葡萄胎组织中HSP70的表达及与其预后的关系

                              作者：叶秀银 林琼 刘骏达 李志凌

 【关键词】  葡萄

    摘 要：目的：探讨热休克蛋白70的表达与葡萄胎侵袭恶变的关系。方法：采用Western免疫组织化学法检测48例葡萄胎组织石蜡标本中HSP70的表达情况。结果：48例观察标本中,侵袭组的HSP70表达阳性率显著高于未恶变组（p＜0.01）；滋养细胞由轻度至重度增生过程中，HSP70表达阳性率逐渐增高。中重度组的HSP70表达阳性率显著高于轻度增生组（P＜0.01）。结论：侵袭性葡萄胎组织的HSP70表达明显高于未恶变的葡萄胎组织。葡萄胎组织中HSP70过度表达者与其恶性程度增高有关。

    关键词：   热休克蛋白70；   葡萄胎；  侵袭性葡萄胎

    Expression of HSP70 in Hydatidiform Mole and Their Relationship with the Development of Postmolar Tumor

        Abstract: Objective:To study the expression of HSP70 in hydatidiform mole and to examine its relation with the development of invasive mole. Method: Histological sections of sample  from 48 cases of hydatidiform mole were examined for the expression of HSP70 by Immunohistochemistry methods. Result:In 48 trial specimens,the expression of HSP70 in the Invasive group was stronger than the hydatidiform mole.HSP70 expression in trophoblastic mild proliferation was  significantly lower than in middle and high proliferation（P＜0.01）. Conclusion: Expression of HSP70 is increased in hydatidiform mole which develops into invasive mole.The increased expression of HSP70 in hydatidiform mole may influence the development of invasive mole,and is probably associated with the malignant change of tumor.

    Key words：      Hydatidiform mole；      HSP70；      Invasive mole

    虽然葡萄胎通过病理诊断葡萄胎妊娠并不困难，但目前临床上对葡萄胎的术后是否复发或侵袭的问题上仍是被动的，能及早发现恶变的葡萄胎对临床有重要的意义。HSP70是一组重要应激蛋白，它通过与癌基因和抑癌基因产物相互作用，在肿瘤细胞的发生上常有异常的表达。HSP70与葡萄胎的关系报道尚少，本文研究了HSP70在葡萄胎的表达情况并探讨其与葡萄胎恶变侵袭的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料：本研究所用的标本按随机方式取自2000年至2003年首次以葡萄胎诊断进行清宫和手术的标本。其中葡萄胎39例，侵蚀性葡萄胎9例。随访2年，葡萄胎中未发生恶变的31例，发生恶变的8例。标本确诊以病理诊断为准，依据宋氏滋养细胞肿瘤分为：Ⅰ期11例，Ⅱ期6例，Ⅲ期2例。按WHO预后评分≤ 4分的13例,＞4～7分的6例。

    1.2  免疫组织化学HSP70检查:切片脱蜡后行抗原修复，分别滴加HSP70及bas抗体4过夜，DAKO EnVsion加入后温育1h，DAB显色，苏木精复染，脱水封片。光镜观察，阳性结果为细胞内有棕黄色颗粒出现，依显色程度分3级：阴性无显色，浅棕黄色为阳性，棕褐色为强阳性。

    1.3 结果判定标准：免疫组化结果采用半定量计分法判定。即A：按阳性着色程度评分，0分：无着色；1分：、浅黄色；2分：棕褐色；3分。B：按阳性细胞所占比例评分，0分：＜5%；1分：5%～10%；2分：＞10%～50%；3分： 50%～80%；4分：＞80%。两者乘积：0分为阴性（-        ）1～4分为弱阳性（+）；5～8分为中度阳性（+ +）；9～12分为强阳性（+ + +）。

