胰岛素样生长因子2与血管瘤增殖关系的研究
【关键词】 血管瘤
摘 要: 目的:探讨胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factor-2 ， IGF-2）与血管瘤增殖、退化之间的关系。方法:应用免疫 组组织化学SP法检测40例血管瘤、15例血管畸形和5例正常皮肤标本中IGF-2及增殖细胞核抗原PCNA的表达情况。结果:血管 瘤组的IGF-2和PCNA表达均高于血管畸形组及正常皮肤组（ P <0.01）;血管瘤组中增生期亚组两标记阳性率均高于退化期亚组（ P < 0.01）; 血管瘤组中IGF-2与PCNA蛋白表达之间的相关系数为0.632（ P <0.01）。结论:IGF-2在血管瘤内皮细胞增殖的调节中起 着重要的作用。
关键词: 血管瘤; 胰岛素样生长因子2; 增殖细胞核抗原; 免疫组织化学
血管瘤是婴幼儿最常见的良性肿瘤，少数也可见于成人。 Mulliken按血管内皮细胞及其生物学行为特征把新生儿血管 病损分为血管瘤和血管畸形，但临床区分比较困难，血管瘤虽 属良性肿瘤，但早期确有类似恶性肿瘤的生长特征，而晚期大 部分又可自行消退。但血管瘤的发病机制目前仍不十分清 楚。胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factor-2 ， IGF- 2），是一种具有很强促进细胞有丝分裂、增殖活性的细胞因 子，在哺乳动物的生长发育过程中起着很重要的作用。最近 研究表明，IGF-2在血管生成中起作用，可能与血管瘤的增殖 密切相关 ［1］ 。增殖细胞核抗原（PCNA）作为恶性肿瘤标志物 可以很好地反映细胞客观的增殖功能。因此，本研究运用免 疫组织化学技术对40例血管瘤、15例血管畸形和5例正常皮 肤标本中IGF-2及增殖细胞核抗原PCNA的表达，探讨IGF-2 与血管瘤增殖、退化之间的关系。
1 材料与方法
1.1 材料 选取2001～2004年我院手术切除的皮肤血管瘤组织（临 床诊断为血管瘤）共55 例（男31例，女24例，年龄3个月～7 岁）。5例血管瘤周围正常皮肤组织作对照。对石蜡包埋标本 作4μm连续切片3张，其中1张作HE染色进行重新病理诊 断和分型，另外2张进行IGF-2、PCNA的蛋白检测。
1.2 试剂 即用型超敏UltrasensitiveTM S-P免疫组织化学试剂盒、兔 抗人IGF-2多克隆抗体、鼠抗人PCNA单克隆抗体均购自福州 迈新生物技术有限公司。
1.3 实验方法
1.3.1 常规HE 染色 按Mulliken分类法结合临床表现和光 镜下肿瘤的结构将临床分类的血管瘤重新分类为血管瘤和血 管畸形，并再按Takahashi ［2］ 分期对血管瘤进行分期-增生期和 退化期。
1.3.2 免疫组织化学染色及结果判断 用免疫组织化学SP 法，严格按试剂盒说明书进行操作，DAB显色，苏木素复染，并 镜检分析结果。空白对照用PBS取代一抗，其余步骤不变。 结果判定标准:IGF-2阳性细胞为细胞质中出现棕黄色颗粒。 PCNA以细胞核内呈棕黄色或棕褐色颗粒为阳性。在此基础 上，参照评分方法 ［3］ ，首先将染色强度评分: 1分为弱阳 性，2分为中度阳性，3分为强阳性;再按阳性细胞所占的百分 比评分:0分为阴性，1分为阳性细胞≤25%，2分为25%～ 50%，3分为51%～75%，4分为>75%。染色强度与阳性细 胞的分值相加，0～3分为阴性（-），4～7分为阳性（+）。
1.4 统计学处理 采用 χ 2 检验和Fisher's的精确概率法及Spearman非参 数相关分析，均在SPSS11.5软件上进行处理。 P <0.05时被 认为有统计学意义。
2 结果
