血清钙邻?甲酚酞络合酮测定中试剂加入方法的评价
［关键词］ 试剂加入方法；血清钙；邻?甲酚酞络合酮法
Evaluation of Reagent Adding Methods of OCPC For the Determination of Serum Calcium
Abstract：Objective To evaluate two different methods of reagent adding of OCPC for the determination of serum calcium．Methods Method 1?Mixing alcohol amine buffer(R1) with OCPC(R2)in the preparation tube and then putting the preparation reagent into sample tube(method 1 is the same as the manufacturer's direction);method 2?Adding R1 and R2 respectively and then mixing．Comparing the results of method 2 with results of automatic instrument and observation of precision and accuracy of this method．Results The VIS of EQC for serum calcium in our Laboratory was 0～289 when the assay of manufacturer's direction was used；but PT of EQC for serum calcium has been 100 continuous since 2003 with method 2．Concentration of serum calcium of 30 samples was determined by OCPC method assays with Roche HITACHI MODULAR instrument and by the method 2 assays with MD?100 semiautomatic instrument．It is highly correlative between the data obtained with the two methods(r=0.986.P＜0.001)．The rate of recovery was 99.5％．the CV with in run was 4.03％ and the CVday to day was 5.6％.Conclusion The method 2 is simple，fast,accurate，avoiding interference，and suitable for clinical use．
Key words：Reagent adding methods;Serum calcium;OCPC method
我室引入全自动生化分析仪较晚，在相当长时间里一直用半自动生化分析仪测定血清钙。我们发现预先不配工作液，将两种试剂按顺序直接加入样品管中可以避免工作液管污染问题，效果也很好。现报告如下。
1 材料和方法
1.1 样本来源 标本来自本院患者；省室间质控物。
1.2 血清钙手工法测定 使用美国MD-100半自动生化分析仪，钙试剂盒和质控品均由中生北控生物科技股份有限公司提供，邻?甲酚酞络合酮比色法(OCPC)，最初我们完全按说明书操作，即预先配工作液，将乙醇胺缓冲液(R1)与邻?甲酚酞络合酮(R2)等量混合，加到样品管中进行测定；后来改为R1与R2直接按顺序加入样品管中，混合均匀，预温5 min立即比色。
1.3 血清钙全自动生化分析仪测定 Roche HITACHI MODULAR型分析仪及原装试剂盒，OCPC法双试剂，质控两种：高值批号163661?10；正常值批号164098?04，按照公司规定的程序作检测。
1.4 统计学方法 计量资料以±s表示，对检测结果进行相关性分析。
2 结果
2.1 2003年之前，我们完全按说明书操作，我室的室间质评血清钙VIS在0～289之间，有5次VIS＞150为不及格；后来改为直接加入试剂方法，这时室间质评由VIS改为PT，即根据国家可允许误差，确定固定限，测定值在范围内则PT为100，超出范围PT则为0。连续3 a省质控物中，高值均值为3.15，低值均值为2.12，我室PT得分全部为100，而且与均值很接近。
2.2 比较试验 取血清30份分别用Roche HITACHI MODULAR分析仪和直接加入试剂法MD-100半自动生化分析仪测定血清钙，结果全自动生化分析仪法为(2.58±0.35) mmol/L，半自动生化分析仪为(2.61±0.37) mmol/L。两种检测方法所得数据差异无显著性，具有良好的相关性(r=0.986，P<0.01)。
2.3 回收试验 取钙含量为2.6 mmol/L的血清0.2 ml，加入浓度为2.5 mmol/L的钙标准液0.1 ml，采用手工直接加入试剂法平行测定5份回收实验样品，其回收率为97.6%～101.4％，平均回收率99.5％。
2.4 重复性试验 收集1份混合血清，采用手工直接加入试剂法分别进行测定20次，并等份分装，1份/d连续检测20 d。结果批内试验为(2.48±0.10) mmol/L，CV为4.03％；批间试验为(2.50±0.14) mmol/L，CV为5.6％。
3 讨论
OCPC试剂灵敏度很高，所用的试管和器皿如有微量的钙污染亦会引起测定误差［1］，我室一次性塑料管没有大的，配工作液仍用玻璃管，存在洗刷不净问题，所以有几次VIS>150。按说明书操作不是不好，而是我室的玻璃试管没有处理好，若工作液管有钙污染，整批试验都会受到影响，所以我们改变了加试剂的方法，这样既可以节省一个工作液管，又可以避免钙污染，既又方便、快速、准确，适合临床实验室推广应用。虽然现在大多数采用全自动生化分析仪测血清钙，但我们认为手工法测钙仍然有它的价值。在做室间质控时，我们发现有2份黄疸特严重的血清，半自动测得结果PT得分100，而有几台全自动生化分析仪结果PT得分0，这可能是我们手法好，加样量大的缘故。我室现在引进了全自动生化分析仪1台，但半自动生化分析仪仍然在使用，做急诊项目。无论用全自动生化分析仪还是半自动生化分析仪测血清钙我们都很自信。
：
［1］ 叶应妩，王毓三．全国临床检验操作规程［M］．第2版．中华人民共和国卫生部医政司，1997：190．
