恶性肿瘤淋巴管生成与转移的研究进展

【关键词】  肿瘤；淋巴管；淋巴转移

　　【摘要】 淋巴道转移是肿瘤转移的重要途径，也是判断预后的重要依据. 随着淋巴管生成因子及许多淋巴管特异性标记物的发现，肿瘤新生淋巴管调控与淋巴道转移机制研究得以深入开展. 大量的研究发现，恶性肿瘤和瘤周组织内存在新生的淋巴管，新生的淋巴管密度和淋巴管标记物的表达强度均与淋巴结转移密切相关. 这为揭示恶性肿瘤淋巴道转移机制和开发淋巴管靶向提供了重要的研究途径. 现就近年来肿瘤淋巴管生成与转移的研究进展作一综述.

　　【关键词】 肿瘤；淋巴管；淋巴转移

　　0引言

　　恶性肿瘤的快速生长有赖于充足的血液供应，而其远处转移是通过血液和淋巴液. 因此，对肿瘤微脉管系统的生成及其与肿瘤的生物学行为的研究一直倍受关注，其中对肿瘤血管生成的研究起步较早，并取得了很多成果，但对肿瘤淋巴管生成的研究进展相对缓慢，缺乏可靠的淋巴管内皮标记物是其中重要原因. 近年来，随着组织胚胎的深入研究，一些淋巴管特异性标记物陆续被发现，才使这一领域得以开展.

　　1淋巴管内皮标记物

　　1.1血管内皮生长因子受体3（VEGFR3)VEGFR3是第一个被验证的淋巴管标记物. 它是一种酪氨酸激酶受体. 由人类白血病细胞系和人胎盘克隆而来，其配体血管内皮生长因子C（VEGFC）和血管内皮生长因子D（VEGFD）是淋巴管内皮生长的重要调节因子. 在胚胎早期，VEGFR3存在于部分血管内皮细胞，VEGFR3缺失的小鼠因原始血管丛发育异常及大血管缺陷在妊娠中死亡. 到发育晚期，VEGFR3富集并仅存在淋巴管. 研究发现VEGFR3主要表达于正常成人组织和胚胎的淋巴管内皮细胞，但在肿瘤血管、视网膜上皮细胞、肌上皮细胞中也有表达，因而其特异性不明显［1］. 在某些病理状态下，VEGFR3能被重新激活而发挥促血管生成活性. VEGFC，VEGFD的过度表达或VEGFC的特异性突变能诱导转基因鼠淋巴管网的增生. 经VEGFC转染的人类雌激素依赖的乳腺癌细胞株MCF7VEGFC种植于裸鼠，用抗VEGFR3的mAb对肿瘤淋巴管进行免疫组化标记，发现VEGFC的过度表达刺激肿瘤淋巴管生成并诱导瘤细胞向局部淋巴结转移［2］. 研究发现，VEGFC和VEGFD均可与其受体VEGFR3结合，特异性地促进新生淋巴管形成［3］. 除VEGFC和VEGFD外，其他生长因子在淋巴管生成中亦起着一定的作用. 胰岛素样生长因子（IGF）也可直接诱导淋巴内皮细胞增殖、迁移，此过程不依赖于VEGFR3通路，而由IGF 特异性受体介导［4］. 值得一提的是肿瘤相关的炎症细胞如巨噬细胞，也能表达VEGFC和VEGFD，可能在肿瘤淋巴管生成中具有重要作用［5］.

　　1.2Podoplanin为一种Mr 43 000的膜蛋白，因最初发现表达在肾小球足突细胞而得名. 起控制足细胞形成的作用. 先前认为它只表达于小淋巴管内皮，目前研究显示皮肤某些血管内皮细胞也可表达Podoplanin，但其他器官和组织的血管内皮未发现其表达. 因此，认为该蛋白是目前较理想的淋巴管标记物［6］.

　　1.3淋巴管内皮细胞透明质酸受体1（LYVE1)LYVE1是位于淋巴管内皮细胞上的含有322个氨基酸残基的膜蛋白. 与CD44糖蛋白同源，均匀分布于淋巴管内外腔面，可与细胞外基质的葡萄糖胺聚糖透明质酸结合，具有从组织摄取透明质酸盐并转运至淋巴液的作用. 多数研究显示LYVE1仅特异性地表达于肿瘤相关淋巴管内皮和肝血窦内皮细胞. 曾一度认为其是淋巴管特异性的标记物，但近期发现，肿瘤内约有10%的LYVE1阳性脉管是血管［7］.

