脂糖舒对D?半乳糖衰老模型小鼠器官指数和自由基代谢的影响

                  作者：吴丹，舒慧，舒思洁，吴基良，汪晖

【摘要】  目的 观察脂糖舒对D?半乳糖衰老模型小鼠器官指数和自由基代谢的影响。方法 采用D?半乳糖制备小鼠衰老模型，同时灌胃不同剂量脂糖舒（Ⅰ组5g/kg、Ⅱ组10g/kg），1次/d、连续6周，并取健康小鼠10只作正常对照。6周末检测各组小鼠的器官指数和血浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果 模型组小鼠除心肌外，肝、脑、肾等器官指数明显降低，血浆SOD活性显著降低，MDA含量显著升高(较正常组P<0.05或0．01)；而脂糖舒二剂量组均能够提高小鼠的脑指数和肾指数，提高血浆SOD活性，降低MDA含量(较模型组P<0.05或0.01)，但脂糖舒二剂量组间心、肝、脑、肾指数及血浆MDA含量无显著差异（P＞0.05），而血浆SOD活性差异显著（P<0.01）。结论 脂糖舒具有一定的延缓衰老作用。

【关键词】  脂糖舒；D?半乳糖；器官指数；自由基；小鼠

    KEY WORDS：Zhitangshu；D?galactose；Organic index； Free radicals;Mice

    动物实验已证明脂糖舒有明显抗糖尿病组织过氧化作用[1]。本实验观察该复方对D?半乳糖衰老模型小鼠的器官指数及血浆SOD活性和MDA含量的影响，旨为探讨脂糖舒是否有延缓衰老的作用。

    1  材料与方法

    1.1  药品与试剂

    脂糖舒由山药、山茱萸、女贞子和西洋参等十几味中药组成，方中药材均购自武汉市九通大药房司门口店，经湖北中医学院药学系詹亚华教授鉴定为合格正品。按[2]法制成相当原生药 1.0g／ml浓缩口服液 ，冰箱4℃保存备用。D?半乳糖购自上海恒信化学试剂有限公司，临用前用生理盐水配制成浓度为1％溶液。SOD试剂盒(批号20070421)、MDA试剂盒(批号20070423)均购自南京建成生物工程研究所。

    1.2  实验动物

    昆明种小鼠40只，体质量19.75±2.09g。雌雄兼用，由本院动物室提供。饲料来源与动物来源相同。

    1.3  实验方法

    取40只小鼠随机分为4组，即正常组、模型组、脂糖舒Ⅰ组和Ⅱ组。每组10只，雌雄各半，分笼饲养。按文献[3]法，除正常组外，其余3组每天颈背部皮下注射D?半乳糖（100mg/kg）,连续6周，制作小鼠衰老模型。脂糖舒Ⅰ组和Ⅱ组分别以5g/kg、10g/kg的脂糖舒浓缩液灌胃，正常组和模型组小鼠分别灌胃等容量的生理盐水，1次/d，连续6周，各组小鼠自由摄食饮水。6周末摘眼球采血，肝素抗凝，离心(3000rpm,10min) 制备血浆；然后脱臼处死，剖开胸腹，取出心、肝和肾，打开颅骨，取出脑组织，用生理盐水洗净残留血液后精确称重，并按公式 [器官指数（mg/ g）= 器官重量（mg）/ 体质量(g)] 上述器官的指数。取血浆后严格按照试剂盒说明书的方法测定血浆SOD活性和MDA含量。

    1.4  统计学处理

    实验数据以均数±标准差（±s）表示，两组间差异的显著性比较采用t检验。     

    2  结  果

    2.1  脂糖舒对D?半乳糖衰老模型小鼠心、肝、脑、肾指数的影响

    模型组除心指数外, 肝、脑和肾的器官指数均显著降低 (较正常组P<0.05)，脂糖舒二剂量组中小鼠的脑和肾的器官指数明显升高（较模型组P<0.05），而脂糖舒二剂量组间各器官指数差异不显著（P＞0.05）,见表1。表1  4组小鼠心、肝、脑和肾的器官指数比较 与正常组比较, *P﹤0.05；  与模型组比较,△ P﹤0.05

    2.2  脂糖舒对D?半乳糖衰老模型小鼠血浆SOD活动、MDA含量的影响

    模型组小鼠血浆SOD活性显著降低,MDA含量显著升高（较正常组P<0.01）；而脂糖舒二剂量组小鼠血浆SOD活性显著升高，MDA含量显著降低(较模型组P<0.05或0.01），但脂糖舒二剂量组间MDA含量无显著差异（P＞0.05），而SOD活性差异显著（P<0.01）,见表2。表2  4组小鼠血浆SOD活性和MDA含量的比较 与正常组比较，*P﹤0.01；与模型组比较，△P﹤0.05、△△P﹤0.01；与脂糖舒Ⅱ组比较，#P﹤0.01

    3  讨  论

    衰老过程中呈现全身组织器官及其功能逐渐的衰颓和萎缩现象，其中，脑和肾脏的重量减轻最为显著[4]。因此，器官指数的变化是反映生物体衰老程度的重要指标之一[5]。本实验采用经典的D?半乳糖诱导的动物衰老模型制作方法[3]，结果显示：模型组小鼠除心脏指数外,肝、脑和肾脏指数均比正常组显著降低（P<0.05），脂糖舒二剂量组小鼠除心和肝脏指数外，脑指数和肾指数明显升高（较模型组P<0.05），表明脂糖舒能拮抗D?半乳糖诱导的衰老模型小鼠脑和肾重量的增龄性下降，对脑和肾器官的衰老过程有明显的延缓作用。

    大量研究结果证明[4～8]，自由基是促进生物体衰老进程的重要因素。自由基可在正常代谢中产生，而普遍存在于生物体系统中的种类多、数量大、活性高的带有不成对的原子或分子，具有极强的氧化反应能力，衰老就是由于细胞代谢过程中自由基产物损害作用的结果。因此，减少自由基生成和增强机体抗自由基的能力可有效地发挥延缓衰老和促进健康的作用。MDA是自由基和脂质过氧化的最终产物，其含量升高表明体内自由基增多和脂质过氧化作用增强，促进衰老进程；而SOD是抗自由基成分，能通过清除体内的自由基和抑制脂质过氧化反应的作用来发挥抗衰老作用。本实验结果显示：脂糖舒能升高血浆SOD活性、降低MDA含量，表明该方具有明显增强机体内源性抗衰老物质活性、抑制自由基和脂质过氧化对组织细胞损害的作用，从而为中药复方脂糖舒具有抗衰老的作用提供了实验依据。

【】
  [1]舒思洁，闵清，吴基良．脂糖舒对糖尿病小鼠组织SOD活性和MDA含量的影响[J]．咸宁医学院学报，2002，16(1)：23

[2]李仪奎.中医药理实验方法学[M]．上海：上海技术出版牡，1991：36

[3]徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].第三版．北京：人民卫生出版社，2002：1465

[4]徐淑云.临床药[M].第三版．北京：人民卫生出版社，2004：113

[5]刘涛，王灿晖，杨进，等．改良三甲散抗脑衰老的实验研究[J].老年医学杂志，2001，21(7)：308

[6]王淑梅，王灿岭．二至丸对亚急性衰老模型小鼠抗衰老作用的实验研究[J]．中医研究，2006，19（5）：21

[7]Rice?Evans CA，Burdon R．Free radical?lipid interactions and their pathological consequences [J]．Prog Lipid Res，1993,32(1)：71

[8]Yu BP．Aging and oxidative stress：modulation by dietary restriction [J]．Free Radic Biol Med，1996,21(5)：651