VEGF在子宫内膜异位症中的表达及其意义
【摘要】 目的 观察血管内皮生长因子（VEGF）在子宫内膜异位症（EMS）中的表达并探讨其在EMS发病机制中的作用。方法 利用免疫组化法检测VEGF在30例EMS的异位内膜及在位内膜组织、30例正常子宫内膜组织中的表达。结果 VEGF在异位内膜的表达显著高于在位内膜和正常子宫内膜（P<0.05）。VEGF在EMS在位内膜的表达显著高于正常子宫内膜（P<0.05）。结论 VEGF在EMS的发生、中起重要作用。
【关键词】 血管内皮生长因子；子宫内膜异位症；免疫组织化学；表达
ABSTRACT:Objective To observe the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in endometriosis,and to explore its possible role in the pathogenesis of endometriosis. Methods The expression of VEGF in 30 normal endometrium,30 ectopic endometrium and eutopic endometrium were detected by immunohistochemistry,and the data was analyzed with SPSS11.0 statistical software. Results The expression level of VEGF in the ectopic endometriotic tissues was significantly higher than those in the eutopic endometrium and nomal endometrium (P<0.05),and the expression level of VEGF in the eutopic endometrium was significantly higher than that in nomal endometrium (P<0.05). Conclusions VEGF may contribute to the pathogenesis of endometriosis.
KEY WORDS:Vascular endothelial growth factor;Endometriosis;Immunohistochemistry;Expression
子宫内膜异位症（EMS）发病机制涉及到多基因遗传、环境因素、免疫异常、血管生成异常及内分泌异常等多个环节。种植灶子宫内膜的快速生长需要大量的新生血管，血管内皮生长因子(VEGF)是血管内皮细胞的有丝分裂原和成形素，并对内皮细胞有趋化作用。在月经周期中VEGF参与子宫内膜的修复，具有很强的促血管形成能力。本研究采用免疫组化技术检测了VEGF在EMS异位内膜、在位内膜和正常子宫内膜中的表达，以了解其在EMS发病机制中所起的作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料
30例EMS异位内膜标本取自武汉大学人民2006～2008年因卵巢巧克力囊肿行手术的患者，均经病理证实，术前未用激素药，排除其他系统疾病。患者年龄25～45岁，平均32岁。EMS在位内膜取自手术前诊断性刮宫。30例正常子宫内膜标本取自同期病诊断为正常增生期及分泌期的内膜，患者年龄25～43岁，平均年龄31岁。
1.2 检测方法
卵巢子宫内膜异位组织及在位内膜、正常内膜组织经生理盐水冲洗净后10%福尔马林固定，石蜡包埋，制备成组织蜡块，5μm连续切片，HE染色后镜下观察到典型子宫内膜组织为入选标本。
采用SP免疫组化的方法检测VEGF，试剂一抗（VEGF单克隆抗体）、U1traSensitive TM S?P超敏试剂盒及DAB显色剂系福州迈新生物技术开发有限公司产品，操作按说明书进行，用已知的标本作为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照。
1.3 结果分析
利用 Media Cybernetics 公司生产的 Image pro?plus 4.5 免疫组化彩色图像分析系统进行图像分析,选择测定平均光密度(OD)作为评价参数。每个切片选择5个视野，每个视野测定3次后取均值。
1.4 统计学方法
用SPSS11.0统计软件进行。选用t检验、方差分析，P<0.05为差异有显著性意义。
2 结 果
VEGF主要位于子宫内膜腺上皮细胞的胞浆和部分基质血管内皮细胞的胞浆，部分间质细胞有弱着色。VEGF在3种内膜中的阳性表达见图1～3。VEGF在EMS异位内膜中的表达（0.75±0.11）显著高于在位内膜（0.68±0.09）和正常内膜（0.63±0.08），P均<0.05。
3 讨 论
脱落的子宫内膜粘附并种植在腹膜或组织器官上依赖于足够血液供应的建立和维持，种植灶子宫内膜的快速生长需要大量的新生血管。因此新生血管形成是种植成功的必要条件，也是子宫内膜异位症发生的关键步骤。血管形成有许多细胞因子和生长因子及酶的参与。迄今为止较为肯定的促血管发生因子中，VEGF被认为是诱导血管生成的最重要、最关键的因子，在血管形成中起中心调节作用。
VEGF是一种特异性地作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，具有促进微静脉、小静脉通透性增加，血管内皮细胞分裂、增殖、细胞质钙聚集以及诱导新生血管形成等作用。VEGF是由单一基因编码，含8个外显子和7个内含因子。由于VEGF mRNA的选择性剪切，其结果产生VEGF121、VEGF145、VEGF189、VEGF206、VEGF165等至少5种蛋白形式[1]。VEGF121、VEGF145及VEGF165是分泌型可溶性蛋白，能促进血管内皮细胞有丝分裂，且可增加内皮细胞通透性[2]，VEGF189及VEGF206是与细胞外基质紧密结合的不溶性蛋白[3]，仅有增加内皮细胞通透性作用。
VEGF可在正常人或动物的很多组织中表达，但一般水平很低。一些代谢旺盛、血供丰富的组织如肾小球足突细胞、心肌细胞、前列腺上皮细胞、精子细胞及肾上腺皮质细胞等，VEGF的表达常高于其他组织；胚胎组织、胎盘、增生期子宫内膜、黄体等，由于生理性血管形成的需要，VEGF的表达水平较高。在病理条件下，尤其是恶性肿瘤组织中，VEGF往往过量表达。1993年Oosterlynck等[4]报道，与正常妇女的腹水比较，内异症患者腹水刺激血管形成的活性明显增加。1996年McLaren等[5]报道，在正常妇女及内异症患者的腹水中都有VEGF的存在，但内异症患者腹水中的VEGF含量明显高于正常对照妇女。Donnez等[6]测定了43例EMS患者的在位内膜、异位内膜以及10例正常妇女的在位内膜上腺上皮和间质细胞的VEGF水平，结果显示EMS患者无论是在位内膜还是异位内膜均比正常的在位内膜要高。本研究的结果显示在EMS患者的异位内膜、在位内膜以及正常内膜中均有VEGF的表达，VEGF在异位内膜的表达显著高于在位内膜和正常子宫内膜，提示VEGF水平的增高使内膜血管生长增加，可能是EMS种植生长的决定因素。VEGF的高表达使病灶部位有着更为丰富的血管生成，为异位内膜的种植和存活提供条件，同时异位内膜的生长可表达更多的VEGF。
【】
[1]Tischer E,Mitchell R,Hartman T,et al.The human gene for vascular endothelial growth factor.Multiple protein forms are encoded through alternative exon splicing[J].J Biol Chem,1991,266:11947
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[5]Mclaren J,Prentice A,Charnock?Jones DS,et al.Vascular endothelial growth factor concentrations are elevated in peritoneal fluid of women with endometriosis[J].Hum Reprod,1996,11:220
[6]Donnez J,Smoes D.Gillerot S,et al.Vascular endothelial growth factor in endometriosis[J].Hum Reprod,1998,13(6):1686
