。血涂片PLT均匀分布,形态大致正常;另10例标本血涂片上PLT存在着不同程度的聚集。小的聚集,PCT有5个～20个;更大的聚集,PLT有30个以上。PLT凝集组(10例)患者用上述两种方法复查后PLT结果正常,与复查前比较差异有显著性(P<0.01)。对上述10例己检测过的抗凝标本(检测后30 min)在CD1700上重新检测一次,发现其中2例标本30 min后复查结果正常,其余8例标本PLT结果仍然偏低,见表1。综上所述PLT无凝集组(40例)是PLT“真性减少”,PLT凝集组(10例)是“假性减少”,究其原因,一是静脉血采集不顺利,静脉穿刺困难,或是聚血速度慢,混入组织液造成PLT凝集［1］。再就是EDTAK2引起的PLT可逆性聚集引起的检测结果偏低［2］。CD1700血细胞分析仪不能提示PLT凝集的程度,有时血液标本存在PLT凝集,仪器也没有任何提示,因此要分析PLT有否凝集,以及凝集程度,用人的眼睛无法判断,存在微凝集的标本在外观上与正常标本无异。在“WBC+DIFF”模式下,CD1700用电阻法对PLT进行检测,RBC和PLT是在同一个检测系统中通过颗粒大小确定进入RBC通道(>25 fl)还是进入PLT 通道(2 fl~30 fl)。根据不同的阈值,机分别给出PLT和RBC的数目。正是因为电阻法检测PLT是以细胞的大小进行计数的,当血液标本中存在聚集的PLT团,其大小与RBC 相似,就会被计为RBC,此时仪器可能无任何提示。正因如此,有大量大PLT存在时,大PLT大小与RBC 相似时就会被计为RBC,而引起PLT计数偏低。为提高PLT计数的准确性,应做好分析前、中、后三个环节的质量控制,尤其是分析前标本的采集或接收,分析中要注意异常标本的筛检、复查。对PLT减少者应用手工法或仪器预稀释法复查。EDTAK2引起的PLT可逆性聚集引起的检测结果偏低者可选用枸橼酸钠抗凝剂抗凝［3］,或者把所有EDTAK2抗凝血放置30 min后检测,即可避免此种现象。对分析后要结合临床,发出准确的报告。

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　　［1］　丛玉隆.当代血液分析技术与临床［M］.第1版.北京:人民卫生出版社,1997:34.

　　［2］　李胜发,程大林.血小板可逆聚集在全血细胞分析中的影响［J］.临床检验杂志,2003,21(1):37.

　　［3］　邢辉,吴健民.EDTAK3依赖性血小板假性减少症分析［J］.临床检验杂志,2004,22(4):277.