红细胞参数筛查地中海贫血在产前检查中的应用价值

                          作者：许晓清 吴方贵 宋丹 谭玉梅 邱耀芳

【关键词】  红细胞参数

    摘  要:目的:探讨红细胞平均体积(MCV) 、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、红细胞体积分布宽度（RDW）并结合HbA2、HbF检测结果在筛查围产期地中海贫血中的应用价值。方法:采用自动血细胞分析仪分别对120例地中海贫血患者、90例非地中海贫血者和60例对照者进行MCV、MCH、RDW测定，层析法测定HbA2，碱变性法测定HbF，并对结果作相关统计学分析。同时将部分筛查结果与地中海贫血基因诊断（PCR）结果进行比较，分析筛查方法的敏感度和特异度。结果:地中海贫血组MCV、MCH、RDW与对照组比较有显著性统计学意义（P＜0.01）；对照PCR结果，MCV、MCH、RDW诊断轻型地中海贫血的敏感性98.3%，特异性76.7%。结论:MCV、MCH、RDW可作为筛查围产期地中海贫血的有效指标，可疑者建议做进一步的检查，以明确诊断。

　　关键词:  红细胞参数；  地中海贫血

　　The Value of Erythrocytic Parameters on Screening Thalassanemia in Prenatal Diagnosis

　　Abstract：Objective：To study the value of the  tests of mean corpuscular volume (MCV) 、mean corpuscular hemoglobin（MCH）、red blood cell distribution width (RDW )and hemoglobin zones analyses for the diagnosis of halassemia1.Methods：MCV、MCH and RDW were detected from 120 cases with thalassanemia，90 cases with non-thalassanemia and 60 cases control by automatic blood analyzer system. HbA2 were detected by chromatography，HbF were analyzed by anti-base test，and compared with the test of gene diagnosis（PCR test）in order to evaluating their sensitivity and specificity. Result：The results of MCV，MCH and RDW showed significantly different between the thalassanemia group and the control group（P＜0.01）.The sensitivity and specificity of MCV，MCH ，RDW was 98.8% and 73.6% comparing with PCR. Conclusion：MCV，MCH and RDW could use as significance level on screening thalassanemia in prenatal diagnosis.

　　Key words：  Erythrocytic parameters；  Thalassanemia

　　地贫的检验方法很多，随着分子生物学技术的，地贫的基因诊断已被应用于临床，成为目前诊断地贫的金标准，目前国内外用于明确诊断的是聚合酶链反应( PCR)技术结合其他分子生物学手段检测α、β地贫基因的方法［1，2］。但由于其方法烦琐、设备要求高、费用昂贵等原因，在基层单位不能作为常规诊断手段。因此，国内实验室仍常用方便、简捷的血液学检测方法，包括平均红细胞参数(MCV、MCH、MCHC) 、红细胞脆性等检测［3，4］。本文对近年我院2870例患者分别进行MCV、MCH、RDW测定，筛查轻度地贫患者，并将其中确诊的110例地贫患者和90例非地贫结果与地贫基因诊断结果作对照， 分析该筛查方法的敏感度及特异度。

　　1  资料与方法

　　1.1  临床资料：1999年12月至2005年8月我院住院患者及门诊婚检者共2870 例，年龄介于19～40岁之间。正常对照组: 男、女各30例， 血液学常规检查正常， 排除肝肾等方面疾患的婚检人群中随机抽取。

　　1.2  方法

　　1.2.1  MCV、MCH和RDW 测定：用日本Sysmex公司的SF-3000血细胞自动分析仪测定MCV、MCH 和RDW。

　　1.2.2  HbA2：用西班牙BioSystems S.A公司层析柱试剂盒测定。

　　1.2.3  HbF：按《全国临床检验操作规程》碱变性试验测定。

　　1.2.4  地贫基因诊断：α-地贫基因检测使用四重PCR 技术， β-地贫基因检测使用反向点杂交法， 基因诊断试剂由深圳益生堂生物有限公司提供。

　　1.3  本室的正常值：MCV: 82 fl～102 fl;MCH:27pg～33pg;RBC:3.6×1012/L～5.4×1012/L； RDW:0.118～0.135。

