喉鳞癌组织中肥大细胞和肿瘤相关巨噬细胞计数及其临床意义
作者：李友忠， 杨竹林， 杨新明， 曾益慈， 葛益林/
【摘要】 目的 研究喉鳞癌组织中MC和TAM计数并探讨其相互关系和临床病理意义。方法 41例喉鳞癌标本常规石蜡包埋切片，MC和TAM染色方法为SP免疫组化法。结果 41例喉鳞癌MC计数均数为19.73±5.50/HPF，TAM计数均值为25.91±7.39个/HPF；年龄≤60岁，组织学分级Ⅰ级，颈淋巴结未转移及临床分型T1病例MC和TAM计数均明显低于年龄>60岁，组织学分级Ⅲ级、颈淋巴结转移及临床分型T3病例（P<0.05或P<0.01）； MC计数与TAM计数呈密切正相关（r=0.616，P<0.01）。结论 MC和TAM计数可能是喉鳞癌的生物学行为和预后评估的重要因素。
【关键词】 喉肿瘤;肥大细胞;肿瘤相关巨噬细胞;免疫组织化学
癌间质内浸润的巨噬细胞称之为肿瘤相关巨噬细胞（Tumor?associated macrophage, TAM）, TAM为癌间质中炎性细胞的关键成分［1?4］。近年国外报道TAM与恶性肿瘤进展、血管生成、转移发生及其预后密切相关。癌组织周围及癌组织内总存在数量不等肥大细胞（Mast cell, MC）浸润，近年证实MC具有强烈的促肿瘤血管生成作用，且与肿瘤进展、转移发生及预后有密切关系［5?9］。本文应用SP免疫组化法研究喉鳞癌组织中TAM和MC表达，探讨两者表达的相互关系及其临床意义。
1 资料与方法
1.1 资料
收集我院2000年1月～2004年12月喉鳞状细胞癌手术切除标本共41例，均为男性，年龄范围38～72岁，平均（54.8±12.5）岁。31例为全喉切除，9例为部分喉切除和1例为喉镜切除。I级鳞癌8例，II级16例，III级17例； T19例和T332例，未见T2病例；41例鳞癌中15例发生颈部淋巴结转移，未见远处转移病例。标本均经常规石蜡包埋切片，切片厚4μm。
1.2 主要试剂
鼠抗CD68单克隆抗体，鼠抗色胺酶（Typtase）单克隆抗体，SP试剂盒及DAB?HCL显色试剂盒，均购自北京中杉生物技术公司。
1.3 方法
TAM和MC染色均为SP免疫组化法（具体染色步骤略）。细胞浆和(或)细胞核内含棕黄色颗粒者为阳性细胞，每张切片参照Molin法［5］随机选择5个癌组织高倍视野计数TAM和MC数，±s/HPF表示。以骨髓涂片作为TAM和MC阳性对照，以PBS (pH 7.4)替代一抗作为阴性或替代对照。将所得数据输入SPSS11.0统计软件包，进行t检验及相关分析，以P<0.05为显著性检验水准。
2 结果
41例喉鳞癌中TAM和MC计数均值分别为25.91±7.39/HPF和19.73±5.50/HPF。年龄≤60岁、组织学分级I级、临床分型T1及颈淋巴结未转移病例TAM和MC计数均明显低于年龄>60岁、组织学分级III级、临床分型T3及颈淋巴结转移病例，其差异均有显著或高度显著性（P<0.05或P<0.01）。相关分析结果表明存在高度密切正相关（r=0.616, P<0.01），见表1。表1 TAM和MC计数与喉鳞病临床病理特征的关系
3 讨论
研究发现TAM在肿瘤微环境及肿瘤血管生成的级链反应中扮演重要角色。最近，许多国外文献报道TAM与恶性肿瘤血管生成、转移发生及预后有密切关系，可作为一个恶性肿瘤预后的独立评价指标[1?4］。本组资料发现组织学分级I级、临床分型T1和颈淋巴结未转移病例TAM计数均值明显低于组织学分级Ⅲ级、临床分型T3和颈淋巴结转移病例，其结果与国外文献在其他恶性肿瘤中报道一致。说明TAM计数与喉鳞癌恶性程度、临床分型及颈淋巴结转移状况密切相关，TAM计数高者恶性度高、侵袭潜力强和易发生颈淋巴结转移，提示TAM计数可作为喉鳞癌预后评估的重要生物学指标。
许多研究发现MC与恶性肿瘤的侵袭行为有关，MC可以促进肿瘤的生长和转移，高MC计数往往与恶性肿瘤差的预后密切相关［5?9］；并且发现癌间质内浸润的MC具有强烈促血管生成作用，MC计数与微血管密度呈密切正相关［8，9］。本组资料发现组织学分级I级、临床分型T1和颈淋巴结未转移病例MC计数明显低于组织学分级Ⅲ级、临床分型T3和颈淋巴结转移病例，提示MC计数与喉鳞癌恶性程度、侵袭潜力及颈淋巴结转移发生有密切关系，MC计数高者恶性程度高、侵袭潜力强且易发生颈淋巴结转移，MC计数也是反映喉鳞癌预后的重要生物学指标。
本组资料发现TAM计数与MC计数呈密切正相关，其机制仍不甚清楚，可能与肿瘤间质中浸润的炎性细胞在维持肿瘤微环境中相互调控作用有关，但有待更深入研究。
【】
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