不同条件低温水溶液局部浸泡对兔Ⅲ度烧伤组织影响
【关键词】 温度；渗透压；烧伤；病理变化；愈合
［摘要］ 目的：观察不同温度、不同渗透压低温水溶液局部浸泡对兔皮肤Ⅲ度烧伤组织病理变化及创面愈合时间的影响，探讨烧伤局部创面早期应用低温高渗盐溶液浸泡，对烧伤局部组织细胞和微循环的的保护作用及其可能的机制。方法：1年龄健康家兔35只，随机分为5组，每组7只。A组为实验对照组，烧伤创面不进行浸泡。B组为15 ℃～20 ℃蒸馏水局部浸泡组。C组为5 ℃～10 ℃蒸馏水局部浸泡组。D组为5 ℃～10 ℃生理盐水局部浸泡组。E组为5 ℃～10 ℃ 3%高渗盐水局部浸泡组。各组家兔全部背部脱毛、麻醉后，用200 ℃直径为1.3 cm的不锈钢圆柱放脱毛处皮肤烧伤5 s，复制家兔小面积Ⅲ度烧伤模型。烧伤后，除A组外，各组动物创面即刻给予不同温度、不同渗透压低温水溶液浸泡1 h。光学显微镜观察各组动物烧伤局部组织病理变化。观察各组动物创面愈合时间，并于烧伤后第8天，测量各组动物创面的直径(mm)，并进行对比分析。结果：5 ℃～10 ℃ 3%高渗盐水局部浸泡组动物，中间区带表皮细胞变性坏死明显减轻，大部分皮肤附件细胞形态结构及层次尚存，真皮组织水肿及淤血较轻，小血管内皮细胞及红细胞形态、结构改变明显减轻，接近正常细胞的形态。同时低温高渗组动物烧伤后，创面愈合时间明显缩短，第8天创面直径也明显缩小，P<0.01。结论：低温高渗水溶液早期局部浸泡能明显减轻皮肤小面积Ⅲ度烧伤组织的病理变化，并具有促进创面愈合、缩短创面愈合时间的作用。
［关键词］ 温度；渗透压；烧伤；病理变化；愈合
烧伤是日常生活中常见的损伤之一。烧伤时热力作用造成局部组织细胞变性、坏死、微循环发生一系列的改变，而形成创伤。有研究表明，烧伤早期创面处理是否得当，直接关系到患者的病情和创面的愈合。冰岛居民对小面积烧伤习惯用冷水疗法［1］，在我国民间也有用盐水清洗伤口和创面的习惯。因此，我们用不同温度、不同渗透压低温水溶液，对家兔小面积Ⅲ度皮肤烧伤创面进行浸泡，观察其对烧伤局部组织病理变化及创面愈合的影响，以期为烧伤创面早期正确处理，促进创伤愈合，提供一种较好的方法。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 1年龄健康家兔(本校实验动物室提供)35只，体重(1.5±0.2)kg，雌雄不分，随机分为5组，每组7只。A组为实验对照组，烧伤创面不进行浸泡；B组为15 ℃～20 ℃蒸馏水局部浸泡组；C组为5 ℃～10 ℃蒸馏水局部浸泡组；D组为5 ℃～10 ℃生理盐水局部浸泡组。E组为5 ℃～10 ℃ 3%高渗盐水局部浸泡组。
1.2 实验方法 家兔烧伤模型的复制：各组家兔全部背部用8％Na2S脱毛(脱毛面积5 cm×8 cm)。用20％乌拉坦1 ml/kg耳缘静脉注射，待动物麻醉后，用200 ℃直径为1.3 cm的不锈钢圆柱(预先放200 ℃电烤箱内加热。电烤箱为：DHP-420型电热恒温培养箱，北京市永光明医疗仪器厂生产)，放脱毛处皮肤烧伤5 s，复制直径为1.3 cm的圆形小面积Ⅲ度烧伤(经病理证实)。烧伤后，除A组外，各组动物创面即刻给予不同温度、不同渗透压、低温水溶液浸泡1 h，1 h后每组动物随机抽取2只，于烧伤局部取皮，取皮面积约4 cm×5 cm的梭形皮肤，深达肌肉筋膜，放入10%的福尔马林液固定，然后常规石蜡切片，HE染色，光学显微镜观察。