小儿正气颗粒质量标准的研究

【摘要】  　　目的：建立小儿正气颗粒的质量标准。方法：采用薄层扫描法测定黄芪中的黄芪甲苷的含量。结果：黄芪甲苷在1.005～6.030 μg范围内具有良好的线性关系，r＝0.999，平均加样回收率97.02%，RSD＝1.80%。结论：建立的质量标准可有效的控制小儿正气颗粒的质量。

【关键词】  小儿正气颗粒 质量标准 薄层扫描 黄芪甲苷

　　小儿正气颗粒是由黄芪、补骨脂等5味药组成，具有补肺健脾、益肾固本之功效，用于一切体质虚弱，反复呼吸道感染的病儿。为控制其质量，保证其药效，采用薄层扫描法对黄芪所含黄芪甲苷进行含量测定，报告如下。

　　1  实验材料
       
　　CS?9301双波长扫描仪(日本岛津)，黄芪甲苷化学对照品(由药品生物制品检定所提供，批号：0781?9906，规格：供含量测定用)，所用试剂均为色谱纯和分析纯。

　　2  含量测定

　　2.1  展开剂  氯仿—甲醇—正丁醇—水(2∶1∶4∶1)10℃以下放置过夜的下层。

　　2.2  对照品及供试品溶液的制备

　　2.2.1  对照品溶液的制备  精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。

　　2.2.2  供试品溶液的制备  取本品装量差异项下的内容物，混匀，取约2.5g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇80 mL，回流提取4 h，提取液蒸干，加水20 mL，用水饱和乙醚提取3次，每次20 mL，弃去乙醚液，用水饱和正丁醇提取5次，每20 mL，合并提取液，回收正丁醇至干，残渣加水5 mL使溶解，上已处理好的大孔树脂柱(长16 cm，内径1.5 cm)以水100 mL洗脱，弃去水液，再用40%乙醇140 mL洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇180 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水饱和正丁醇20 mL使溶解，用正丁醇饱和氨试液提取3次，每次20 mL，弃去，再用正丁醇饱和水20 mL提取，弃去水液，正丁醇层蒸干，残渣加甲醇溶解，并转移至2 mL量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法［1］试验，精密吸取供试品溶液6 μL，对照品溶液2 μL与4 μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿—甲醇—正丁醇—水(2∶1∶4∶2)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定。照薄层色谱法［1］进行扫描，波长：λs＝530 nm，λR＝700 nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，，即得。

　　2.3  阴性对照品溶液的制备及测定  取除黄芪外处方中各药材一定量，按制法及供试品溶液的制备方法，制成空白对照液，按正文中含量测定方法进行展开，测定，测定结果在530 nm处无吸收，说明阴性无干扰。

　　2.4  线性关系考察  精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5、6 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷—丙酮—醋酸乙酯(5∶1.2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，以10%硫酸乙醇液，105℃加热至斑点显色清晰，在λs=530 nm,λR=700 nm条件下测定，测定结果以峰面积积分值为纵坐标，以点样量为横坐标，绘制标准曲线，黄芪甲苷的回归方程Y=4.3153X-0.2760，r=0.999，由此确定黄芪甲苷线性范围为1.005～6.030 μg。

　　2.5  精密度试验  在同一薄层板上，点对照品溶液2 μL，共5个点，依法展开，测定，考察精密度。结果RSD为1.36%，表明同板精密度较好。
    　　
　　取对照品溶液4 μL，分别点在不同的5块薄层板上，依法展开，测定，考察精密度。结果RSD为2.28%，表明异板精密度较好，但不如同板精密度。

　　2.6  重复性试验  取同一批样品，依正文方法独立测定5次，测定样品含量，以考察本法的重现性。结果RSD为1.12%，表明该方法重现性良好。

　　2.7  加样回收率试验  精密称取同法测定的已知含量样品(0.2234 mg/g)共5份，分别精密加入对照品(0.201 mg/g)2mL，依法测定，回收率。结果黄芪甲苷平均回收率为97.02%,RSD＝1.80%，表明本法准确性较好，方法可行。

　　2.8  稳定性试验  取供试品溶液，每隔一段时间展开1次，共展开5次，所得5个数据的RSD为1.26%，表明样品中的黄芪甲苷在8 h内稳定。

　　2.9  样品测定  取样品3批，按供试品溶液制备方法处理，照上述含量测定方法测定，结果3批样品的含量测定结果为：070701，070702，070703的含量(mg/袋)，分别为1.2715，1.1545，1.412。

　　3  小结

　　3.1  含量测定在供试品溶液制备中，根据被提取成分黄芪甲苷的溶解性，黄芪甲苷属皂苷类化合物，极性较大，其良好提取溶剂为甲醇，故供试品溶液制备方法选择甲醇为溶剂，分别选择超声提取法和加热回流提取法提取。结果用回流提取法的提取效率要高，所以选择超声提取方法，并采用乙醚脱脂、正丁醇提取、大孔树脂吸附去除杂质，以保证样品分离效果好。

　　3.2  分别选择氯仿—甲醇—水(13∶6∶2)下层、正丁醇—醋酸乙酯—水(6∶3∶1)上层、氯仿—甲醇—正丁醇—水(2∶1∶4∶1)10℃以下放置过夜的下层作为展开剂，结果氯仿—甲醇—正丁醇—水(2∶1∶4∶1)10℃以下放置过夜的下层展开效果较好，故采用此色谱条件为含量测定方法［1?3］。

【】
  　　［1］中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典［S］.一部.北京：化学出版社，2005:75.

　　［2］吕武清.中成药中的药材薄层色谱鉴别［M］.北京:人民卫生出版社,1997:87.

　　［3］郑虎占.中药研究与应用［M］.北京：学苑出版社，1997:10.