加味柴平颗粒剂提取工艺研究
作者：潘金辉 陈越 彭镇耀 郭胜 陈振辉
【摘要】 目的：研究加味柴平颗粒剂的提取工艺，为确定其疗效提供依据。方法：采用正交设计，以黄芩苷转移率及干浸膏收率为考察指标，考察乙醇浓度、提取时间，提取次数和乙醇加入量4个因素对提取的影响。结果：经综合分析，最佳的提取工艺条件是：A2B3C3即加11倍65%乙醇，回流提取2次,每次2h。结论：该项提取工艺条件稳定、合理，且可降低生产成本，为制剂大生产提供依据。
【关键词】 加味柴平颗粒剂；正交试验；提取工艺；黄芩苷
加味柴平散是我院省级名老中医临床验方，由于临床效果好，深受广大患者的欢迎，为便于患者的使用，考虑新剂型开发成颗粒剂，便于患者的携带、使用、存放。我们以黄芩苷转移率及干浸膏收率为考察因素进行工艺研究。通过正交试验对工艺条件进行优化，选择合理的提取工艺条件。
1 试剂与仪器
日木岛津C 5?930薄层扫描仪(日木岛津),MA 110型分析天平(上海第二天平仪器厂),2K?82B型减压干燥箱(上海实验仪器总厂)，TN ?1008型托盘扭力天平(上海第一天平仪器厂)。黄芩苷对照品(批号:120614?200512，由药品生物制品检定所提供);黄芩、柴胡、甘草等均由湛江第一中药剂科提供。其余试剂由湛江市吉民药业有限公司提供。
2 试验方法与结果
为进行正交试验研究，我们对影响提取的主要因素：乙醇浓度、提取时间、加水量、提取次数等工艺条件进行初选。查阅与上述药材提取的相关资料，提取工艺条件：乙醇浓度50%-85%，醇量5-11倍量，提取次数2-3次，提取时间2-4h。以上述工艺条件进行初选工艺研究。
2.1 乙醇浓度对干浸膏收率及黄芩苷转移率的影响 由于提取工艺条件未明确，选择合适的提取溶剂成为关键。所以，本实验：药材粉碎成粗粉，11(4，4，3)倍醇量，回流提取3次，4(1.5，1.5，1)h的工艺来确定乙醇浓度实验。方法：取同批号的药材(含黄芩苷9.6%)，粉碎成粗粉，每组0.5个处方量共240g，各取5组，分别加入11(4，4，3)倍不同浓度的乙醇(55%、65%、75%、85%、95%)，回流提取3次,第1、2次每次1.5h，第3次1h；合并，滤过，取样测定黄芩苷的含量及其干浸膏量，并，实验结果见表1。
表1 乙醇浓度对干膏收率及黄芩苷的提取的影响（略）
实验结果显示：乙醇浓度为：55%-75%时，黄芩苷转移率最高，乙醇浓度大于75%，黄芩苷的转移率基本不变。因此，初步选择乙醇浓度为：55%-75%。
2.2 提取次数对干膏收率及黄芩苷的转移率的影响 方法：取0.5个处方量(丸剂)的醇提药材(茜草等16味药材，其中，牛蒡子含黄芩苷9.6%)共390g，粉碎成粗粉，分别加入4，4，3，3倍65%乙醇，回流提取4次，共5(1.5，1.5，1，1)h，分别滤过，取样测定黄芩苷的含量及测定其干浸膏量，并计算，实验结果见表2。
表2 提取次数对干膏收率及黄芩苷转移率的影响（略）
实验结果显示：2次提取已基本将黄芩苷完全提取，且浸膏收率也达到4次提取的96%以上，因此，工艺的提取次数确定为：2次回流提取。
2.3 提取时间对干膏收率及黄芩苷转移率的影响 方法：取同批号的醇提药材(人参等4味药材，其中，黄芩含黄芩苷9.6%)，每组0.5个处方量共240g，分取5组，分别粉碎成粗粉，各加入9(5，4)倍的65%乙醇(由提取次的实验中:8倍醇量，2次回流提取，已基本将黄芩苷完全提取，因此，以9倍乙醇量进行以下实验)，分别按2.5(1.5，1)、3(1.5，1.5)、 3.5(2，1.5)、4(2，2)，4.5(2.5，2)h回流提取2次，合并，滤过，取样测定黄芩苷的含量及测定其干浸膏量，见表3。
表3 提取时间对干膏收率及黄芩苷转移率的影响（略）
实验结果显示：随着提取时间的增加，干浸膏收率、黄芩苷转移率均升高；回流时间达到4h后，干浸膏收率、黄芩苷转移率均无明显变化，因此，选择提取时间为：3-4h。
2.4 乙醇加入量对干膏收率及黄芩苷转移率的影响 方法：取同批号的醇提药材(人参等4味药材，其中，黄芩含黄芩苷9.6%)，每组0.5个处方量共240g，分取5组，分别粉碎成粗粉，分别加入5、7、9、11、13倍量的65%乙醇，回流提取2次，每次2h；合并，滤过，测定黄芩苷含量及其干浸膏量，结果见表4。
表4 乙醇加入量对干膏收率及黄芩苷转移率的影响（略）
结果表明：随着乙醇量的增大，干浸膏收率和黄芩苷转移率相应增加，在乙醇达到11倍量后，干浸膏收率和黄芩苷转移率变化不大，因此，选择乙醇量为：7-11倍量。
3 正交试验筛选醇提工艺的最佳条件
方法：取同批号的醇提药材(人参等4味药材，其中，黄芩含黄芩苷9.6%)，每组0.5个处方量共240g，均处理成<1cm以下的小段，各取9组，按因素水平表设定工艺条件回流提取2次，滤过，称重，分别测定黄芩苷的含量及测定其干浸膏量，结果见表5。
表5 正交试验结果（略）
按主次指标，规定黄芩苷得率X满分为60分，经测定所用药材的黄芩苷含量为9.6%，实验中黄芩投料量为50g，其黄芩苷的总量为4800mg，故样品中以黄芩苷的得率X=4800mg为满分，即每80mg为1分，计分为X/80，浸膏收率Y满分为40分，据实验结果分析，浸膏收率变动范围在10%-15%，故规定浸膏收率10%为0分，15%为40分，每增加1%，加上8分，计分为8(y-10)，两项指标总分为100分，总评分为X/80+8(y-10)。按上述的评分方法进行评分，以其评分结果进行直观分析。结果由直观分析可知，对干浸膏收率、黄芩苷提出量有影响顺序为：乙醇浓度＞加醇量＞提取时间；最佳的提取工艺条件是：A2B3C3即加11倍65%乙醇，回流提取2次，每次2h。
4 验证实验
由正交实验结果筛选的工艺：加11倍65%乙醇，回流提取2次，每次2h。据此工艺条件进行验证3批，结果与正交实验结果一致，因此，确定醇提取的工艺条件为：65%乙醇11倍量，回流提取2次，每次2h。
5 讨论
本试验以黄芩苷转移率及干浸膏收率为考察指标，考察乙醇浓度、提取时间、提取次数和乙醇加入量4个因索对提取的影响，通过正交试验，从生产实际(省工、省时、节约能耗等)加以综合考虑，选择最佳提取工艺为A2B3C3即加11倍65%乙醇，回流提取2次，每次2h。经3次生产验证，按以上优选工艺进行提取药液，经过滤、浓缩后喷雾干燥，制粒，所得成品经实验及临床验证，证明产品质量稳定有效，表明该提取工艺合理可行。
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基金项目:湛江科委资助课题(课题号：湛科［2005］097)
