泽泻水提物、醇提物的制备及对小白鼠降脂作用的研究
作者：钱文彬 庞红 薛大权 席兰艳 张海燕
【摘要】 目的： 比较泽泻水提物、醇提物对高脂饮食小白鼠的降脂作用。方法： 利用正交试验选择泽泻水提、醇提的最佳方案，通过药理实验方法，以实验动物小白鼠的体重、肝重、血脂指标、Lee氏指数为测定指标，比较泽泻水提物、醇提物对高脂饮食小白鼠的降脂作用。结论： 泽泻水提物、醇提物对肥胖小白鼠均有一定降血脂作用，且两者的作用无显著性差异（P＞0.05）。
【关键词】 泽泻； 水提物； 醇提物； 肝重
泽泻是泽泻科植物泽泻的干燥块茎。性寒，味甘、淡，归肾、膀胱经，具有利水渗湿、泄热等功效，用于小便不利、水肿胀满、泄泻、尿少、痰饮、眩晕、热淋涩痛等症。临床应用表明［1］，泽泻具有明显的利尿作用，还具有降压、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗脂肪肝、降血糖等作用。近年来，对泽泻降血脂作用的活性成分和药理实验研究已较成熟［2，3］，临床上多用泽泻水煎剂或醇煎剂，本实验以泽泻的主要降脂作用成分23?乙酰泽泻醇B为考察指标，通过正交试验选择泽泻水提和醇提的最佳方案后，将泽泻水提物和醇提物分别灌胃小白鼠，旨在观察两者对高脂饮食小白鼠的降脂作用，为泽泻的临床应用提供依据。
1 实验材料
1.1 药材
泽泻饮片，购自武汉同济堂大药房，产自四川成都。
1.2 试剂与仪器
甘油三脂（TG）测定试剂盒（酶终点法）、总胆固醇（CHO）测定试剂盒（酶终点法）、高密度脂蛋白?胆固醇（HDL?C）测定试剂盒（磷钨酸?镁沉淀法）均购自中生北控生物科技股份有限公司，辛伐他汀胶囊由南通华山药业有限公司提供。
循环水式多用真空泵（巩义市英峪高科仪器厂，型号SHB）、紫外分光光度仪（日本岛津公司，型号UV?1700）、SANYO低温冰箱、低速离心机（北京医用离心机厂，型号HH?S）、分析天平、台式离心机（上海安亭仪器厂，型号TGL?16B）。
1.3 动物
雄性小白鼠50只,由武汉大学医学院动物房提供，随机分为5组,每组10只,各组间体重无明显差异。
1.4 高脂饲料
在基础饲料的基础上添加0.5%胆固醇、10%蛋黄粉、5%猪油［4］。
2 实验方法
2.1 泽泻水提物的制备
根据传统汤剂的制剂方法和预实验，对影响提取效率的加水量、提取时间、提取次数、粉碎度4个因素进行了考察，在平行操作条件下按L9（34）正交表安排了9次实验，以吸光度为定量指标，测得23?乙酰泽泻醇B在203.8nm波长处(UV)有最大吸收，故在此波长下测吸光度，正交试验所得结果经方差分析直观表明［5］，各因素影响程度无显著性差异，结果表明将泽泻饮片切成粗颗粒，以10倍量水提取3次，每次1h，所得水提液最优。
2.2 泽泻醇提物的制备
根据传统汤剂的制剂方法和预试实验，对影响提取效率的醇浓度、加醇量、提取时间、提取次数4个因素进行了考察，在平行实验操作条件下利用L9（34）正交表安排9次实验 ,以吸光度为定量指标，在203.8nm波长处(UV)测吸光度［6］，正交试验所得结果经方差分析直观表明各因素影响程度为有一定差异但并不显著，故将泽泻饮片以10倍量80%乙醇回流提取3次，每次2h，所得醇提液最优。
2.3 药理试验的比较研究
2.3.1 造模 将50只小白鼠随机分为5组，每组10只，各组间体重无显著性差异，编号为：1空白组，2肥胖组，3阳性对照组，4水提物组，5醇提物组。其中1组喂以普通饲料，2～5组喂以高脂饮食，连续饲养两周。
2.3.2 灌胃 分组喂养两周后，按0.2ml/10g小鼠/天的剂量，对阳性对照组灌胃辛伐他汀溶液（0.13mg/ml）；水提物组与醇提物组各以泽泻提取物灌胃（均为0.3g/ml生药液），连续灌胃两周并定期称5组小鼠的体重。
