天王补心丹延缓衰老作用的实验研究
【摘要】 目的:验证天王补心丹是否具有延缓衰老的作用。方法:本实验采取建立D-半乳糖导致小鼠衰老模型,观察天王补心丹对衰老小鼠记忆力,血清超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA),肝组织SOD、MDA的影响。结果:天王补心丹可以改善衰老小鼠记忆力;提高SOD活性,降低MDA含量。结论:天王补心丹3个剂量组均可延缓衰老,以中剂量组效果较佳。
【关键词】 天王补心丹;延缓衰老;小鼠;实验研究
天王补心丹出自于《校注妇人良方》,方由人参、茯苓、玄参、丹参、桔梗等13味药组成,具有滋阴清热,养血安神的作用。为了探索天王补心丹是否具有延缓衰老作用,本文进行了相关性的实验研究。
1 材料与方法
1.1 动物 ICR小白鼠,雌雄各半,体重(20±2)g,由吉林大学实验动物中心提供。
1.2 药品和试剂 天王补心丹购自于正规药店,并经过严格鉴定,水煎后浓缩,制成0.5g.ml药液,放入4℃冰箱保存备用;维生素E-C颗粒,由无锡嘉菱医药有限公司生产,批号:060302,使用前用蒸馏水振荡配成5%的混悬液;D-半乳糖,由国药集团化学试剂有限公司提供;SOD试剂盒、MDA试剂盒,均购自于南京建成生物研究中心。
1.3 仪器 水浴恒温振荡器(江苏金坛市实验仪器厂)、低速离心机(北京医用离心机厂)、电动搅拌机(杭州仪表电机厂)、LD型秤(沈阳龙腾电子有限公司)、GF-D800型半自动生化分析仪(山东高密彩虹分析仪器有限公司)。
1.4 给药与造模[1-2] 将小鼠随机分为6组,每组10只。分别为空白组、模型组、维生素E-C组、天王补心丹高、中、低剂量组。空白组:皮下注射生理盐水0.1ml.10g,造模第11d起灌胃蒸馏水0.1ml.10g;模型组:皮下注射D-半乳糖0.1ml.10g,造模第11d起灌胃蒸馏水0.1ml.10g;维生素E-C组:皮下注射D-半乳糖0.1ml.10g,造模第11d起灌胃维生素E-C颗粒0.1ml.10g;天王补心丹高、中、低剂量组:皮下注射D-半乳糖0.1ml.10g,造模第11d起按不同浓度配比灌胃天王补心丹每天0.1ml.10g。实验周期:42d。
1.5 跳台实验[3] 将小鼠分别放入反射箱内,适应3min,然后通电,小鼠受到电击时,其正常反应是跳上跳台以躲避电击,绝大多数小鼠会再次跳下跳台,受到电击又跳回去,训练持续5min,隔24h进行测试。测试时将小鼠置于跳台上,小鼠每次从跳台上跳下或双足同时接触电铜栅为1次错误,记录它第1次错误的时间(潜伏期)和5min内的错误次数。
1.6 SOD和MDA 各组小鼠末次给药跳台测试后,将小鼠通过摘眼球取血的方法,取血清待测,随后颈椎脱臼处死小鼠,迅速取出肝脏,用冰冷的生理盐水漂洗,滤纸吸干,精称0.4g,加生理盐水3.6ml,匀浆管中制成10%肝匀浆,3000r.min离心10min,在-20℃冷冻待测。SOD采用黄嘌呤氧化酶法测定,MDA采用硫代巴比妥酸比色分析法测定。
1.7 统计方法 所有数据以均数±标准差(ˉx±s)表示,组间差异采用t检验。
2 结果
2.1 跳台实验结果 见表1。
表1 各组小鼠跳台实验结果比较(略)
注:与空白组比较#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001;与模型对照组比较*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001(下同)。
表1表明,天王补心丹高、中、低剂量组均具有一定的增强记忆力的作用。
2.2 对衰老模型小鼠自由基的影响 见表2。
表2表明:天王补心丹各给药组小鼠血清和肝组织中的SOD活性均有所提高,而MDA含量均降低,说明天王补心丹具有延缓衰老的作用。
表2 各组小鼠血清和肝组织中SOD、MDA测定结果(略)
3 结论
天王补心丹对小鼠记忆获得性障碍、巩固障碍、再现障碍均有明显改善作用,方中人参具有提高SOD活性,清除体内致衰老自由基的作用;丹参可明显降低急性心肌缺血大鼠血浆及心肌中MDA含量,提高SOD活性,减轻心肌损伤;其它各药也均有抗衰老的作用[5] 。本实验结果证明:天王补心丹可以改善衰老小鼠的记忆能力,提高血清和肝组织中的SOD活性和MDA含量,具有一定的延缓衰老的作用。
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[1]陈 勤.抗衰老研究实验方法[M].北京:医药科技出版社,1996.
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[5]聂金娜,蔡万德,王 迪.八珍汤及其所含方剂对血虚小鼠造血功能的影响[J].长春中医药大学学报,2007,23(2):17.