川芎嗪治疗新生儿缺氧缺血性脑病临床研究
【关键词】 川芎嗪；新生儿；缺氧缺血性脑病；血钙；自由基
【摘要】 目的 探讨川芎嗪新生儿缺氧缺血性脑病的疗效和安全性。 方法 将42例缺氧缺血性脑病新生儿随机分为研究组（基本治疗+川芎嗪治疗）23例，对照组（基本治疗）19例，同时选取10例健康儿为健康组。对三组患儿治疗前后一氧化氮、丙二醛、神经元特异性烯醇化酶、血钙、新生儿神经行为量表评分变化进行比较分析。 结果 入院1～2d研究组与对照组血钙无明显差异(t=0.893,P＞0.05),且均低于健康组(t=4.866,4.803,P＜0.05);10～11d后,治疗组上升明显高于对照组(t=2.341,P＜0.05);血浆一氧化氮、丙二醛治疗前研究组与对照组无明显差异,研究组治疗后较治疗前明显下降,与对照组比较差异显著(t=3.76,2.13,P＜0.05);研究组与对照组治疗前神经元特异性烯醇化酶无显著差异(t=0.243,P＞0.05),两组较健康组高(t=6.09,5077,P＜0.01)，研究组治疗后较治疗前显著降低(t=9.15,P＜0.01),对照组治疗前与治疗后无显著差异(t=1.839,P＞0.05);研究组与对照组治疗前新生儿神经行为量表评分无显著差异, 治疗后研究组较对照组评分差异明显(P＜0.05)。 结论 川芎嗪可通过阻止钙内流,减少自由基，对缺氧缺血性脑病新生儿脑组织具有保护作用。
【关键词】 川芎嗪；新生儿；缺氧缺血性脑病；血钙；自由基
Clinical study on the tetramethylphylpyrazine in the treatment of neonatal hypoxicischemic encephalopathy
【Abstract】 Objective To explore the curative effects and safety of the tetramethylphylpyrazine(TMPZ) in the treatment of neonates with hypoxicischemic encephalopathy(HIE). Methods 42 neonates with HIE were randomly divided into research group(n=23,basicc treatment combined with TMPZ) and control group(n=19, single basic treatment), and 10 healthy neonates selected as healthy group. Before and after treatment, comparative analyses of nitric oxide(NO), malondialdehyde (MDA), Neuronspecific enolase(NSE),serum calcium and the scores of Neonatal NeuroBehavior Assessment Scale(NNBAS) were conducted among the 3 groups. Results In the 1st and 2nd days of admission, serum calcium of the research and control groups had no difference(P>0.05) and both were lower than the healthy group(P<0.05); after 10~11 days, serum calcium was significantly higher in the research than that in the control group(P<0.05); before treatment there were no obvious differences in plasma NO and MDA between the research group and control group, the NO and MDA of posttreatment were significantly lower than those of pretreatment and had significant difference from the control group(P<0.05); before treatment, the NSE of the research and control groups had no significant difference(P>0.05) and both were higher than the healthy group(P<0.01), that of the research was significantly lower after treatment than before treatment(P<0.01) and that of the control had no obvious difference(P>0.05); the scores of the NNBAS had no obvious difference before treatment and did significant difference after treatment(P<0.05) between the research and control groups. Conclusion The TMPZ can protect brain tissue of neonates with the HIE via preventing serum calcium into cell and decreasing free radical.
