紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量
作者：郑湘娟 余淑娴 徐晓芳 万南红 李玉琳 张小强
【摘要】 目的建立虎杖提取物中白藜芦醇含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法，测定波长为305 nm。结果检测浓度在3～16 μg/ml范围内与吸光度线性关系良好(r=0.999 0) 。结论该方法简便、快速、准确，可作为提取过程中的实时监测。
【关键词】 虎杖 白藜芦醇 紫外分光光度法
Abstract:ObjectiveTo establish the determination method for resveratrol in extract of Polygonum cuspidatum . MethodsUV spectrophotometry was adopted with a detection wavelength of 305 nm. ResultsThere was good linear relation ship with in the range of 3～16 μg (r=0.999 0). ConclusionThe method is simple，rapid，accurate.
Key words:Polygonum cuspidatum； Resveratrol； UV spectrophotometry
虎杖Polygonum cuspidatum Sied.et Zucc，又名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲［1］，其根茎具有活血定痛、清热利湿、止咳化痰作用。主要用于关节麻痹、湿热黄疸、经闭、咳嗽痰多、水火烫伤、跌打损伤等症的［2］。药理研究表明其主要有效活性成分白藜芦醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝聚、抗菌、调节脂类代谢等多种功能。目前定量检测白藜芦醇的方法主要有高效液相色谱法（HPLC）［3］、气相色谱/质谱法(GC/MS)［4］以及气相色谱法(GC)［5］等。国内还未见有关用紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇含量的报道。本实验应用紫外分光光度法测定了虎杖提取液中白藜芦醇含量。现报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Gold S54 紫外可见分光光度计（上海棱光技术有限公司）；AB204-N天平(Mettler-Toledo设备有限公司)；FC-160型锤式粉碎机（上海中药机械厂制造）。
1.2 试剂
虎杖药材购自江西省药材公司（产地江西樟树），经江西医学院冯江教授鉴定为正品虎杖，白藜芦醇对照品由药品生物制品检验所提供，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备精密称取干燥恒重的白藜芦醇对照品5.4 mg，于50 ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀，即得到0.108 mg·ml-1的对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备准确称量细块状虎杖10.0 g，加10倍量的水，在沸腾状态下提取180 min，提取1次，冷却后将提取液过滤，滤液定容至一定体积，即为供试样品液。精密称取一定量试液于50 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.3 测定波长的选择将白藜芦醇对照品和供试品溶液按实验方法操作，在 200～ 500 nm 进行波长扫描。结果表明，对照品和供试品溶液均在 305 nm 处有最大吸收，且两者光谱形状极为相似，满足分光光度法测定的基本要求。因此，选定305 nm 作为测定波长。
2.4 标准曲线的绘制分别精密吸取“2.1”项下对照品溶液0，0.3，0.6，0.9，1.2，1.5 ml各置于10 ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，即得浓度分别为0，3.24，6.48，9.72，12.96，16.20 μg/ml的对照品溶液。以甲醇做参比，分别测定305 nm 吸光度，以吸光度(A) 对浓度(C) 进行线性回归，得回归方程A=0.134 27C + 0.048 59 (r=0.999 0)。结果表明，白藜芦醇检测浓度在3～16μg/ml 范围内与吸光度线性关系良好。见表1及图1。表1 白藜芦醇标准溶液的浓度与吸光度（略）
2.5 重复性实验 取同一批虎杖样品，精密称取4份，按“2.2”项下方法分别制备成4份供试品溶液。在305 nm下分别测定其吸光度并白藜芦醇的含量。结果(见表2)表明，4份提取液中白藜芦醇的平均含量为1.46％，RSD=2.41％（n=4）。表2 白藜芦醇含量测定结果（略）
2.6 回收率实验采用加样回收法，精密吸取已知含量为3.32 μg/ml虎杖提取液2 ml于25 ml容量瓶中，加入3.24 μg/ml对照品溶液2 ml，各4份，用甲醇稀释至刻度，摇匀，测定吸光度，计算回收率。结果得到平均回收率为98.8％，RSD为1.35％。
3 小结
本实验建立了紫外分光光度法测定虎杖提取物中白藜芦醇的方法。实验表明,本法具有操作简单、速度快、准确度高的优点。其加样回收率和重复性均较好，可作为一种虎杖提取液中白藜芦醇含量测定的方法。
【】
［1］苏文强,杨 磊,朱明华,等.中压柱层析法分离白藜芦醇的研究［J］.林产化学与,2004,24(1):40.
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