蒙药珍珠丸对外周血淋巴细胞微核率的抑制作用研究

            作者：白海花， 王灵战， 吴柒柱

【关键词】  蒙药珍珠丸；,,电离辐射；,,微核率,,

　　摘要：目的通过蒙药珍珠丸对电离辐射诱发体外培养外周血淋巴细胞微核率的抑制作用，进一步研究蒙药珍珠丸的药效机理。方法按常规微量血培养方法体外培养外周血淋巴细胞以及微核细胞。实验分为对照组、照射组以及加药组三大部分。结果经电离辐射和没有电离辐射组相比，微核率有显著差异（P＜0.001 ），同一放射剂量下，培养液中加入蒙药珍珠丸和不加蒙药珍珠丸相比，微核率显著降低（P＜0.001 ）。结论 电离辐射明显导致微核率升高，蒙药珍珠丸降低微核率。

　　关键词：蒙药珍珠丸；  电离辐射；  微核率  

　　Depressant Effect of Mongolian Medicine Pearl Pill on the Micronuclear Rates of Peripheral Blood Lymphocyte

　　Abstract：ObjectiveTo further make clear the pharmacodynamic mechanism of Mongolian medicine Pearl Pill by studying its depressant effect on the ionizing-radiation-induced micronuclear rates of peripheral blood lymphocyte in vitro culture.MethodsPeripheral blood lymphocyte was cultured with mirco-blood culture solution and then collected. The cultured lymphocytes were divided into control group, irradiated group and medicine-added group.ResultsThe difference of micronuclear rates between the group exposed to ionizing radiation and the group not exposed to ionizing radiation was significant(P<0.001).In the definite radiation dose, the difference of micronuclear rates between medicine-added and non-medicine group was also significant(P<0.001). ConclusionIonising radiation leads to increase of micronuclear rates, and Mongolian medicine Pearl Pill is able to decrease micronuclear rate.

　　Key words：Mongolian medicine Pearl Pill;   Ionising radiation;   Micronuclear rate
   
　　蒙药珍珠丸异名称如意至宝丸、额尔德尼乌日勒。由石膏、诃子、方海、沉香、地锦草、黑苣胜、栀子、肉豆蔻、肉桂、丁香、海金沙、荜茇、决明草、苘麻子、土木香、降香、白苣胜、川楝子、红花、草果仁、白芸香、木香、白檀香、麝香、珍珠、苏格木勒、人工牛黄、水牛角浓缩粉等29味组成［1］。主要有清热、安神、舒筋活络、除“协日乌素”等功效［2］。本实验以电离辐射造成的细胞微核为指标，检测蒙药珍珠丸对外周血淋巴微核率抑制作用。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料外周静脉血取自正常供血者，肝素抗凝；蒙药珍珠丸由内蒙古附属提供。小牛血清、1640培养液、秋水仙素等试剂购自沈阳市化学试剂公司。

　　1.2  方法

　　1.2.1  药液的制备取珍珠丸刮去包衣层，称取5 g加水浸泡30 min，煎煮30 min过滤，沉渣加水同法煎煮，过滤，合并过滤，浓缩成0.1 g/ml生药［3］，高压灭菌（8磅，10 min）。

　　1.2.2  人外周血淋巴细胞微核实验细胞分为对照组、照射组和加药组。按照实验分组要求分别将0.2 ml外周血接种于含有20%小牛血清的RPMI1640培养液中，置隔水式培养箱里37℃培养40 h，加入细胞松弛素B（每瓶加入0.3 ml稀释后的CB，终浓度为6 μg/ml），再继续培养30 h。常规收获细胞、制片。Giemsa染色。

　　1.2.3  镜检计数低倍镜下观察到淋巴细胞，核紫色深染、胞浆淡紫色，多数为双核。微核位于胞浆中，大小约为淋巴细胞核的1/20~1/5。每组计数100个双核细胞，同时记录微核细胞数，多个微核的双核细胞按一个有微核细胞计数。

　　1.2.4  微核率及微核细胞率的及统计学分析微核率=微核数/观察双核细胞数×1 000% 。微核细胞率=含微核的细胞数/观察细胞数×1 000% 。

　　2  结果

　　对照组和照射组相比较，照射组微核出现率明显升高，加入蒙药珍珠丸后抑制微核及微核细胞出现率见表1。

　　表2  镜检计数与统计结果（略）

　　3  结论

　　对照组与照射组相比，微核率及微核细胞率均有显著差异（P＜0.001)。显示射线具有很强的诱发微核产生的作用。电离辐射可以在细胞周期的所有阶段诱发染色体畸变，它可以直接打断DNA，导致染色体断裂，也可以通过间接作用，如电离水分子，产生的自由基作用于DNA形成碱基类似物，从而导致碱基置换［4］。培养液中加蒙药珍珠丸组与不加蒙药珍珠丸组相比，微核率及微核细胞率显著降低（P＜0.001 )，表明蒙药珍珠丸有明显抑制微核及微核细胞产生 。这有可能是以下机制导致 ①预防DNA损伤：蒙药珍珠丸是蒙医名贵方剂，出自《密决增补篇》。有可能预防DNA损伤作用；②DNA损伤的修复：在生理条件下细胞对DNA损伤的修复涉及一系列催化反应［5］。蒙药珍珠丸降低微核率可能通过DNA修复体系，修复酶类的数量或活性的直接或间接调空而实现。其具体作用机制有待进一步研究。

　　：

　　［1］  中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准［S］.蒙药分册，1998：160.

　　［2］  李  静. 蒙药珍珠丸在临床上的应用［J］.实用药物与临床杂志，2005，(4)8: 62.

　　［3］  李宝山，金  玉，乌日娜，等.珍珠丸1号2号水提液对红细胞氧化溶血及血红蛋白的影响［J］.内蒙古医学杂志，1997，(5)29:3.

　　［4］  吴白燕，皱俊华，梁红业，等.枸杞子对微核率的抑制作用［J］.医学生物学研究，2001，(3)：215.

　　［5］  左  及.医学遗传学［M］.北京：人民卫生出版社，2004：31.