【keywords】 TMPZ; neonates; HIE; serum calcium; free radical
新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxicischemic encephalopathy,HIE)的发病机理极为复杂，至今尚无有效的治疗方法。随着神经医学的，越来越多的学者认为钙超载及氧自由基增多均参与缺氧缺血性脑损伤的病理过程。有体外实验和动物实验表明，川芎嗪有阻抑钙内流,清除自由基的作用［1］。为进一步探讨川芎嗪对HIE新生儿脑组织的保护作用，我们进行了相关研究，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 资料
选取我院新生儿科2003年5月～2004年10月收治的42例HIE为研究对象，均符合1996年10月杭州新生儿会议制定的诊断依据和分度标准［2］。其中男性22例，女性20例,胎龄37～42w,33例<1d，6例1～2d，3例2～3d；出生体重2500～4000g。随机将42例患儿分为研究组（基本治疗方法+川芎嗪治疗）23例，对照组19例,两组孕周、体重、性别、日龄、分娩方式和临床分度等情况均无显著性差异(P>0.05)。随机选取10例健康足月儿为健康组，其中男性6例，女性4例，日龄1～3d。两组HIE基本治疗方法相同，研究组另加用川芎嗪注射液(无锡市第七制药厂产品)2～4mg・kg・d-1，加入生理盐水20～40ml中静脉滴注，疗程10d。
1.2 方法
1.2.1 选材方法
所有HIE病例分别在入院后1～2d，10～11d各采静脉血2试管各2ml，1试管离心后取血清测定血清总钙，另1试管离心后取血浆分别测定一氧化氮(nitric oxide, NO)、丙二醛(MDA)、神经元特异性烯醇化酶(neurone specific enolase,NSE)。健康组测定血清总钙及神经元特异性烯醇化酶。
1.2.2 测定方法
(1)NO测定。采用硝酸还原酶法(由南京建成生物工程研究所提供NO检测试剂盒)测定。具体操作按说明书要求进行。(2)MDA测定(试剂盒由南京建成生物工程研究所提供)。具体操作按说明书要求进行。(3)NSE测定。应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定血浆中NSE水平(试剂盒由军事医学科学院提供)。(4)血钙(总钙)测定。用甲基百里酚兰比色法测定。(5)新生儿神经行为量表(NBNA)评分。研究组和对照组于日龄3～4d，10～11d进行NBNA评分。根据鲍秀兰［3］提出的操作方法和评分标准，由受过专门训练的人员操作。
1.2.3 统计方法
全部数据采用SPSS10.0软件包进行统计。实验数据以均数±标准差表示，样本均数比较应用t检验。
2 结果
2.1 治疗组与对照组血清钙水平的变化，见表1。表13组血钙水平比较（略） 注：与健康组比较:*P<0.05;研究组与对照组比较:**P<0.05
由表1可知：入院后1～2d研究组与对照组血清总钙值差异无显著性(t=0.893，P>0.05)，但均低于正常值(2.2mmol・L)，两组与健康组相比均有显著性差异(t=4.866，4.083，P均<0.05)。治疗10～11d后血清总钙值均有上升，研究组上升高于对照组，差异显著(t=2.341，P<0.05)。
2.2 血浆NO及MDA含量变化比较，见表2。表2 研究组、对照组血浆NO、MDA含量(略)注：与治疗后的对照组比较:*P<0.05
由表2可知：两组血浆NO及MDA在治疗前均无显著性差异，而治疗后研究组较治疗前均有明显降低，与治疗后对照组比较均有显著性差异(t=3.76,2.13,P均<0.05)。
2.3 血浆NSE水平变化比较，见表3。表3 3组HIE、NSE水平比较 (略)注：与健康组比较:*P<0.01;与治疗前比较:**P<0.01
由表3可知：前研究组与对照组NSE比较差异无显著性(t=0.243，P>0.05),较健康组明显增高(t=6.09，5.77，P均<0.01)；研究组治疗后较治疗前NSE水平显著降低(t=9.15,P<0.01)，对照组与治疗前比较差异无显著性(t=1.839，P>0.05)。
