P-选择素和可溶性细胞粘附分子联合检测在Ⅱ型糖尿病的临床意义

【关键词】  选择

    摘要：目的：探讨Ⅱ型糖尿病患者血中P-选择素（P-selection，GMP140）、可溶性血管细胞间粘附分子-1（soluble vascular cell adhesion molecule-1，sVCAM-1）和可溶性细胞间粘附分子-1（soluble intercellular adhesion molecules-1，sICAM-1）的水平变化及对糖尿病并发症早期评估和风险预测的价值。方法：采用流式细胞术和ELISA法分别检测75例Ⅱ型糖尿病患者（糖尿病组）血浆GMP140和血清sVCAM-1、sICAM-1的水平，并与30例健康人（对照组）进行比较。结果：糖尿病组GMP140、sVCAM-1和sICAM-1的水平均显著高于对照组(P<0.01～0.05)；而有血管并发症者的GMP140、sVCAM-1和sICAM-1的水平又明显高于无血管并发症者(P<0.01～0.05)；糖尿病组GMP140水平与sICAM-1、sVCAM-1水平变化呈正相关(r=0.576～0.624，P<0.01)。结论：GMP140、sICAM-1和sVCAM-1相互作用、可能参与了糖尿病的发生与，联合检测对监测糖尿病病情变化及早期诊断血管并发症有重要意义和临床价值。

    关键词：糖尿病；P-选择素；细胞粘附分子；血管病变

    Clinical Significance of Combined Assay of P-selection and Cell adhesionmolecules in Type 2 Diabetes

    Abstract：Objective：To explore the changes of blood P-selection (GMP140),soluble vascular cell adhesion molecule-1(sVCAM-1), and soluble intercellular adhesion molecules-1(sICAM-1), the relations of them to vascular complications in patients with type 2 diabetes mellitus(T2-DM). Method：By using the ELISA and flow cytometric immunoflurescence methods, the concentration of GMP140, sICAM-1 and sVCAM-1 were measured in 75 patients with T2-DM and 30 controls. Result：The concentration of GMP140, sICAM-1 and sVCAM-1 were significantly higher in T2-DM patients than that in controls(P<0.01～0.05), the all indicators were more obvious in patients with anginopathy than that in patients without angiopathy(P<0.01～0.05). The concentration of GMP140 was positively correlated to sICAM-1 and sVCAM-1 (r=0.576～0.624, P<0.01). Conclusion：The interaction of GMP140 and sICAM-1, sVCAM-1 might participate in the occurance and development of T2-DM, and correlated to the occurance and development of diabetic angiopathy.

    Key words：Diabetes；P-selection；Cell adhesionmolecules；Angiopathy

    Ⅱ型糖尿病患者常并发各种血管性疾病，并已成为其最主要的死亡原因。糖尿病并发血管性疾病的机制甚为复杂。近年来，血栓前状态与心脑血管病变的密切关系日益受到关注，血栓前状态是血管内皮细胞受损、血小板和白细胞被激活、凝血因子被活化、抗凝和纤溶系统功能减低，以及血液粘度增高等的病理状态，而血小板活化及细胞粘附分子与内皮细胞损伤起着重要的作用［1］。本文通过对Ⅱ型糖尿病患者血浆P-选择素（GMP140）和血清可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）、可溶性血管细胞间粘附分子-1（sVCAM-1）水平变化的研究，探讨其与糖尿病血管并发症的关系，为早期预防或延缓糖尿病血管并发症的发生与发展提供理论依据。

    1资料与方法

    1.1临床资料：选择我院2003年10月至2005年4月住院的Ⅱ型糖尿病患者75例，均符合1999年WHO制定的糖尿病诊断及分型标准。其中有血管病变者40例（包括心肌梗死、脑梗死、心绞痛史或心电图示冠心病、视网膜病变或尿微量白蛋白检测确定为糖尿病肾病者），其中男22例、女18例，年龄31～78岁（61.6±1.7岁）；无心脑血管病变者35例，其中男19例、女16例，年龄41～70岁，平均（52.9±12.3)岁；对照组30例为健康体检者，其中男16例，女14例，年龄（56.4±5.8）岁，排除糖尿病、高血压、冠心病、脑血管病及肾脏疾病，其年龄、性别、体重指数(BMI)与糖尿病组相匹配。所有受检者检查前10d内未服用阿司匹林、潘生丁、肝素等影响血小板功能的药物。

    1.2方法：两组均于清晨空腹采集静脉血5mL，P-选择素检测血标本1.8ml置于枸橼酸钠抗凝剂109mol/L试管中，低温离心（1500r/min）15min，分离血浆置于-20℃保存；余下3.2 ml离心取血清保存于-20℃冰箱内备用；血浆P-选择素采用美国Beckman Coulter公司的流式细胞仪检测；血清sICAM-1、sVCAM-1检测采用ELISA法，试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司(为法国DLACLONE公司产品)提供。实验操作严格按说明书进行，所有标本均在同一批内检测。

    1.3统计学处理：结果以±s表示，组间比较采用t检验或方差分析，相关关系采用直线相关分析。

    2结果

    两组标本GMP140、sICAM-1和sVCAM-1水平变化见表1。直线相关分析表明，糖尿病组血清GMP140水平与sICAM-1、sVCAM-1水平变化呈正相关(r=0.576～0.624，P<0.01)。