2.3.3 测定 各组小鼠禁食24h，末次给药5h后，断头取血。将血样3000 r/min离心20min后取血清，按照生化试剂盒的说明书操作，用UV?1700分别在505nm、500nm、500nm波长处测吸光度，按公式A样/A标·C标分别求出血样中TG、CHO、HDL?C的浓度。
量体长：将小鼠处死后，用直尺量取鼠头尖到肛门的长度，结合处死前称得的体重即可得其李氏指数值（Lee氏指数=体重1/3（g）*1000/体长（cm））
称肝重：将处死的小鼠解剖，取其新鲜肝脏置于分析天平称重。
2.4 统计学处理
实验结果的计量资料的均值及标准差均以±s表示，运用t检验法比较各组小白鼠体重、肝重、体重/肝重、Lee氏指数、血脂的差异性［3］。
3 结果
空白组小鼠喂养基础饲料，造模组小鼠喂养高脂饲料并定期称重。实验进行第4周后测小鼠血清中TG、CHO 、HDL?C浓度，比较肥胖组与空白组小鼠体重、肝重、体重/肝重及Lee氏指数,结果见表1、表2。
造模并连续给药2周后比较阳性组、水提物组、醇提物组与肥胖组各时期的体重增值情况，见表3。
实验进行4周后，测得各组小白鼠的血脂水平、体重和肝重、体重/肝重及Lee氏指数，比较阳性组、水提物组、醇提物组与肥胖组各指标,结果见表4、表5。
表1 肥胖组与空白组血脂水平的比较（略）
注：* P<0.05。
表2 肥胖组与空白组生理指标比较（略）
表3 各组小鼠体重增值比较（略）
注：* P<0.05。
表4 各组小鼠生理指标比较（略）
表5 对各组小白鼠血脂水平的影响（略）
注：* P<0.05。
4 讨论
本研究经实验研究，得到了较佳的泽泻水提与醇提制备工艺。造模期间，与基础饲料组相比，高脂饮食组小鼠毛皮红润、精力旺盛，给药期间，水提物组、醇提物组小白鼠的顺应性不及阳性组。经结果分析，造模组体重增加大于空白组，但经统计学t检验无显著性差异。产生这种结果的原因可能与所喂高脂饲料和造模时间有关；其次，小白鼠自身的生理因素（如体重变化不大等）、指标及其他实验条件都有影响造模成功的可能。
表1显示，肥胖组各指标均高于空白组，其中肥胖组TG 、CHO水平与空白组比较有显著性差异（P＜0.05），其它指标无显著性差异。
从表5可以看出，肥胖组各指标均高于空白组，其中肥胖组的TG 、CHO水平与空白组比较有显著性差异（P＜0.05）。阳性组、水提物组、醇提物组血清HDL?C浓度高于肥胖组，说明泽泻的水提物与醇提物有利于血脂的降低；而TG、CHO浓度反而高于肥胖组，TG指标甚至存在显著性差异（ P＜0.05），这是否由于实验期间肥胖组、阳性组与空白组、水提物组、醇提物组取血前禁食时间不平行、造模结果不明显等有关，有待进一步考证。
据表4分析，给药组与肥胖组相比，小鼠体重、肝重、体重/肝重、Lee氏指数均有所降低，这表明泽泻水提物、醇提物在一定程度上均有助于减缓肥胖小鼠体内的脂肪堆积，但经t检验（P<0.05）显示这些变化均无显著性差异，可能与药理实验设计、药液的制备及过程中操作不够规范有一定关系。
【参考】
1 徐晖.泽泻药理作用研究进展.湖南中医杂志,2004,20(3):77.
2 陈冠敏，姜瑞钗，王明,等.神藻减肥胶囊对肥胖大鼠减肥降脂效果的观察.海峡预防医学杂志,1998,4(1)：21～23.
3 朱晓敏,曹佩江,严政,等.含螺旋藻对肥胖大鼠体重及体脂的影响.与,2000,21(126)：30～31.
4 李清漪,毛一卿,张金树,等.泰安脂对高脂饮食家兔血脂影响.中药临床药与学,2006,11(9):991.
5 陆红,吕圭源.高脂血症中药治疗的实验进展.中药药理与临床,2003,19(3):45.
6 王永珍,王立新.中药泽泻的生药学研究.南京中医药大学,2001，5（6）：25.