　　2淋巴管生成的分子调节

　　研究表明，VEGFC和VEGFD是目前公认的主要淋巴管生成因子. 在转基因鼠和其他体外模型已证实其主要通过VEGFR3信号途径诱导淋巴管生成. 最近Karkkainen等［8］发现,完全缺乏VEGFC的鼠在出生前即死亡，而VEGFC呈不同形式缺陷的鼠出生后常产生腹腔乳糜液聚集，提示VEGFC的单一功能不全即可影响淋巴管的发育. VEGFC和VEGFD最初为一种前脯氨酸多肽产物，经过蛋白水解处理可提高其与VEGFR3的亲和力，主要呈现诱导淋巴管生成作用. Papoutsi等［9］对C6胶质瘤及10AS胰腺癌细胞的研究表明，后者表达较高的VEGFC并能诱导淋巴管向肿瘤内部呈现放射状生长，提示充足数量和质量的淋巴管生成因子对肿瘤淋巴管的生长是非常重要的. 以上研究表明，VEGFC既可产生于癌细胞，又可产生于基质细胞，并通过自分泌或旁分泌模式发挥作用，当其产生的量达一定程度时，即可诱导淋巴管生成，并介导癌细胞的淋巴道转移.

　　3肿瘤淋巴管生成与淋巴结转移

　　研究均证实，癌细胞局部淋巴结播散为诸多实体肿瘤进展的一种早期事件，而淋巴管又是癌播散的主要途径. 大量研究表明，肿瘤的新生淋巴管主要表现为瘤周和瘤内两部分. Skobe等［10］应用基因转染方法，使乳腺癌细胞表达VEGFC，然后将其接种于裸鼠，结果证实，在转VEGFC基因鼠肿瘤中，可见许多小淋巴管分布于肿瘤组织中，而对照鼠肿瘤中则只见淋巴管仅深入肿瘤约2 mm，前者淋巴管密度大约是后者的4.6倍，VEGFR3的表达也相应增多，并且这种增生的淋巴管中常包含肿瘤细胞. 应用免疫荧光染色方法也证实，表达VEGFC的肿瘤发生淋巴结转移的机会较对照组增加了60%以上，说明VEGFC可促进肿瘤的局部淋巴结转移. Shields等［11］对原发性头颈部鳞癌和黑色素瘤研究发现这些肿瘤内的确存在淋巴管. 采用淋巴管特异标记物LYVE1对口腔癌染色显示，肿瘤组织中含有高密度LYVE1阳性淋巴管，并与局部淋巴结转移相关. 采用Podoplanin作为淋巴管标记物对人体乳腺癌染色也显示淋巴管生成与淋巴结转移显著相关, 提示瘤组织内及瘤周可能具有新生淋巴管，并与淋巴结转移相关. Kitadai等［12］用实时定量PCR(realtime quantitative PCR)方法检测了39例胃癌活检组织中VEGFC，VEGFD，VEGFR3，Podoplanin的mRNA表达水平，并Podoplanin免疫组化标记LVD (lymphatic vessel density)，结果显示，VEGFC, VEGFR3和Podoplanin mRNA在淋巴结转移阳性组高表达，均与胃癌淋巴结转移密切相关，LVD ( CD34-/Podoplanin+)也与淋巴结转移密切相关，因此，在胃癌活检组织中定量检测VEGFC, VEGFR3, Podoplanin的mRNA水平对预测胃癌淋巴结转移具有重要的临床价值. Shida等［13］最近利用RTPCR方法对临床胃癌组织研究分析，发现VEGFC mRNA的高表达与淋巴结转移呈正相关，并认为VEGFC表达是临床评价胃癌淋巴侵袭、扩散指标之一，提示不良预后.

 
　　临床上常见到不同类型的肿瘤呈现不同的远处器官播散形式，提示不同肿瘤的转移灶形成也许存在一种导向过程. 一些研究显示淋巴管内皮细胞可通过分泌趋化因子吸引肿瘤细胞，从而主动促进肿瘤淋巴管转移. 目前发现次级淋巴样趋化因子（SLC/CCL21）高表达于淋巴结、微静脉特定的内皮细胞和T细胞丰富区，也表达于多种器官的淋巴管内皮.
　
　　总之,人体某些肿瘤可形成新生淋巴管，而肿瘤相关淋巴管对淋巴结转移是必须的. 采用动物模型，通过阻断VEGFR3信号可抑制淋巴管生成，或通过中和趋化因子（如SLC/CCL21）可抑制癌细胞的淋巴结转移. 目前肿瘤的淋巴结转移机制尚不十分清楚，也不可能只通过VEGFR3信号系统这单一途径，还可能与肿瘤血管生成一样涉及多种调节机制. 抗肿瘤血管生成被认为是当前最具有前途的肿瘤方法之一，且已进入临床试用阶段，而淋巴管作为肿瘤常见的早期转移途径之一，随着对肿瘤淋巴管生成及转移的深入研究及其机制的逐渐明了，期待抗淋巴管生成能为肿瘤的治疗带来新的希望.

　　【】

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