甘麦大枣合百合地黄汤加减抗抑郁作用研究

                      作者：庞武耀,李明亚,李娟好

【摘要】  目的 探讨甘麦大枣合百合地黄汤的抗抑郁作用。方法 采用小鼠强迫游泳试验和小鼠尾悬挂试验抑郁模型对甘麦大枣合百合地黄汤加减的抗抑郁作用进行研究。结果 甘麦大枣合百合地黄汤可显著缩短小鼠尾悬挂的失望时间和小鼠强迫游泳的不动时间, 并有剂量依赖性，其药理作用与氟西汀相当，但比单味石菖蒲强。甘麦大枣合百合地黄汤五味、六味各剂量组与生理盐水对照组比较，差异有非常显著性。结论 甘麦大枣合百合地黄汤在行为绝望动物抑郁模型上具有抗抑郁作用。

【关键词】  抗抑郁作用; 甘麦大枣合百合地黄汤; 石菖蒲

 Antidepressant effect of water decoction of Ganmai Dazao  Baihe Dihuang on the behavioral despair animal model of depression

    Abstract:Objective  To evaluate the antidepressant effect of Ganmai Dazao  Baihe Dihuang Decoction. Methods  Forced swimming test and tail suspension test models of depression in mice were conducted to observe the antidepressant effect of Ganmai Dazao  Baihe Dihuang Decoction. Results  Ganmai Dazao  Baihe Dihuang decoction and fluoxetine significantly shortened immobility time in forced swimming test and despair time in tail suspension in the two behavioral despair animal model of depression. Antidepressant effect of Ganmai Dazao  Baihe Dihuang decoction and fluoxetine both showed dose?dependence in the certain degree. The effect of Ganmai Dazao  Baihe Dihuang decoction was the same in potency as compared with that of fluoxetine. But was more in potency as compared with single herb of Acori graminei rhizome. Ganmai Dazao  Baihe Dihuang decoction (five herbs) and Ganmai Dazao  Baihe Dihuang decoction plus Rhizoma Acori Tatarinowii (six herbs) had at different doses showed significant differences compared with saline control group.  Conclusion    Ganmai Dazao  Baihe Dihuang decoction had obvious antidepressant effect on the behavioral despair animal model of depression.

    Key words:antidepressant effect; Ganmai Dazao Baihe Dihuang decoction; Rhizoma Acori Tatarinowii

   抑郁症是社会常见病，其病症易遭忽略，常杀人于无形。有资料显示抑郁症患者是自杀的高危人群,约有10% ～15%的患者可因此而自杀［1］。目前临床抑郁症的方法有：药物治疗、心理治疗、电激治疗、手术治疗等。由于此病可演变为慢性疾病，长期服用合成药物副作用大；另一方面，抑郁症的成因及发病机制甚为复杂，现有药物的抗抑郁谱窄而昂贵［2］,提高脑内5?HT或单胺类化合物的含量虽可改善抑郁症，但未能照顾到抑郁症患者脑内单胺类化合物含量低下的主因,所以各国正积极开发新的抗抑郁药，尤其是在运用天然药物方面，由于其具有副作用少、抗抑郁谱较广等优点而备受青睐。

    　　用中医药治疗抑郁症等情感性疾病有很多成功的案例。中医古方甘麦大枣汤配合百合地黄汤自古用以治抑郁。甘麦大枣汤中，大枣能养血安神，配伍甘草及浮小麦以养心宁神，治血虚、脏躁、神志不安；百合地黄汤能清心安神，用于热病余热未除，虚烦惊悸，失眠多梦。曾有临床实验运用甘麦大枣汤合百合地黄汤治疗精神分裂症、抑郁症、神经官能症等，凡属心肝血虚火旺病机者，皆取得较满意的疗效［3］。中药石菖蒲亦为治疗情感性疾病的常用药物，现代药理研究表明石菖蒲的水溶部份具有抗抑郁作用，唯其药效与选择性5?HT再摄取抑制剂类（SSRIs）合成药有一段距离［4］。

    　　本研究采用抗抑郁药的高选择性动物模型小鼠尾悬挂试验和小鼠强迫游泳试验模型对甘麦大枣合百合地黄汤（后称“五味”）、甘麦大枣合百合地黄汤加石菖蒲（后称“六味”）进行研究，并与相同剂量的单味石菖蒲水煎液进行比较，为甘麦大枣合百合地黄汤的临床应用和进一步的开发研究打下基础。