　　1.4  统计学方法：采用统计软件SPSS11.5 进行X2 检验及成组t 检验。

　　2  结果

　　2.1  共检出α-地贫：男90 例，女69 例; β-地贫: 男60 例， 女46例。α地贫的检出率为5.5 %，β地贫为3. 7 %，男女发病率差别无统计学意义(P > 0. 05) 。见表1。

　　2.2  男性α地贫HbA2含量及女性α地贫RBC，与正常对照组差别无统计意义(P > 0. 05)，其余各指标α、β地贫组与正常对照组均差别有统计学意义(P < 0. 05)。见表2， 表3。

　　2.3  筛查结果与PCR结果对照敏感度=a /（a+c）×100%，特异度=d/(b+d）×100%，从表4可得敏感度为98.3 % ，特异度76.7%。见表4。

　　表1  成人地中海贫血检出率（略）

　　表2  男子组血液学指标的检验结果（略）

　　表3  女性血液学指标的检验结果（略）

　　表4  MCV、MCH 筛查结果与PCR 结果对照（略）
      
　　3  讨论

　　地中海贫血是遗传性溶血性贫血症， 按受累基因分为α地贫、β地贫。20 世纪80 年代广东省卫生厅地贫筛查发现，α地贫为7. 3 % ，较全国高2. 95 % ， β地贫为1. 85%～ 3. 36%。较全国高0. 67 %［5］。我们的实验结果显示α地贫发生率为5.5 % ，β地贫3. 7 %，男、女地贫检出率差异无显著性。与李坚等报道的检出率相似［6］。

　　地贫患者可出现不同程度贫血， 重症α地贫胎儿常于出生前或出生时窒息死亡， 重症β地贫患者则于未成年前死亡， 目前尚无根本有效地贫的方法， 通过围产前遗传筛查淘汰重症地贫胎儿是控制该病发生的唯一途径。地中海贫血基因携带者的筛查， 国际上并无统一的临床实验方法， 用于确诊地贫的基因检测， 因操作繁琐、费用高、耗时长不能作为产前筛查的首选。近来由于血细胞计数仪的普遍应用，扩大了血液学常规检测的范畴， 所提供的MCV、MCH、及RDW、RBC 等红细胞参数在地贫中的变化已日益受到重视。从表2、表3可知，部分地贫患者可无贫血，国内有些研究报道其红细胞脆性也可表现为正常［7］，提示在作地贫的产前筛查时不能仅靠这两项指标。在地中海贫血中除Hb成分及含量发生改变外，幼红细胞利用铁也发生障碍，主要是原卟啉与铁结合受到障碍，呈小细胞低色素性贫血，MCV 降低。目前，国内外已较普遍应用MCV来筛查地中海贫血基因携带者［3，4］，但在外周血中存在双型红细胞（正色素与低色素两者并存）时，MCV 常处于正常范围，从而无法反映红细胞体积大小离散状态，并且在缺铁性贫血时MCV值也是降低的［7］。RDW 是表示红细胞体积大小分布的参数，是反映红细胞异质的重要指标， 用变异系数RDW-CV表示， 从量化上表示红细胞形态改变的程度， 地贫组RDW-CV> 0. 15， 与正常组差异存在显著性。其升高表示红细胞体积大小不一，差异增大。同属小细胞性疾病的缺铁和非贫血性杂合子型地中海贫血，他们的区别在于前者的RDW 增高，后者的RDW 正常或稍增高。从表2、3 也可以看出， 6项红细胞指标中，MCV、MCH 的降低最为明显， 与正常人的差距较大， 基本上不存在重叠， 同时RDW与正常人对比变化不大，统计学有差异主要是其中有部分地贫患者存在溶血现象，所产生的红细胞碎片或增加的网织红细胞至RDW增高，轻型地贫患者RDW一般增高不明显，可以与缺铁性贫血进行鉴别，表明MCV、MCH 和RDW结合可作为筛查α、β地贫的首选。当MCV < 80 fl， MCH < 26 pg，伴有RBC 升高，男> 6.0×1012/L ，女> 4.9×1012/L 时，应高度重视。