    1.4 数据处理：应用SPSS软件,采用秩和检验和χ2检验对组间进行统计学检验。

    2 结 果

    在免疫组化后，可见HSP70主要定位在基质细胞胞膜。在葡萄胎组织中表达阳性为61.5%；首诊已经发生侵袭葡萄组HSP70表达阳性率为88.9%，两者阳性率差异的比较具有统计学意义(P＜0.01)见表1。在要随访的39例葡萄胎中，未恶变的HSP70表达阳性率为61.3%；恶变组表达阳性率为87.5%(P＜0.05)，见表2。同时结果显示在滋养细胞由轻度至重度增生过程中，表达阳性率逐渐增高（见表3）。中重度组的HSP70表达阳性率显著高于轻度增生组（P＜0.01）。

    表1 首诊48例葡萄胎与侵袭葡萄胎HSP70表达的比较（略）

    表2 随访的39例葡萄胎的HSP70的表达比较（略）

    表3 滋养细胞增生与HSP70的表达的关系（略）

    3 讨 论

    休克蛋白70(Heat-shock Protein 70,HSP70)是一组细胞高度保守蛋白质，在肿瘤形成过程中，肿瘤细胞的不断增殖和合成代谢增强，需要大量HSP70来调节和稳定这一异常增殖过程［1］。另一方面肿瘤细胞的突变或异蛋白质的存在也刺激了HSP70的合成，使其呈现持续的高诱导的表达［2］。某些恶性肿瘤（如肝癌）已证实HSP70的高表达与肿瘤的恶性程度及病人的生存期有关［3］。有动物试验表明：对于正常的妊娠子宫中有一定程度的HSP70的表达，在妊娠早期的基质细胞内通过介导类固醇激素受体复合物发挥作用，类固醇激素复合物的装配和运输；另一方面雌激素特别是雌二醇效应的增强，促进了HSP70 RNA的合成，而产生一定合适量的HSP70［4］。本文的结果显示HSP70在葡萄胎组织的呈高表达状态，在一般宫内组织的表达率一般只有23.2%［5］，而本文中的葡萄胎组和侵袭葡萄胎组的HSP70的阳性表达率分别高达61.5%和88.9%，说明葡萄胎组织有明显的HSP70高表达状态。而且发生侵袭的葡萄胎组的表达率又明显高于未侵袭组。从随访结果来看，有成为侵袭性葡萄胎的组织中，HSP70的表达明显高于一直未恶化者。研究结果说明在早期便出现侵袭的葡萄胎组织中的HSP70表达明显增多增强，也即高HSP70表达能反映该疾病的恶性程度，早期高HSP70表达预表该葡萄胎组织有侵袭倾向。HSP70的高表达与葡萄胎关系，我们推测：可能是由于正常胚胎组织发育中某些因素导致了HSP70表达异常，并通过相互的刺激和诱导作用，导致了滋养细胞疾病发生发展。但具体机制仍有待进一步研究。综上所述，葡萄胎组织中HSP70表达可反映葡萄胎的组织中恶变程度和侵袭倾向，检测组织中HSP70表达情况可作为预测葡萄胎预后的指标之一。

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    ［1］ Ravagnan,L; Gurbuxani,S; Susin,SA.Heat-shock protein 70 antagonizes apoptosis-inducing factor［Ｊ］. NatCell-        Biol， 2001，3(9): 839-43．

    ［2］ Li,GC; He,F; Shao,X; Urano,M.Adenovirus-        mediated heat-        activated antisense Ku70 expression radiosensitizes tumor cells in vitro and in vivo［Ｊ］. Cancer-        Res，2003，63(12): 3268-        74．

    ［3］ Chuma, M; Sakamoto M; Yamazaki, K.Expression profiling in multistage hepatocarcinogenesis: identification of HSP70 as a molecular marker of early hepatocellular［Ｊ］ .arcinoma.Hepatology， 2003，37(1): 198-        207.

    ［4］ 张顺利，魏纪东，张文学，等.热休克蛋白70在妊娠早期小鼠子宫中的表达及雌激素的诱导作用［Ｊ］.动物学报，2003，49（3）：346-        352．

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