消淤降脂胶囊中丹参素钠溶出度测定研究

                      作者：罗忠圣，蔡文，杨青松，吴永红，覃容贵

【摘要】  　　目的对消淤降脂胶囊中丹参素钠的溶出度进行测定，以控制其内在质量。方法应用转篮法，以高效液相色谱法（HPLC）测定丹参素钠的含量为指标，对消淤降脂胶囊中丹参素钠溶出度进行测定。结果以0.5%聚山梨脂80磷酸盐缓冲溶液为溶出介质，转速150 r/min，采用Elite Hypersil C18柱（5μm，25cm×4.6mm），乙腈-1%磷酸二氢钾-10%四丁基氢氧化铵（10∶87∶2.5）为流动相，流速：1.0 ml·min-1，检测波长281 nm，柱温40℃，进样量为10 μl。平均回收率100.6％(RSD 0.44％)，溶出度为标示量的70.0%以上。结论HPLC法测定消淤降脂胶囊中丹参素钠的含量是控制该制剂内在质量的一种简便、快速、可行的方法。

【关键词】  消淤降脂胶囊； 丹参素钠； 溶出度； 高效液相色谱

　　Abstract：ObjectiveTo determine the dissolutions of sodium-tanshinol in Xiaoyujiangzhi Capsules in order to analyze its inner quality.MethodsWith rolling basket method, the content of sodium-tanshinol determined by HPLC was used to assess the dissolution of sodium-tanshinol in Xiaoyujiangzhi capsules.Results0.5％ Polysorbate 80 PBS was used as solvent. Rolling basket method was used with rotation rate of 150r/min for 120min; Elite Hypersil C18 Column（5 μm，25 cm×4.6 mm） was used with AN-1%KDP-10%quadr-Bu-ammonium hydroxide as mobile phase, the flow rate was 1.0 ml·min-1，detection wavelength was 281nm，column temperature was 40℃，and the sample size was 10 μl. Result Average recovery was 100.6％(RSD 0.44％)，and dissolution was more than 70.0% labelled amount.ConclusionHPLC is a convenient, quick and feasible method for controlling the inner quality of Xiaoyujiangzhi Capsules.

　　Key words：Xiaoyujiangzhi Capsules;  Sodium-tanshinol;  Dissolutions;  HPLC

    消淤降脂胶囊由中药丹参Salvia mitiorrhiza Bge.和山楂Crataegus pinnatifida Bge.的有效部位丹参水溶性总酚酸和山楂总三萜酸组成，具有活血化淤、祛痰泄浊、消积降脂的功效。用于高脂血症（血淤痰阻证），症见胸胁闷痛、头晕、肢麻、头痛、耳鸣、纳呆，舌质暗红或有淤点或淤斑，苔腻，脉沉涩或弦滑。为了更好确保药品质量，本实验采用HPLC对该药丹参素钠的溶出度进行了含量测定，以期为评价和控制该药的质量提供依据。

　　1  仪器与材料

　　1.1 仪器

　　RC-6D型溶出度测试仪（天津市光学仪器厂）；Agilent 1100型高效液相色谱仪， VWD检测器，Agilent化学工作站（安捷伦科技有限公司）；超声波清洗器CX-250型（频率29-34KHz，功率≥250W，北京医疗设备二厂）；天平（十万分之一）AE240型（Mettler公司）。

　　1.2 试剂及药品

　　消淤降脂胶囊，贵阳新天药业股份有限公司生产；丹参素钠对照品，由复旦大学药学院天然药物教研室研制；甲醇、乙腈为色谱纯；盐酸、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、胃蛋白酶、氢氧化钠、无水乙醇、冰醋酸、香草醛、高氯酸、四丁基氢氧化铵、磷酸均为分析纯；水为重蒸馏水。

　　2 方法与结果

　　2.1  色谱条件

　　用十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈-1%磷酸二氢钾-10%四丁基氢氧化铵（10∶87∶2.5，用磷酸调pH值至4.0）为流动相，检测波长为281 nm，柱温40℃。理论塔板数按丹参素钠应不低于5 000。

　　2.2  对照品溶液的制备

　　精密称取丹参素钠对照品适量，加水制成每毫升含1.9 mg的溶液，作为对照品溶液1；精密称取丹参素钠对照品适量，加水制成每毫升含0.139 mg的溶液，作为对照品溶液2。