2.4 NBNA评定结果比较，见表4。表4 两组神经行为评分比较 (略)
由表4可知：治疗前研究组与对照组NBNA评分无明显差异,治疗后两组NBNA评分差异有显著性(P<0.05)。
3 讨论
有研究表明,HIE的发生及其脑损伤与细胞内钙超载密切相关。当机体缺氧时,可形成大量自由基,使细胞膜的脂质过氧化损伤,引起细胞膜通透性增加,细胞外钙离子大量内流,同时由于三磷酸腺苷(ATP)生成减少,使依赖ATP供能的钙泵活性下降,细胞内钙离子不能转运到细胞外,细胞内钙离子积蓄,使血钙下降。另外,由于甲状旁腺功能的抑制作用,致甲状旁腺分泌减少,对血钙的调节功能下降,进一步加重低钙血症［4］。由于细胞内钙离子大量增多,激活磷脂酶,引起游离脂肪酸增多,抑制线粒体功能,ATP生成减少,细胞代谢障碍,诱发细胞的凋亡［5］,此外,钙离子还可通过黄嘌呤氧化酶、NO、前列腺素等促进氧自由基形成,直接加重神经细胞的损伤,成为再灌注损伤的重要机制。
川芎嗪是从中药川芎中提取的一种生物碱-四甲基吡嗪，具有活血化瘀作用，可扩张血管，降低血小板聚集，改善心脑血供，多用于心脑血管疾病，有效且安全。本研究结果显示:在HIE研究组和对照组中都存在明显的低钙血症,虽所有病例均未补钙，但研究组应用川芎嗪治疗后，血清总钙上升明显，基本恢复至正常，与对照组相比有显著性差异。其原因考虑可能与川芎嗪的钙拮抗功能有关，即川芎嗪能激活腺苷酸环化酶使细胞内环腺苷酸受体蛋白（cAMP）增加，从而阻断钙内流，提高血清钙浓度［6］。
NO是由NO合成酶(NOS)催化的一种小分子的气体自由基,脑缺氧缺血时,由于大量Ca2+内流,激活NOS,导致NO过量合成。NO可以通过激活腺苷酸环化酶而使环磷酸鸟苷（CGMP）水平升高,扩张脑血管,增加脑水肿。高浓度的NO可抑制多种线粒体电荷传递系统的酶,抑制细胞呼吸和能量代谢。另外NO还可以通过与氧自由基反应形成一系列高反应性的有毒基团,导致神经元死亡。MDA是氧自由基与生物膜多聚不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的产物,其产生量与氧自由基的量相平行,测定MDA最可反映氧自由基的水平。HIE时检测NO与MDA水平可间接反映脑损害的程度,本研究表明,研究组治疗后较治疗前有明显降低，与治疗后的对照组相比有显著性差异。提示川芎嗪有显著减少自由基的作用，这与报道相一致［1］。
NSE是神经细胞质中的主要成分,脑损害时神经细胞水肿、坏死、崩解,使血液中NSE明显升高,可作为判断脑细胞损伤程度的指标［7］。本研究结果显示,HIE治疗组和对照组血浆NSE水平比健康新生儿组明显升高,川芎嗪治疗后NSE明显降低，同时NBNA评分明显增高。
综上所述，我们认为川芎嗪能通过阻止细胞外钙内流以及减少氮氧自由基及氧自由基等多种途径来减轻HIE新生儿脑组织的损伤，对HIE新生儿的脑组织具有保护作用，可用于HIE治疗，且川芎嗪价格低廉，副作用少，药源广泛，值得临床推广应用。
文献
［1］边晓丽，陈学敏，刘艳霞，等.川芎嗪及其衍生物对羟自由基的清除作用［J］.药学杂志,2003,23(11):678
［2］中华医学会儿会新生儿学组.新生儿缺氧缺血性脑病诊断依据和临床分度［J］.中华儿科杂志,1997, 35(2):99
［3］鲍秀兰,虞人杰.150例正常新生儿神经行为测定和评价［J］.实用儿科杂志,1988,3(2):83
［4］林冬云,侯燕明,郑锐金.新生儿缺氧缺血性脑病血清钙浓度变化对后期智能发育的影响［J］.临床医学生物工程学杂志,2003,9(3):251
［5］Rosenbaum DM,D Amore J. Pretreatment with intraventricular aurintricarboxylic acid decreases infarct size by inhibiting apoptosis following transient global ischemia in gerbils［J］.Ann Neurol,1998,43:654
［6］王丹华，张宏，赵时敏，等.硫酸镁和川芎嗪对新生儿缺氧缺血性脑损害的预防作用［J］.中国医学科学院学报,1997,19(4):301
［7］王家勤.缺氧缺血性疾病［M］.北京:人民军医出版社,1999:42～47
