宫颈癌前哨淋巴结微转移检测意义

              作者：杨宏英，董菊颖，张红平，魏万里

【关键词】  微转移；免疫组化；前哨淋巴结；宫颈肿瘤

　0引言 

　　转移是恶性肿瘤的一个重要标志，是肿瘤手术后复发和放疗及化疗失败的主要原因.  微转移的检测对肿瘤的诊断、分期、复发和预后的判断、手术、综合的选择具有极其明显的指导作用. 我们采用抗角蛋白免疫组化染色方法对宫颈癌患者进行淋巴结微转移的检测，探讨免疫组化对宫颈癌淋巴结微小转移诊断的准确性.

　　1对象和方法

　　1．1对象

　　2005?05/2006?10在我院接受手术治疗的宫颈癌患者34例，所有病例经体检及影像学检查均未发现盆腔或腹主动脉旁淋巴结转移和远处转移. 患者年龄39.2±6.4岁. 鳞癌28例，腺癌4例， 其他2例；Ⅰb期18例，Ⅱa期5例，Ⅱb期11例；G1 3例，G2 16例，G3 15例；术前接受介入化疗5例，腔内放疗10例，介入化疗+腔内放疗6例，未治疗13例.

　　1．2方法

　　手术前1 d分别于宫颈肿瘤周围正常组织的黏膜下10点和2点处注射放射性核素-99 mTc标记的右旋糖酐，剂量为每一个注射点74 MBq. 注药后15,30,60及120 min,应用单光子发射机断层扫描仪(SPECT)，以子宫颈为中心，包括盆腔和下腹部行前位淋巴显像. 注药后16 h经腹施行广泛全子宫切除+盆腔淋巴结清扫术. 术中在宫颈肿瘤周围正常组织的黏膜下3,6,9及12点处注入美蓝4 mL. 识别和定位蓝染的淋巴结为SLN，记录注药到淋巴结蓝染的时间及SLN的部位和数目，然后按常规行盆腔淋巴清扫术. 将切除的子宫和各组盆腔淋巴结标本送到核医学科，取前哨淋巴结周围的脂肪组织（本底）作为对照，用SPECT进行体外探测，记录比本底计数高10倍以上的高计数热点淋巴结为SLN. 将34例患者手术后的全部标本进行ＨＥ染色病理检查, 104枚SLN进行ＨＥ染色，同时采用SP免疫组化染色法进行高分子质量和低分子质量细胞角蛋白免疫组化检测. 免疫组化结果判断：胞质出现棕黄色颗粒为阳性，无棕黄色颗粒为阴性.

　　2结果

　　在34例中共检出SLN 104枚，单一ＨＥ染色无淋巴结转移，而免疫组化抗角蛋白阳性1例（2.94%）,1枚淋巴结出现微转移（图1，2）.

　　3讨 论

　　宮颈癌是全球妇女恶性肿瘤中仅次于乳腺癌的第二位常见肿瘤. 据统计,世界范围内每年估计有46.6万的新发病例,其中80%的病例发生在家［1］. 为我国女性恶性肿瘤第一位［2］. 宫颈癌的主要转移途径为盆腔淋巴结转移，而盆腔淋巴结转移又是重要的预后影响因素，而且也是术后辅助治疗的依据. 因此，淋巴结转移诊断的准确性就显得极其重要. 部分研究显示，宫颈癌微转移的检测有助于预后判断［3］.

　　微转移是指用常规检查方法如影像学、常规病理检查方法难以发现的播散并存活于血循环、淋巴结、骨髓及其他组织器官中的肿瘤细胞. 淋巴结微转移是指淋巴结切片常规组织学诊断未能检出的转移. 在一些实体瘤的研究中，人们已发现微转移的检出率与患者的预后有密切关系，并可早期诊断肿瘤的复发和远处转移. ［4］报道，常规病理检测淋巴结为阴性的患者约30%在10 a内局部复发，长期随访有微小转移的患者无病生存时间和(或)总体生存时间缩短.

　　宫颈癌微转移的检测主要采用免疫组化及PCR技术检测淋巴结、外周血和活检标本中人乳头瘤病毒(HPV)、细胞角蛋白(CK)以及鳞状细胞癌抗原(SCC)的表达. 宫颈癌为上皮组织来源的恶性肿瘤，抗角蛋白免疫组化染色应为阳性，而淋巴结为非上皮来源组织，抗角蛋白免疫组化染色应为阴性，若表达为阳性，说明已发生淋巴结转移. 我们先对34例患者采用联合法进行SLN识别，然后对检出的104枚SLN进行常规ＨＥ染色和SP免疫组化染色，检测高分子量和低分子量细胞角蛋白. 结果显示，单一ＨＥ染色无淋巴结转移，而免疫组化抗角蛋白阳性1例（2.94%）. 通过免疫组化发现了淋巴结的微转移. 研究显示，单一ＨＥ染色仍存在一定的漏诊，通过抗角蛋白免疫组化染色可以增加微转移淋巴结诊断的精确性,微转移的检测可以改变一部分患者的决策.

　　对SLN作出准确的病理报告尤为重要，因为要对所有切除的淋巴结进行连续切片和免疫组织化学染色等精确检查是不切实际的. 但SLN活检使这些精确的病检查成为可能，它可以使病理科医生将注意力集中在少数几个淋巴结的检测上，不仅可以精确地识别淋巴结的转移情况，而且可能发现一些存在微小转移的高危人群. 前哨淋巴结对淋巴结微转移的检测具有指导的作用，这也是前哨淋巴结的另一个意义所在. 本研究34例中共检出淋巴结780枚，其中SLN 104枚，因此，仅对SLN行免疫组化检测大大地节约了成本. 

【文献】
  　　［1］Parkin D M , Bray F, Feflay J, et al. Estimating the world cancer burden［J］ . Int J Cancer, 2001,94:153-156.

　　［2］Parkin DM，bray F，Feflay J，et al．Estimating the word cancer burden:Glbocan 2000 ［J］．Int Cancer，2001，94:153-156．

　　［3］Shivers SC，Wang X，Li W，et al．Molecular staging of malignant melanoma：Correlation with clinical outcome［J］．JAMA，1998，280：1410-1415.

　　［4］Rosen PP，Groshen S，Saigo PE，et al．Along term follow up study of survival in stage Ｉ（T1N0M0）and stage Ⅱ（T1N1M0）breat cacinoma ［J］．J Clin Oncol，1989，7：355．