2.1 皮肤血管瘤组织学分型 根据Mulliken分类法，55例手术标本可分为血管瘤40 例，其中增生期28例，退化期12例;血管畸形15例。 2.2 IGF-2、PCNA的蛋白表达及其关系 结果见表1所示，IGF-2、PCNA蛋白在5例正常皮肤组织 均呈阴性表达，而在血管瘤组中的阳性率分别为67. 50%、 62. 50%， 均高于血管畸形组，差异有极显著性（ P <0.01）。 IGF-2、 PCNA蛋白在血管瘤增生期中的阳性率均高于退化期， 差异具有极显著性（ P <0.01）。在血管瘤中，IGF-2、PCNA蛋白共同阳性表达22例，共同阴性表达表达11例，两者呈显著 正相关（ P=0.000， r =0.632）。 表1 不同血管病变中IGF-2、PCNA的蛋白表达
3 讨论
胰岛素样生长因子（IGFs）是一类重要的生长因子家族， 包括IGF-1、IGF-2、相应的受体和结合蛋白。IGF-2基因定位 于人染色体11p15，其编码产生的IGF-2蛋白是一个由67个 氨基酸组成的单链弱酸性多肽，分子量为7144KD。IGF-2是 一种强致有丝分裂剂，在体内外都有很强的促进细胞增殖分 化的能力 ［4］ 。但研究发现，在人胎儿期IGF-2的含量远比成 年期高，且出生后IGF-2的表达仅局限于少数组织（如肝脏、 神经组织等） ［5］ ，这说明了IGF-2对组织、细胞的生长发育起 着重要的调节作用。 最近研究表明IGF-2的过度表达与恶性肿瘤（如结肠癌、 卵巢癌等）及其他增生性疾病有着密切的联系 ［6，7］ 。本实验结 果显示IGF-2蛋白在增殖期血管瘤血管内皮细胞中表达的阳 性率与消退期血管瘤、血管畸形以及正常皮肤的血管内皮细 胞中表达相比，差异均有极显著性（ P <0.01），并且在血管瘤 中IGF-2的表达与PCNA的表达成正相关。以上结果表明 IGF-2在血管瘤血管内皮细胞的增殖中起着重要作用，它能和 PCNA一样成为血管瘤的标记抗原。 PCNA是DNA 聚合酶δ的辅助蛋白，含216个氨基酸，相 对分子质量为36。PCNA是细胞周期调节蛋白，恰在DNA复 制前G1晚期开始增加，S期达到高峰，G2期开始下降，因此可 作为细胞增殖的一个指标。本实验结果显示血管瘤中PCNA 蛋白的阳性率显著高于血管畸形和正常皮肤，且增殖期血管 瘤中的阳性率明显高于消退期，与报道结果相符 ［8］ 。证 实了血管内皮细胞的过度增殖是血管瘤的组织病的重要 特征，且PCNA可以作为鉴别血管瘤和血管畸形和观察血管 瘤演变过程的一个重要指标。
参 考 文 献
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3 Tormanen-Napankangas U， SoiniY， Kahlos K， et al. Expression of caspases-3，-6 and -8 and their relation to apoptosis in non-small cell lung carcinoma.Int J Cancer， 2001， 93（2）: 192～198.
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6 Kornprat P， Rehak P， Ruschoff J， et al. Expression of IGF-I， IGF-II， and IGF-IR in gallbladder carcinoma. A systematic analysis including primary and corresponding metastatic tumours. J Clin Pathol， 2006， 59 （2）:202～206.
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8 程立新，汤少明，罗少军，等. 增殖细胞核抗原在血管瘤组织中的表 达及临床意义. 中华医学美容杂志， 2001， 7（2）:77～78.
