猫延髓内脏带的细胞构筑

来源:岁月联盟 作者: 时间:2010-07-12
            作者:葛煦 ,赵志敬,饶志仁 ,杨志军

【关键词】  延髓内脏带

  关键词: 延髓内脏带;细胞构筑;猫
    
  摘 要:目的  证明延髓内脏带(MVZ)在哺乳类存在的普遍性,为进一步的机能探讨提供形态学基础. 方法  冰冻切片、石蜡切片行Nissl染色,观察猫MVZ的细胞构筑. 结果  该带在猫存在于从锥体交叉至闩以上2.9mm,吻尾长约7.0mm,脑干横切面上宽0.4~2.5mm的弧形带状区,由背内侧的迷走孤束复合体和最后区、腹外侧的疑核和延髓腹外侧区,以及位于二者之间的中间网状结构所构成. 结论  猫也有类似大鼠的延髓内脏带结构,在形态学上表现为一独立结构,参与内脏活动的调节.
    
  Cytoarchitecture of the medullary visceral zone of the cat
         
  Abstract:AIM To prove the universality of existence of the medullary visceral zone(MVZ)in mammals and provide the morphological evidence for further physiological studies.METHODS Cytoarchitecture of the MVZ of the cat was ex-amined by using Nissl staining method on the frozen sections and paraffin sections.RESULTS The MVZ was an arc band with width of0.4~2.5mm on cross section of medulla ob-longata and the rostro-caudal length was about7.0mm from the level of pyramid decussation to the level of2.9mm
   rostral to the obex,which consisted of dorsomedial vagal-solitary complex and area postrema,ventrolateral medulla and nucleus ambiguous,intermediate reticular formation.CONCLUSION MVZ,as a morphologically independent structure,exists in the cat as well as in the rat,and might be involved in the modulation of the visceral activities.
    
  0 引言
    
  在大鼠延髓中尾段(闩尾侧0.8mm锥体交叉平面至闩吻侧1.8mm)的横切面上,存在一条从背内侧至腹外侧的弧形带状区,宽0.6~1.3mm,孤束核(NTS)、迷走神经背运动核(dmnX)、疑核(Am)、腹外侧网状核(VLRt)等位于此区内[1] .免疫组织化学实验[2] 证明,许多神经递质或神经调质,如乙酰胆碱(Ach)、单胺类(儿茶酚胺类、吲哚胺类)神经肽[P物质(SP)、脑啡肽(ENK)、神经肽Y(NPY)、血管活性肠多肽(VIP)、垂体腺苷酸激活肽(PCAP)],在大鼠该区中均有密集分布,且与周围结构区别明显.其他学者在猫[3] 、猴[4] 、人胎儿[4] 的延髓中也有类似发现.此外,多种机能实验,如高血压、低血压、失重、心肌缺血、口唇脚掌疼痛刺激、LPS ip等,也在此带状区中观察到密集的Fos表达.内脏、躯体感觉和免疫刺激在该区的会聚,以及神经递质的选择性分布说明此带状区与内脏感觉的传递和内脏活动的调节关系密切,为一相对独立的机能结构区.饶志仁等[5] 首先发现并将该区命名为延髓内脏带(MVZ).为验证MVZ存在的普遍性,我们从形态学的角度对猫MVZ的核团分布和细胞构筑进行了探讨,为MVZ内神经元功能和相互联系提供形态学基础.
    
  1 材料和方法
    
  猫5只(本校实验动物中心提供),体质量1.1~3.6kg,雌雄不拘,随机分为两组,A组冰冻切片(n=3),B组石蜡包埋后切片(n=2),随后行常规Nissl染色.全部动物在10g L-1 戊巴比妥钠麻醉下(40mg kg-1 )开胸,经左心室至主动脉插管,先用500mL生理盐水快速冲洗血液,继之用含40g L
-1 多聚甲醛的0.1mol L-1 磷酸盐缓冲液(PB,pH7.4)1000mL先快后慢灌流固定.A组延髓取出后置于300g L-1 蔗糖中4℃至沉底,然后于恒冷箱切片机内切制连续冠状切片(片厚30μm),间隔4张切片贴片1张.B组延髓后固定过夜,上行梯度乙醇脱水后,于二甲苯中至组织透明,浸蜡包埋,石蜡切片机切片(片厚6μm),切片方向与A组相同,展片台贴片,间隔10张切片贴片1张.干燥后入二甲苯脱蜡.两组切片均浸入10g L-1 克紫溶液中行Nissl染色10~20min,700mL L-1 乙醇分色.常规脱水透明,DPX封片,光镜观察.
    
  2 结果
    
  在猫延髓中尾段的冠状切面上,MVZ呈现为一从背内侧至腹外侧延伸的弧形带状区,带凹向内侧,宽0.4~2.5mm,可分为背内侧区、中间带和腹外侧区三部分.吻尾方向上,MVZ见于锥体交叉至闩以上2.9mm的范围内,全长约7.0mm.根据其结构特点的相似性,我们又将MVZ分为锥体交叉(Fig1A)、最后区(Fig1B)、闩(Fig1C)以及闩以上2.9mm(Fig1D)4个平面加以叙述.
    
