密封控温技术制备薄荷油环糊精包合物
【摘要】 目的研究用密封控温技术制备薄荷油β?环糊精包合物的最佳工艺。方法以挥发油包合率为评价指标，采用正交试验法优选最佳工艺条件。结果最佳的工艺条件为薄荷油与β?环糊精的比例为1∶9，包合时间2 h，包合温度110℃。结论 此方法可以用于制备薄荷油β-环糊精包合物。
【关键词】 薄荷油； β?环糊精包合物； 正交试验； 密封控温
Preparation of Inclusion Compound of Pennyroyal β-cyclodextrin by Sealed-heating
Abstract：ObjectiveTo study the optimum conditions for the preparation of pennyroyal?β?cyclodextrin inclusion compound with the sealed-heating method. MethodsThe inclusion rate of oil was used as criterion in the study. The optimum preparation conditions were investigated by the orthogonal design. ResultsThe optimum prepartion conditions for inclusion were established as follows∶oil∶β?cyclodextrin was 1∶9. The inclusion time and temperature were for 2 h and at 110℃.ConclusionThe method can be used for preparation of the inclusion compound.
key words：Pennyroyal; β?cyclodextrin inclusion compound; Orthogonal test; Sealed?heating
薄荷油(pennyroyal)为唇形科植物薄荷Mentha haplocalyx Briq．的新鲜茎叶经水蒸气蒸馏，再冷冻、部分脱脑加工得到的挥发油，为无色或淡黄色的澄清液体。为芳香药、调味药、驱风药 ［1］，是一种常用中药，在中成药制剂中广泛应用。为了防止其挥发，提高其稳定性，使其粉末化以便于制备各种剂型，可将其制备成β-环糊精(β?CD)包合物。常用的包合技术有饱和水溶液法、研磨法、冷冻干燥法、喷雾干燥法等。报道的薄荷油β-环糊精包合物的制备多采用饱和水溶液法［2，3］，本文采用的密封控温技术［4，5］，是一种新型制备包合物的方法。目前，采用此技术制备薄荷油β-环糊精包合物在国内尚无文献报道。该技术的原理是将主、客分子密封于容器内，通过控制加热温度和时间等因素，使客分子在一定温度下挥发或升华成为气体分子进入主分子空穴中与其相互结合，当温度降低后，客分子就以实体物质形式借助分子间范德华力、氢键或盐键等结合方式形成包合物。与其他包合方法相比，该技术制备包合物的特点为：①制备过程中不需加入任何溶剂，包合物中没有溶媒残留，后处理方便；②包合速度快，包合率高；③制备工艺简便；④对中药挥发油或具有升华性质的药物采用该技术制备包合物有明显的优势。本文使用该技术制备了薄荷油β?环糊精包合物并用正交实验法筛选了工艺条件，用薄层层析法对包合物进行了鉴定。
1 仪器与试药
101?3型电热鼓风干燥箱（上海实验仪器厂有限公司）；挥发油测定仪（符合《药典》2005年版要求)；β?环糊精（中国医药集团上海化学试剂公司）；薄荷油（中国荣光石油产品有限公司）；其他试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 包合物的制备
根据正交实验设计的实验数据，取一定量的β?环糊精和薄荷油，采用等量递加法于研钵中研匀，装入安瓿中，熔封。控温加热规定时间，放冷至室温，置冰箱冷藏过夜，取出安瓿内包合物，用无水乙醇和蒸馏水洗涤去除未包合的薄荷油和β?环糊精，置干燥器中干燥，即得薄荷油β?环糊精包合物。
2.2 包合物中薄荷油含量的测定
称取制备的包合物适量，置500 ml圆底烧瓶中，加入蒸馏水200 ml，按《药典》2005年版附录XD挥发油测定法项下甲法测定包合物中薄荷油的含量。
2.3 薄荷油的空白回收率测定
精密量取薄荷油1.0 ml，置500 ml圆底烧瓶中，加入蒸馏水200 ml，余同2.2项下操作，同法测定3次，按下式平均空白回收率为93.3%。
空白回收率=回收的薄荷油量ml加入的薄荷油量ml×100%
2.4 包合率计算
按下式计算出薄荷油包合率。
包合率=包合物含油量ml投油量ml×空白回收率×100%
2.5 正交实验设计
根据预实验结果，以薄荷油与β-CD的比例、包合时间和包合温度为考察因素，每个因素3个水平，按L9（34）正交表进行正交设计，以包合率为考察指标，对包合工艺进行优选。各因素水平见表1。表1 因素水平（略）
2.6 包合物的薄层层析鉴别
取制得的包合物0.5 g，用95%乙醇2 ml溶解、过滤，滤液作为供试品溶液（A）。取薄荷油2滴用95%乙醇2ml溶解作为对照品溶液（B）。另取包合物经水蒸气蒸馏提取的薄荷油2滴，用95%乙醇2 ml溶解得样品溶液（C）。取A、B、C点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-石油醚（15∶85）为展开剂，放入展开槽中5 min，再斜行展开。喷1%香荚兰醛硫酸液显色，烘干比较样液A，B，C斑点的异同。
3 结果与讨论
3.1 结果表明，影响薄荷油包合率的因素依次为A﹥B﹥C，主要影响因素为A，最佳工艺条件为A2B2C2，即：薄荷油与β-环糊精的比例为1∶9（ml∶g），包合时间为2 h，包合温度为110℃。对此最佳工艺进行验证实验，结果薄荷油包合率平均达82.4%(n=3)，因此确定该工艺条件为最佳包合工艺条件。结果见表2～3。表2 L9(34)正交表及实验结果（略）表3 方差分析（略）
3.2 包合物的薄层层析鉴别
结果表明，薄荷油β-CD包合物（A）在与薄荷油对照液（B）相对应的位置未出现斑点，提示薄荷油经包合后进入了β-CD分子腔内。包合物经水蒸气蒸馏提取的薄荷油（C）在与薄荷油对照液（B）相对应的位置上呈现相同颜色的斑点，证明包合后挥发油的组分基本无变化。
3.3 由实验结果可见，当β-环糊精用量增加到一定程度（1∶9）时，再增加用量（1∶10）包合率不再提高，包合时间也是如此，温度太高亦不利于薄荷油的包合。长时间高温加热，有可能使已经被包合的薄荷油重新挥发出来。
3.4 实验结果提示，密封控温技术作为一种新型的包合技术，用于中药挥发油的包合，方法简便易行，包合效果良好，有着良好的应用前景。
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［1］郑汉臣，蔡少青.药用植物学与生药学，第4版［M］.北京：人民卫生出版社，2003：383.
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