各组其余5只动物，人工饲养，自由活动，同时烧伤后7 d内每日肌肉注射头孢唑林钠(齐鲁制药有限公司生产，批号05030197)125 mg，2次/d，创面外涂8万U/支GM注射液(济南民康制药有限公司生产，批号0501915)2次/d，饲养环境每天用84消毒液消毒一次，以预防烧伤感染的发生。烧伤后每天观察创面情况，以创面痂皮脱落，新生上皮生成为愈合标准，同时记录各组动物愈合时间，并进行比较。于烧伤后第8天，用游标卡尺测量(放大镜观察下测量)各组动物创面的直径(mm)，并进行对比分析。
1.3 统计学处理 所有实验数据以均数±标准差(±s)表示，各组间差别的显著性用t检验判定。
2 结果
2.1 各组动物烧伤局部组织病理变化 皮肤烧伤后局部可立即出现三个同心圆形区带，由内向外可分为中心区带(变性坏死区)、中间区带(血液淤滞区)、外周区带(充血区)［2］。我们利用各组动物烧伤组织的病理切片，对各个区带逐一进行低倍、高倍镜观察，结果如下。
2.1．1 中心区带 变化坏死组织的厚度有明显区别，即A组最厚，C组最薄，B组界于两者之间。另外，A组动物表皮层细胞完全坏死脱落，真皮结缔组织发生胶原变性坏死，皮肤附件结构模糊不清，或仅见轮廓。B组和C组动物，表皮细胞变性坏死稍轻，部分脱落，大部分皮肤附件轮廓尚清楚，高倍观察这部分附件细胞形态结构及层次尚存。
2.1.2 中间区带 A组动物中间区带与坏死区带交界处细胞固缩，结构不清，其外周细胞则表现为肿胀，胞浆增多，有较多粗大的红染颗粒，胞核肿胀模糊，皮肤附件细胞也明显肿胀模糊。另外，A组真皮组织可见高度水肿有较多炎细胞浸润，真皮小血管高度扩张，内皮细胞肿胀血管内充满红细胞，红细胞形态明显肿胀呈类球形而且十分拥挤。C组、D组动物表皮及附件细胞轻度肿胀，未见明显的细胞固缩，真皮组织轻、中度水肿，有少量的炎细胞浸润，小血管轻度扩张淤血。血管内红细胞轻度肿胀，未见拥挤现象。E组动物真皮组织水肿及淤血较C、D组稍轻，但表皮细胞、小血管内皮细胞及红细胞形态、结构改变明显减轻，接近正常细胞的形态。B组动物上述病理变化程度界于A组与C组动物之间。
2.1．3 外周区带 各组动物均见不同程度的小血管扩张充血，多少不等炎细胞渗出，表皮及皮肤附件细胞变化不明显。
2.2 各组动物创面愈合情况 见表1。
表1不同温度低温溶液浸泡对烧伤创面愈合的影响(略)
注：A组*P<0.05，**P<0.01；B组△P<0.05。
表2 不同渗透压低温溶液浸泡对烧伤创面愈合的影响(略)
注：C组*P<0.05。
2.2.1 烧伤后创面局部用低温溶液浸泡的动物组与对照组相比，愈合时间明显缩短，P<0.05，C组更明显，P<0.01；创面直径也明显缩小，P<0.01。与10 ℃~15 ℃相比，C组愈合时间和第8天愈面直径又明显小于B组，P<0.05(见表1)。
2.2.2 烧伤后用3%高渗氯化钠低温溶液局部浸泡组，创面愈合时间和第8天创面直径明显小于低温蒸馏水浸泡组，差异有显著性P<0.05，而NS组愈合情况与蒸馏小组相比，没有明显改变，P＞0.05(见表2)。
3 讨论
