肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定血清肌酐的比较

【关键词】  肌酐；肌氨酸氧化酶法；苦味酸法；方法比较

　　［摘要］ 目的：评测肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定血清样本肌酐(Cre)的偏倚。 方法：依据美国国家临床实验室标准协会EP9A文件，每天取临床样本8份，分别用两种方法测定血清样本Cre含量，共测定5 d，记录结果，去除离群点，线性回归方程和相关系数，进行偏倚估计。结果:在测定患者新鲜非黄疸血清样本Cre时，肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定结果的预期相对偏倚在Cre浓度<100 μmol/L时，两种方法的预期偏倚≤-1.8%， 酶法的测定结果低于苦味酸法; 当Cre浓度>200 μmol/L时，两种方法的预期偏倚≥11.9%，酶法的测定结果高于苦味酸法，当Cre浓度>500 μmol/L时，两种方法的预期偏倚≥20.1%。结论：随血清Cre浓度上升，酶法和苦味酸法的测定结果的预期偏倚增加，临床实验室在换用不同仪器或试剂时必须对肌酐测定的不同方法建立不同的值范围。
　　
　　［关键词］ 肌酐；肌氨酸氧化酶法；苦味酸法；方法比较

　　Measurement of Serum Creatinine by Sarcosine Oxidase and Picric Acid MethodsComparison between Two Methods

　　Abstract: Objective To determine the bias between two methods for measuring the serum creatinine (CRE). Methods Following the protocol described by the NCCL approved guideline (method comparison and bias estimation using patient samples)， 40 patient samples were analyzed in 5 operating days， each sample was analyzed in duplicate by both enzymatic assay and Jaffe kinetic assay. The duplicates were assessed for each method within the same run. The coefficient of correlation was calculated and the bias between the two methods was calculated accordingly. Results The bias between the enzymatic assay and Jaffe kinetic assay were -1.8% at 100 μmol/L， 11.9% at 200 μmol/L and 20.1% at 500 μmol/L for creatinine. Conclusion The bias between the two methods increases as the concentration of the serum creatinine increases. New reference range for creatinine should be established when new instrument or new reagent is applied.

　　Key words：Creatinine；Sarcosine oxidase；Picric acid methods； Method comparison

　　血中的肌酐(Cre)由外源性和内源性两类组成，主要由肾小球滤过，肾小管基本不重吸收。内源性Cre由肌肉代谢产生，每天生成量相当衡定，在外源性Cre摄入量稳定的情况下，血液中Cre的浓度取决于肾小球的滤过功能。当肾实质受损时血中Cre浓度升高，这是检测肾小球滤过功能的重要指标。为评测肌氨酸氧化酶法(Y)和碱性苦味酸法(X)测定血清Cre的偏倚，依据美国国家实验室标准协会EP9A文件，分别测定样本中Cre含量进行比较，报道如下。

　　1　材料和方法

　　1.1　仪器　Olympus AU 640(日本)。

　　1.2　肌氨酸氧化酶法(四川省迈克)， 批号020305， 校准物为Roche公司Calibrator for automated systems批号759350， 质控物为RANDOX公司 ASSAYED HUMAN MULTI SERA 296UN/1 R1，R2，苦味酸法(四川迈克)， 批号 020305， 校准物为Roche公司Calibrator for automated systems批号759350， 质控物为RANDOXASSAYED HUMAN MULTI SERA 296UN/1 R1，R2。

　　1.3　临床样本　本院患者血清标本， 全部标本总胆红素均<25 μmol/L。

　　1.4　分析方法　用改良Jaffe速率法，两法的参数均在试剂厂商提供的参数基础上加以修改. 每天选取8份临床患者样本，分别用Y和X在Olympus AU 640上按顺序1→8测定血清Cre，再按相反顺序8→1重复测定。

　　2　结果

　　2.1　记录测定结果(Xij和Yij， j表示重复次数)，每个样本测定结果的均值(Xi和Yi)、每样本两次重复测定值的差的绝对值(Dxi和Dyi)及两种方法测定结果均值间的差值(Yi-Xi)。以Yi对Xi作散点图，以(Yi-Xi)对Xi作偏差图。目测离群点。计算样本两次重复测定值的差的绝对值(Dxi和Dyi)的平均数。计算两种方法测定结果均值间差值(Yi-Xi)的平均数。判断：对任一样品， 如果重复测定值的差的绝对值(Dxi和Dyi)或两种方法测定结果均值间差值(Yi-Xi)超出平均数4倍，则检验结果视为无效，结果见表1。

　　表1　患者样本检验结果(略)

　　2.2　患者样本检验结果　见表1，Yi对Xi均值散点图见图1，偏差图见图2。

　　图1　Yi均值对Xi均值散点图(略)

　　图2　(Yi-Xi)对Xi散点图(略)

　　2.3　排除离群点后， 计算两种方法测定患者血清Cre浓度结果的线性回归方程为：Y=1.256X-27.446，相关系数r2为0.995。

　　2.4　根据上述线性方程，对酶法与苦味酸法测定患者血清Cre的结果进行预期偏倚估计，结果见表2。

　　表2　Y与X测定血清Cre结果的预期偏倚估计(略)

　　3　讨论

　　本文据NCCLS文件EP9A对Y和X测定血清CRE进行了比较。EP9A文件是为临床实验室及仪器厂家提供的用于评价同一被测物的两种测定方法之间偏倚的实验设计。对于实验室，评价的目的在于确定两种方法能否得到相同的结果。EP9A提供了基于患者标本的方法学比较实验设计。EP9A文件的方法比较实验设计规定最少样本例数为40，排除离群点数不得多于1。当r2≤0.95时，应增加测定样本量。本试验结果表明，随CRE浓度上升，Y和X的测定结果的预期偏倚增加。当CRE浓度<100 μmol/L时，两种方法的预期偏倚≤-1.8%， Y的测定结果低于X; 当CRE浓度在>200 μmol/L时，两种方法的预期偏倚≥11.9%，Y的测定结果高于X，当CRE浓度>500 μmol/L时，两种方法的预期偏倚≥20.1%。本文测定结果与居漪等［3］报道的结果有一定的差异， 可能是由于所用仪器和试剂不同所致， 提示临床实验室在换用不同仪器或试剂时， 应注意分析参数设定的合理性，并重新建立值范围。

　　参考 ：

　　［1］　NCCLS (EP9A ).Method comparison and bias estimation using patient samples［J］. Approved guideline.1995.

　　［2］　叶应妩.全国临床检验操作规程［M］.第2版.1997：262263.

　　［3］　居漪， 曾芝如.酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐的方法学比较［J］.上海医学检验杂志，2002， 12:2425.