    1  实验材料

    1.1  动物

    SPF级昆明系健康小鼠，雄性，体质量18～22 g，均由广东省实验动物中心提供,动物许可证号2007A017。

  1.2  药品

    盐酸氟西汀胶囊(20 mg/片)由奥麦伦（Omelam）药厂出品，用0.9 % 氯化钠注射液配制成所需浓度。甘草、百合、大枣、浮小麦、生地、石菖蒲由北京同仁堂广州分店提供，由广东药学院生药教研室刘基柱老师鉴定，用水煎煮成浓度（含生药）分别为4 g/mL、3.6 g/mL、0.4  g/mL的药液。

    1.3  实验仪器  自制小鼠悬尾实验装置，用一直径约１ cm的圆柱形木条贯穿一个大概30 cm×30 cm×30 cm的纸箱，用以悬挂小鼠并隔离小鼠的视线。强迫游泳实验装置：玻璃圆筒（高40 cm，直径18 cm）

    1.4  药物制备方法

    单味石菖蒲和五味两种处方组成及用量见表1。表1  单味石菖蒲和五味两种处方组成及用量各组方剂分别以下述方法制备煎剂：(1)将药材用清水冲洗后，放进清水盖过药面，浸润半小时；(2)先以大火煮致沸腾，再用慢火煎1 h;(3)取出煎剂后，再放进清水盖过药面，煮沸后，再以慢火煎30～40 min;(4)重复(3);(4)混合3次煎出液，过滤后浓缩，使2种处方及单味石菖蒲煎剂分别含生药为4  g/mL、3.6 g/mL、0.4  g/mL，储存于冰箱备用;(5)灌胃前半小时，用蒸馏水按高浓度∶中浓度∶低浓度 ＝4∶2∶1的比例，将浓缩药液配成高、中、低3种浓度(六味：高、中、低浓度分别为4 g/mL、2 g/mL、1 g/mL;五味：高、中、低浓度分别为3.6 g/mL、1.8 g/mL、0.9 g/mL；单味石菖蒲：高、中、低浓度分别为0.4 g/mL、0.2  g/mL、0.1 g/mL)。并设氟西汀对照组：用蒸馏水将氟西汀配制成所需浓度。

    2  实验方法

    2. 1  小鼠尾悬挂试验［5］

    2. 1.1  实验分组及给药  取雄性小鼠，随机分成11组，生理盐水组（空白对照组），氟西汀对照组，六味高、中、低剂量各一组，五味高、中、低剂量各一组，单味高、中、低剂量各一组，每组13～15只。空白对照组、氟西汀阳性对照组每天灌胃给予生理盐水0.2 mL／10 g，其他各组按0．2 mL／10 g的药量给药，1次／d，共给药3 d,第4天实验前30 min空白对照继续给生理盐水，阳性对照给盐酸氟西汀50 mg/kg，其他各组给相应的药液0．2 mL／10 g。

    2.1.2  小鼠失望时间的测定  给药30 min后，固定小鼠尾端，使其倒挂，头离地约5 cm,以挡板隔离动物视线，动物为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间后出现间断性不动，显示失望状态。记录6 min内小鼠不动时间为失望时间 (记录时间时应以持续3 s以上不动为有效不动时间)。

    2.2  小鼠强迫游泳试验［5］

    2.2.1  预试  将雄性小鼠单个放入水深为10 cm左右的玻璃圆筒中（高40 cm，直径18 cm），水温25 ℃, 水深可稍作调整，以小鼠后足刚可触及筒底又不足以支撑身体为宜。初放入时，小鼠强迫游泳并挣扎向上爬或潜入筒底，2～3 min后活动逐渐减弱，出现间歇性不动状态，且时间越来越长，5～6 min后不动状态的时间占总时间的80 %左右，预试15 min以后将小鼠置32 ℃温室烤干。