　　HbA2是鉴别轻型α、β地贫的一项特异性诊断指标，凡轻型β地贫HbA2几乎都升高，本组β地贫患者HbA2均>3.7%。HbF 对轻型者意义不大， 但对重型β地贫(β纯合子) 患者的诊断较为重要， 增高范围一般为10 %～ 90 %。对照PCR 结果，MCV、MCH、RDW 诊断轻型地中海贫血的敏感性98. 3 % ， 特异性76. 7 % ，与L au［8］及A ydinok［9］的报道相似， 造成假阳性的主要原因是其他小细胞低色素性贫血，如: 缺铁性贫血、某些慢性内科疾患等，临床诊断时应注意加以鉴别。MCV、MCH、RDW 结果在血细胞分析时，可一次获取，符合初筛指标的原则。因此，临床上根据MCV、MCH、RDW 初筛后，再测HbA2、HbF 对于地中海贫血的检出灵敏度高、假阴性率低， 是一项简单、、较准确的实验方法。但当患者同时遗传α、β地贫基因双重杂合时， 由于β-和α-肽链同时缺陷，体内可出现互补现象，往往表现为HbA2和HbF升高等β地贫的特征，α-地贫的特征被掩盖，临床多诊断为β-地贫，本文中通过基因诊断确诊了5 例α、β地贫双重杂合子，所以，MCV、MCH、RDW以及HbA2只能进行地贫的初筛， 要确诊还要进一步的检测，对筛查为β-地贫的患者要注意有无复合α-地贫基因，及时进行基因分析才能为临床确诊提供依据，有效避免重型地中海贫血患儿的出生。

　　:

　　［1］  钟梅，金志魁，徐湘民，等. 聚合酶链反应技术用于缺失型α地中海贫血的产前诊断［J］.中华妇产科杂志，1995，30：5972599.

　　［2］  Xu X， Liao C， Liu Z，et al. Antenatal screening and fetal diagnosis of beta-thalassemia in a Chinese population: p revalence of the beta-thalassemia trait in Guangzhou area of China［J］. Hum Genet，1996，98：199-202.

　　［3］  蔡稔，梁，潘丽珍，等.血液学指标在育龄人群地贫筛查中的诊断价值［J］.优生与遗传杂志，2003，11：129-132.

　　［4］  邓捷，刘新质，刘颖琳，等. 应用平均红细胞体积测定法及红细胞脆性一管定量法筛查地中海贫血［J］. 中华妇产科杂志，2000，35: 610-612.

　　［5］  亦逵.广东省地中海贫血的研究现状与展望［J］.广东医学，1998，19 (4)： 243.

　　［6］  李坚，廖灿，钟惠珠，等.大人群地中海贫血产前筛查及产前诊断结果［J］.热带医学杂志，2005，5(6)：783-785.

　　［7］  陈建霞，罗友娣，蔡远凤，等.轻型地中海贫血者的血液学实验参数研究［J］.江西医学检验，2005，23（2）：113-114.

　　［8］  Ｌ au YL ，Chan YY.  Prevalence and geno type of alpha2 and beta-thalassemia carriers in HongKong: implication for populmion screening［J］. N Engl JM ed， 1997，336：1298-1230.

　　［9］  A ydinok Y. Prevalence of the beta-thalassemia trait in 1124 students from aegean region of turkey［J］. T rop Pediatr，1997，43：184-185.