烧伤时由于热力作用导致局部组织细胞损伤，根据热力到达的范围不同，烧伤局部恳立即出现三个同心圆区带。由于局部温度的差异，受热中心区损伤最重，四周较轻，更远的区域更轻，因此一个典型的烧伤创面由内向外分为坏死区、淤滞区、充血区。而淤滞区是一个处于可以向好坏两个方面的区带［1］。其皮肤表皮、附件细胞及微循环障碍发展变化程度与烧伤局部损伤程度相关，可直接影响创面愈合时间和愈合后瘢痕的大小。而烧伤后早期用冷水浸泡局部创面能防止热力的继续损伤，减轻淤滞区细胞破坏，减轻局部渗出和水肿［3，4］。本实验病理切片观察，证实冷疗后坏死区厚度明显变薄，并且变薄的程度与冷水的温度成正比。B组C组愈合时间缩短及创面直径减小，说明冷疗保护了淤滞区的表皮及附件细胞，有利于损伤修复期这部分细胞的再生与修复。研究证明热力与自由基损伤可使红细胞膜流动性下降，变形能力下降，脆性升高，红细胞易淤滞在微循环内［5］。本实验中，冷疗组局部组织小血管淤血、水肿及红细胞、小血管内皮细胞肿胀程度也较对照组减轻，说明局部冷疗对红细胞膜及烧伤区域微循环也有明显的保护作用。研究证明，热损伤可使细胞膜损伤及造成Na＋-K＋泵功能下降，同时烧伤局部水肿液某些化学物质的毒性作用，导致细胞水肿［6，7］。本实验对照组淤滞区表皮细胞、附件细胞、血管内皮细胞及小血管内红细胞明显肿胀都说明了这一点。而用3%高渗低温盐溶液浸泡，由于烧伤后局部屏障作用破坏，溶液中的Na＋可渗入局部组织内，使组织细胞外液呈高渗状态，从而使细胞内液外移，此与烧伤细胞的病理生理正好相反。细胞的暂时脱水保护了细胞的正常形态结构［8］。特别是红细胞和血管内皮细胞肿胀减轻，可大大减轻局部微循环障碍的程度。季海平等报道，采用加入表面麻醉剂的高渗氯化钠溶液湿敷烧伤创面,结果显示高渗吸水即可加强创面引流又可改善微循环,促进创面愈合［9］。另外，烧伤时局部会形成烧伤毒素及氧自由基等［10］，可对局部组织细胞产生毒性损伤作用。局部水溶液浸泡对这些毒性物质会产生稀释作用，从而减轻其毒性损伤作用。综上所述，对小面积烧伤而言，局部创面早期应用低温高渗盐溶液浸泡，对烧伤局部组织细胞和微循环的损伤都有较好的保护作用，能明显缩短烧伤创面愈合时间，并且在5 ℃～10 ℃的温度范围内，其保护作用较明显。
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［1］ 杨之俊.烧伤［M］.第2版.上海：上海技术出版社，1985：1011.
［2］ 陈意生.烧伤病［M］.第1版.重庆：重庆出版社，1993：67.
［3］ 李治军,程新奎.简述冷却疗法治疗烧伤［J］.河南中医杂志，2003，23(9)：5556.
［4］ Muir IFK,Barclay TL(eds):Burs and Their Treatment ［M］.ed 2 Lioldluke(medical books)LTD,London,1974：1558.
［5］ 谷廷敏.烧伤患者早期红细胞膜流动性、脆性、异形率及血浆过氧化脂脂质含量变化的观察［J］.中华烧伤整型外科杂志，1994，10(2)：124126.
［6］ 金惠铭.病理生理学［M］.第5版.北京：人民卫生出版社，2000：107120.
［7］ 李志清.烧伤患者痂下水肿液对内皮细胞的损伤作用［J］.中华烧伤整型外科杂志，2002，16(5)：680681.
［8］ 陈军.烧伤血清对大鼠肠上皮细胞膜的影响［J］.病理生理杂志，2002，18(7)：790793.
［9］ 季海平.烧伤创面的水性湿法治疗［J］.中国综合临床杂志，2005，21(3)：281282.
［10］ 陈意生.烧伤病理学［M］.第1版.重庆：重庆出版社，1993：919.