    表1两组GMP140、sICAM-1、sVCAM-1的水平比较（略）注：与对照组比较，P<0.05，P<0.01；与无血管并发症组比较，△P<0.05，△△P<0.01

    3讨论

    P-选择素(P-selection)是一种主要存在于血小板α颗粒和内皮细胞的WeibelPalade小体内的糖蛋白，当内皮细胞受损和血小板活化时，血中P-选择素水平升高，它可促使血栓素A2释放增加而拮抗前列环素和一氧化氮的局部扩血管作用，影响凝血因子Ⅷ相关抗原和抗凝因子Ⅲ等，同时它还参与白细胞和内皮细胞及血小板的初始粘附，被认为是动脉硬化形成的初始病理过程的一个重要因子［2］。有报道粥样斑块的破碎是由炎症引起，而破碎的斑块又可促进血栓的形成及血小板的活化而导致P-选择素进一步升高。故P-选择素系血小板活化的特异性指标，可作为心脑血管疾病的独立危险预报因子［3］。血小板活化(血小板粘附、聚集、释放等反应)时，颗粒膜蛋白与血小板膜蛋白相互融合，使颗粒膜蛋白翻转到血小板膜表面被释放于血液中，其浓度变化是血小板活化释放的特异性标志［4］。Ⅱ型糖尿病患者由于糖、脂质代谢紊乱，多元醇代谢旁路及非酶糖化加强可致血小板和血管内皮细胞功能损伤，血小板活化，使血栓易于形成［5］，促进血管病变发生。本文结果显示：Ⅱ型糖尿病有血管并发症患者P-选择素水平显著高于无血管并发症患者，差异有显著性(P<0.01～0.05)，表明Ⅱ型糖尿病有血管并发症患者血液处于高凝状态，血小板表面P-选择素表达增加，即血小板活化增强，可增强白细胞粘附，造成相应毛细血管阻塞和内皮细胞损伤，提示P-选择素水平与糖尿病伴血管并发症之间有潜在的联系。但无血管病变组P-选择素水平也升高，表明Ⅱ型糖尿病患者体内已经存在血小板活化，这进一步验证了血小板功能的改变可先于血管病变的发生［6］，由此推测，及早采取措施抑制血小板活化，可预防血管病变的发生。
粘附分子是一类介导细胞与细胞、细胞与细胞间质粘附作用的膜表面糖蛋白。sICAM-1和sVCAM-1均属于粘附分子中的免疫球蛋白超家族成员，是具有5个跨膜结构、分子量为80～110KD的糖蛋白。sICAM-1和sVCAM-1分别由ICAM-1、VCAM-1的膜外段脱落而成，由白细胞、内皮细胞、上皮细胞等表达，参与细胞的信号转导及活化、移动等病理生理过程。有研究表明：sICAM-1、sVCAM-1是血管内皮细胞损伤的标志物。Ⅱ型糖尿病患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平增高与糖代谢紊乱、血管内皮细胞损伤有关。血清sICAM-1、sVCAM-1水平增高可介导白细胞与内皮细胞粘附，引起内皮细胞损伤、细胞外基质堆积、血管通透性增加；同时，内皮细胞损伤可引起血小板功能异常，导致血小板粘附与聚集，产生动脉粥样硬化和血管病变。本文结果显示：Ⅱ型糖尿病有、无血管病变患者血清sICAM-1和sVCAM-1均高于健康对照者（P<0.010.05），其中Ⅱ型糖尿病有血管病变患者的sICAM-1、sVCAM-1又高于无并发症者，提示此两种可溶性粘附分子与Ⅱ型糖尿病及血管并发症关系密切，参与了糖尿病及其血管病变发病的病理生理过程，并随病情进展而增高。因此，sICAM-1与sVCAM-1在加速糖尿病血管病变方面起潜在作用，监测sICAM-1和sVCAM-1的变化，对早期发现Ⅱ型糖尿病并预防其进一步向血管并发症有重要意义。综上所述，P-选择素、sICAM-1和sVCAM-1联合检测，对指导临床及早预防和DM并发症，以及对血管病变风险评估具有重要意义和实用价值。

    文献：

    ［1］Tschoepe D. The activated megakaryocyte-platelet-system in vascular disease: focus on diabetes［Ｊ］. Semin Thromb Hemost, 1995, 21(2):152-160.

    ［2］姚巍，杨兰，陈天铎，等.P-选择素与心血管易患因素关系的探讨［J］.急救医学，2002，22（1）：18-20.

    ［3］水华，杨成悌，辛楠. P-选择素在心血管病中的应用［J］.心血管病学进展，2001，22（3）：165.

    ［4］谢建平，康后生. 糖尿病患者肾小球滤过率与血栓素β2、血小板ａ-颗粒膜蛋白的关系［J］.临床内科杂志，2001，18(5)：392.

    ［5］Caputo DG, Villarejo F, Valle GB, et al. Hydration in diabetic ketoacidosis. What is the effect of the infusion rate［Ｊ］． Medicina B Aires, 1997, 57(1): 15-20.

    ［6］王振义，李家增. 血栓与止血―基础理论与临床［M］.第2版．上海：上海技术出版社，1996．231.