地蜂子醇提取物对小鼠肠系膜微循环的影响
【摘要】 目的观察地蜂子醇提取物对微循环的影响。方法采用活体肠系膜微循环观察法,观察地蜂子提取物对正常小鼠肠系膜微循环细动、静脉口径及毛细血管开放量的影响。结果地蜂子醇提物能明显增加正常小鼠肠系膜微 循环血流速度,增大细动脉和静脉口径,增加毛细血管开放数量,10 min开始有效,30 min作用最强,60 min仍然有较好的作用。结论地蜂子具有改善小鼠肠系膜微循环作用,是其具有良好活血、镇痛功效的作用机制之一。
【关键词】 地蜂子; 肠系膜; 微循环; 毛细血管
Abstract:ObjectiveObserve the effects of Ethanol Extract of Difengzi on Microcirculation of Mesentery in Mice.MethodsObserving the effects of Difengzi to the normal mice's mesentery microcirculation,measure the caliber of the vein and observe the opening amount of microvessle.Microcirculation observation in vivo.ResultsEthanol Extract of Difengzi can improve the speed of blood flow of Microcirculation in 30 min,and it still has good effect in 60mins.ConclusionDifengzi has the effect of improving the microcirculation of mesentery in mice.It is the one of mechanisms that it have activating-blood and pain-killing effect.
Key words:Difengzi; Mesentery; Microcircle; Microvessle
地蜂子为蔷薇科植物三叶委陵菜Potentilla freyniana Bornm的根,在土家族、苗族医药中具有比较广泛的影响,属常用民间草药。别名:狼牙委陵菜、铁秤陀(四川、重庆)、铁钮子、山蜂子、三爪金、播丝草、地蜘蛛、铁枕头(贵州)。性味苦、涩、凉,入心、肝经,功能活血散淤、消肿止痛、清热解毒。在土家族、苗族医药中主要以小单方使用,红肿热痛、疮痈湿疹、水火烫伤以及胃病等,有独特的疗效。研究表明地蜂子具有明显的镇痛[1]、抗炎作用[2],而关于地蜂子对肠系膜微循环的作用未见相关报道,本实验观察了地蜂子醇提物对正常小鼠肠系膜循环细动、静脉血管口径以及毛细血管开放量的影响,探讨其镇痛和活血作用机制,为开发利用地蜂子提供理论依据。
1 材料与仪器
1.1 药材地蜂子由湖北民族学院附属药剂科提供。
1.2 试剂乌拉坦溶液湖北民族学院医学实验中心提供,乙醇为分析纯。
1.3 仪器CQ-250超声波清洗器(上海弘兴超声仪器有限公司),X52-H光学显微镜(成都泰盟科技有限公司提供),TK-C721EC彩色摄象机(北京杰伟世音频设备有限公司装),HW-2000微循环数字恒温仪(成都泰盟科技有限公司生产),BI2000图象分析系统(成都泰盟科技有限公司生产),手术剪刀。
1.4 动物ICR昆明小鼠,体重18~22 g,雌雄兼用,由湖北省实验动物研究中心提供。合格证号:SCKK2003-0005。
2 方法
2.1 供试药液的制备取供试药材适量,用50%乙醇超声提取两次,45 min/次,合并,回收乙醇,滤过,将滤液浓缩配制成1 g/ml(按生药材)的水溶液。备用。
2.2 正常小鼠肠系膜微循环测定选取健康小鼠10只,按照每只0.5 ml竹节人参醇提物水溶液的标准灌胃后,按0.7 ml/100 g标准肌注乌拉坦溶液麻醉,沿小鼠腹部中线用手术剪刀切开,置显微镜载物台上并固定,调节显微镜高度,在回盲部分别选取10~20 μm之间的细动脉和20~30 μm之间的细静脉各1支,用100倍镜进行观察,用显微测微尺分别测定给药后10,20,30,60 min小鼠肠系膜微循环细动脉(A)及细静脉(V)的口径。同时记录给药后10,20,30,60 min毛细管开放数量(毛细血管网交点记数法),以判断微循环改善情况。在观察期内,不断向标本上均衡滴注37℃恒温平衡克氏液[每分钟保持(50±5)滴],以保持活体标本肠系膜恒温、恒湿、恒pH和一定的离子浓度。
2.3 统计分析采用spss11.5软件系统进行分析,实验数据以±s表示,配对t检验。
3 结果
3.1 地蜂子醇提物对小鼠肠系膜微血管口径的影响结果见表1~2。给药后小鼠肠系膜微循环细动脉和细静脉口径在60 min内呈增大状态,30 min时为作用高峰,60 min仍然有扩张细动脉和细静脉的作用,与给药前相比差异均有统计学意义,表现出快速而持久的扩张血管的作用,从而改善局部的微循环。表1 地蜂子醇提物对正常小鼠肠繁育膜细动脉口径的影响表2 地蜂子醇提物对正常小鼠肠系膜细静脉口径的影响 表3 地蜂子醇提物对正常小鼠肠系膜毛细血管开放量的影响与给药前相比,**P<0.01;n=10
3.2 地蜂子醇提物对小鼠毛细血管开放量的影响结果见表3。给药后小鼠肠系膜血流速度加快,毛细血管开放数量增多,在30 min时达到高峰,60 min时仍然有较好的作用,与给药前相比差异均有统计学意义。
4 讨论
本实验采用活体肠系膜微循环观察法[3],观察了地蜂子对小鼠肠系膜循环的影响。实验结果表明,地蜂子对小鼠肠系膜细动脉和细静脉口径均具有不同程度的扩张作用,能增加微毛细血管的开放数量级,作用迅速持久。另外,在实验中观察到在给药后15~20 min,伴随着毛细血管开放数量的增加,微循环血流速度是地蜂子具有良好活血、镇痛作用的机制之一,这将为竹节人参临床用于微循环障碍类疾病或心血管系统疾病提供。但对肠系膜微循环影响的主要活性部位或成分还有待进一步研究。为了更加全面了解地蜂子活血和镇痛的作用机理,其对血液流变性和凝血机制的影响也还需要进一步研究。
【参考】
[1] 朱敏英.地蜂子在土家族医药中的使用及其镇痛作用的实验研究[J].中华实用中西医杂志,2005,18(6):913.
[2] 朱敏英.地蜂子在土家族医药中的使用及其镇痛作用的实验研究[J].时珍国医国药,2005,16(8):748.
[3] 陈 奇.中药药理研究方法[M].北京:人民卫生出版社,1993:499.