　　2.3  标准曲线的制备

　　将丹参素钠对照品溶液（0.44 mg/ml）按2，4，8，16倍稀释后，分别精密吸取丹参素钠对照品溶液10μl注入液相色谱仪,测定。结果见表1。表1  标准曲线对照品峰面积值测定结果（略）

    以进样量为横坐标，以峰面积值为纵坐标分别作图，得近似通过原点的直线。回归方程为Y=1.856×105X + 5 031.510，r=0.999 9。结果表明，丹参素钠进样量在0.275～4.400 μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系。其线性关系符合含量测定项下丹参素钠的线性范围。

　　2.4 供试品溶液的制备取消淤降脂胶囊样品（批号20040901）1粒，照溶出度测定法［1］，以0.5%聚山梨脂80磷酸盐缓冲溶液（pH 7.8～8.0）250 ml为溶剂，转速为150 r/min，依法操作，经120 min时，取溶出液适量，用0.45 mm微孔滤膜滤过，备测。

　　　2.5  干扰实验

　　取消淤降脂胶囊安慰剂（内容物为该药的辅料）1粒，照供试品溶液制备方法，制得干扰实验供试品溶液。结果见图1～2。结果表明，囊壳与辅料对丹参素的检测无干扰。

　　2.6  样品稳定性实验

　　取样品120 min溶出液于不同时间连续测定,观察峰面积稳定性。分别取放置0,1,2,4,8 h的供试品溶液,测定丹参素钠的含量,以考察其稳定性。见表2。所测丹参素钠积分面积RSD值为0.99%，小于2%，表明供试品溶液至少在8 h内稳定。表2  样品稳定性实验结果（略）

　　2.7  均一性实验

　　取消淤降脂胶囊（批号20040901）6粒，分别照供试品溶液处理方法进行处理，得6份供试品溶液，测定丹参素钠的含量,以考察其均一性。见表3。所测丹参素钠RSD为0.70%，小于2%，表明该法溶出率均一性良好。

　　2.8  重复性实验

　　取消淤降脂胶囊（批号20040901）6粒，分别照供试品溶液处理方法进行处理，重复做3次，得18份供试品溶液。见表4。所测丹参素钠RSD为0.78%，小于2%，表明该法溶出率重复性良好。表3  样品均一性实验结果（略）表4  样品重复性实验结果（略）

　　2.9 回收率实验

　　采用加样回收，于6个溶出杯中放入已知溶出量的消淤降脂胶囊（批号20040901，含丹参素钠5.2 mg/粒）各1粒，分别加入0.5%聚山梨脂80磷酸盐缓冲液（pH 7.8～8.0）250   ml，再精密加入丹参素钠对照品液（1.9 mg/ml）10 ml，照供试品溶液制备方法，制得6份供试品溶液测定，平均加样回收率。见表5。实验结果表明，本次实验方法的回收率为100.6%，回收率良好。表5  样品回收率实验结果（略）

　　2.10  溶出度样品测定

　　取消淤降脂胶囊（批号20050201，20050202，20050203），按供试品溶液的制备方法分别制得3批供试品溶液，精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，分别注入色谱仪，记录色谱图，按峰面积计算每粒丹参素钠的溶出量。结果见表6。表6  样品溶出度测定结果（略）

    根据以上测定结果，暂定本品中丹参素的溶出限度，按标示量计应不低于70.0%。

　　3  讨论

　　3.1 溶出介质选择 

　　进行了人工胃液、人工肠液、0.1mol/L的盐酸溶液、0.5%聚山梨酯80磷酸盐缓冲溶液（pH 7.8～8.0）、1%聚山梨酯80磷酸盐缓冲溶液（pH 7.8～8.0）、1%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液（pH7.8～8.0）比较，最终选择了0.5%磷酸盐缓冲溶液（pH 7.8～8.0）样品溶出率最高。

　　3.2  浆法与转篮法选择 

　　进行了浆法与转篮法选择比较，转篮法样品溶出率较高，最终选择了转篮法。

　　3.3  溶出时间选择 

　　进行了45，90，120，150 min选择比较，120 min溶出率最高，选择了120 min作为溶出时间。

　　3.4  转速选择 

　　进行了50，100，150，200 r/min选择比较，150 r/min溶出率最高，选择了150 r/min作为溶出转速。

【】
  　　［1］国家药典委员会.药典，Ⅰ部［S］.北京:化学出版社，2005：附录73.