  2.1 MVZ的背内侧区(DM) 

  此部分包括NTS,dmnX,AP.腹侧为舌下神经核,胞体巨大,胞内可见粗大的Nissl颗粒;背侧为薄束核及薄束、楔束核及楔束、前庭核蔟及第四脑室等结构.沿吻尾方向DM中所含核团的形态大小、神经元的数量各不相同.在锥体交叉平面,迷走孤束复合体范围较小.左右两侧的NTS借助联合亚核(cNTS)相互连接,细胞较分散,Nissl颗粒细小.最后区平面最典型的特征为富含血管的AP的出现,尾侧AP为一个整体,位于中央管背侧,接近闩平面时分为左右两部分,彼此分离,分别位于第四脑室的左、右外侧壁上,细胞体积小.迷走孤束复合体范围增大,NTS可划分为内侧亚核(mNTS)、胶状质亚核(gNTS)、背侧亚核(dNTS)、腹侧亚核(vNTS)、外侧亚核(lNTS)、束内亚核(iNTS)等.闩平面,迷走孤束复合体向背外侧移动,cNTS消失.闩以上平面,迷走孤束复合体变小,NTS亚核分区不明显.核团方向由锥体交叉处的水平延伸逐渐过渡为背内-腹外伸展. 图1 MVZ在四个不同平面的位置和范围(虚线示MVZ的范围)

  2.2 MVZ的中间带(IRt) 

  IRt的内侧尾、吻段分别与延髓腹侧网状核(Vr)和延髓巨细胞网状核(Gi)相接;其外侧分别与延髓背侧网状核(Dr)和延髓小细胞网状核(PCRt)相临.背内侧部与DM相接,过渡平缓,无明显界限.与之相对应,和舌下神经核、楔束核等的界限却十分鲜明.腹外侧部与Am,VLRt相续.IRt在MVZ中表现为一个弯向内侧的弧形带,细胞大小介于内外侧网状结构之间,染色较浅,胞体多为梭形或卵圆形,吻尾侧无明显区别.中间带神经元形态有一显著特点,即胞体和突起的长轴多为背内-腹外方向排列(Fig2).而位于其内外两侧的网状结构中,细胞多为无极性排列,二者差别较明显.
    
  2.3 MVZ的腹外侧区(VLM) 

  内侧与网状结构及下橄榄核相临,外侧为三叉神经脊束核腹侧部,可分为AM,VLRt,外侧网状核(LRt)三部分.核团大小、形状和细胞数量在吻尾方向上亦呈移形性变化.锥体交叉平面,疑核较小,细胞散在,Nissl颗粒粗大;LRt范围较小,可分为内侧的巨细胞部和外侧的小细胞部两部分,染色较深;VLRt位于二者之间,胞体较小,染色浅.最后区至闩平面,Am渐增大,细胞数量增加;LRt出现三叉神经脊束下核,位于小细胞部和三叉脊束核之间,主要由小细胞构成,VLRt渐增大.闩吻侧2.9mm平面,疑核变小,LRt渐消失,仅余VLRt.VLM中神经元形态多样,相互间通过突起密切联系.


    
  3 讨论
    
  延髓一直被人们视为“基本生命中枢”.心血管活动、呼吸、胃肠蠕动、排尿生殖、内分泌调节以及应激反应均与之密切相关.Carlton等[6] 报道PMNT免疫阳性胞体在猴延髓主要分布于NTS,dmnX,背内侧网状结构和延髓腹外侧区,而Legradi[7] 则发现PCAP在大鼠延髓中尾段呈背内腹外方向弧形带状分布.这些结果都与MVZ的范围相一致,说明MVZ是一个完整的机能结构区.
   
  与大鼠相似,猫延髓中尾段也存在MVZ结构,并有其细胞构筑特点.主要表现为一条吻尾长7.0mm,宽0.4~2.5mm的弧形带状区,与内脏感觉传导及内脏调控有关的NTS,dmnX,Am,VLRt等核团均位于其中.且DM,IRt,VLM三部分间过渡平滑,无明显界限.IRt中的梭形细胞沿背内-腹外方向伸展,将三部分连为一个整体.此外,杨志军等[4] 在研究猴及人胎儿延髓的化学神经解剖学时,也证实了MVZ在猴及人脑中的存在.这些都表明MVZ的存在具有普遍性.它的提出,一改将延髓各个核团独立看待的传统观念,而从整体上把握其变化,有益于在更深层次理解认识延髓的生命中枢作用.近年来,MVZ的概念已得到国际学术界的认可[8,9] .   

  电生实验[10] 发现,呼吸及血压相关神经元分别定位于MVZ的背内侧部及腹外侧部,且它们的突起在MVZ中有广泛的投射.垂体后叶素引起的急性心肌缺血导致MVZ内Fos高表达[11] ,而脑出血[12] 、模拟失重状态下血压降低13] 、γ-刀照射 [14] 、免 疫刺激[15] 等亦可诱导MVZ中Fos数量的大大增加.这些证据表明,MVZ不仅参与了复杂的内脏感觉传导和内脏活动调节,还与内脏躯体感觉的会聚密切相关.此外尽管MVZ是作为一个整体出现的,但不同内脏刺激引起的延髓反应的部位仍有差别,如免疫刺激引起的Fos表达多集中在MVZ的内侧[15] ,而躯体伤害性刺激引起的Fos表达则多集中于MVZ的外侧[9] ,这也正验证了机体机能结构有序性的一面.当然,这种有序性还需进一步的深入研究.
  
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    [2]Chen LW,Rao ZR,Yang ZJ.Chemical neuroanatomy of the medullary visceral zone in rat [J].Jiepou Xuebao(Acta Anatomica Sinica),1996;27(4):386-390.

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    [6] Carlton SM,Honda CN,Denoroy L.Distribution of phenylethanolamine N-methyl transferase cell bodies,axons and terminals in monkey brain stem:A immunohistochemical map-ping study [J].J Comp Neurol,1989;287(3):273-285.

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