    2. 2.2  实验分组  剔除预试中的不合格者，将合格的小鼠随机分成11组，每组13～15只，详细分组同小鼠尾悬挂试验。空白对照组、氟西汀阳性对照组每天灌胃给予生理盐水，甘麦大枣合百合地黄汤五味、六味各3个剂量组和石菖蒲水煎剂3个剂量组分别灌胃给予3种不同浓度的五味、六味煎剂和石菖蒲水煎剂，上述各组给药体积均为0.2 mL /10 g ，1次／d。灌胃3 d后，第4天实验前30 min，除氟西汀阳性对照组灌胃给予盐酸氟西汀0. 05 g/kg外，其余各组按上述给药不变。

    2.2.3  小鼠不动时间的测定  实验在上午8：00～12：00进行，灌胃给药后30 min，在与预试条件完全相同的情况下，把小鼠放入圆筒中，记录5 min内大鼠强迫游泳的不动时间。

    2.2.4  统计方法  计量资料以（±s）表示，采用t检验，以P<0.05为差异有显著性。

    3  结 果

    3.1  五味、六味和石菖蒲水煎剂对小鼠尾悬挂试验的影响  见表2。　表2  不同浓度五味、六味和石菖蒲水煎剂在小鼠悬尾失望时间中作用的影响

    3.2  五味、六味和石菖蒲水煎剂对小鼠强迫游泳不动时间的影响  见表3。表3  不同浓度甘麦大枣合百合地黄汤五味、六味和石菖蒲水煎剂对小鼠强迫游泳试验的影响 低剂量组1586.50±26.45  与空白对照组比较:*P<0.05；**P<0.01（t检验）

    两种实验结果都显示甘麦大枣合百合地黄汤五味、六味和石菖蒲水煎剂的3种剂量均有抗抑郁活性，各剂量组与生理盐水对照组比较，差异有非常显著性。高剂量最优，中剂量次之，低剂量更次之，并具有剂量依赖性，其药理作用与氟西汀相当，但比单味石菖蒲强；但甘麦大枣合百合地黄汤五味、六味两者抗抑郁活性无明显差别，五味在强迫悬尾实验活性较佳，但在游泳实验则以六味较优，两种处方都未能表现明显确定的优势，唯以六味效果较为稳定。

    4  讨  论

    本实验采用的两种试验模型均属行为绝望模型，是指动物在无法逃脱（如悬尾、强迫游泳等）的情况下表现出的不动状态。此模型十分经典，为国内外多数学者所采用，是较好的抗抑郁药筛选模型。小鼠不动时间的长短正好反映了不同药物或剂量的抗抑郁作用的强弱。

    　　本实验结果显示甘麦大枣地黄汤具有抗抑郁活性，并呈剂量依赖性，其药理作用与氟西汀相当，值得进一步开发研究，以用于临床抑郁症的。石菖蒲水提部分的抗抑郁作用虽早已被确定［6］，在本实验中所采用的剂量较低，故抗抑郁作用不及甘麦大枣汤合百合地黄汤加/减石菖蒲明显。比较甘麦大枣汤合百合地黄汤加/减的抗抑郁作用，显示石菖蒲对甘麦大枣合百合地黄汤的抗抑郁活性影响不明显，是否能加强甘麦大枣合百合地黄汤的抗抑郁作用，仍需作进一步的研究和探讨。

    　　本实验已初步确认甘麦大枣汤合百合地黄汤加/减石菖蒲的抗抑郁作用，但复方作用复杂，其有效成分、药理机理、应用及安全性等尚不清楚。下一步应进行更深入的研究，以开发出疗效佳、耐受性高、副作用少的新药，造福社会，造福人民。

【】
  ［1］ 杨志新. 针灸临床讲座(9):抑郁症［J］. 临床医生, 2006,34 (9):18-19.

［2］ 卢艳花,谭仁祥. 抗抑郁天然药物的研究进展［J］.中草药,2001,31(9):718.

［3］ 张志亭,张彦平,李素水，等. 甘麦大枣汤合百合地黄汤治疗神志病举隅［J］. 河北中医，2OO6，28（3）：203.

［4］ 原海燕，刘艺平.精神药物相互作用的利弊［J］.国外医学:精神病学分册, 2000,27(1):8.

［5］ 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.3版.北京：人民卫生出版社，2001：807.

［6］ 李明亚,陈红梅. 石菖蒲对行为绝望动物抑郁模型的抗抑郁作用［J］. 中药材，2001，24（1）：40-41.