Survivin在宫颈鳞癌中的表达及与 DNA倍体关系的研究

         作者：马俊华 段祥林 汪必成

【关键词】  宫颈鳞状细胞癌

　　摘 要:  为了研究细胞凋亡抑制基因Survivind在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖潜能的关系，探讨两者对肿瘤  患者预后的影响，应用免疫组化SP法检测65例颈鳞癌中Survivin的表达，同时用图像分析技术对其DNA含量指数（DI值）进行检  测。结果显示，Survivin表达、DI值与宫颈鳞癌的临床分析、分化程度及淋巴结转移均有关（ P<0.05或P<0.01） ;Survivin的表达与  DI呈正相关（ P<0.05 ）。提示高的Survivin的表达率（高的肿瘤细胞凋亡抑制能力）及高的DI值（高的肿瘤细胞增殖能力）常提示宫  颈鳞癌的低分化和高转移能力，两者均可以作为肿瘤判断患者预后不良的指标。 

　　关键词:  宫颈鳞状细胞癌; Survivin; DNA含量

    宫颈鳞状细胞癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之  一，在女性恶性肿瘤中死亡率仅次于乳腺癌，因此寻找评估患  者预后的指标在临床肿研究中具有重要意义。本实验对65  例原发性宫颈鳞癌的Survivin的表达及DNA含量进行研究，  旨在探讨宫颈鳞癌肿瘤细胞的增殖能力与凋亡的关系，同时  探讨其对肿瘤预后的影响。  

　　1  材料和方法 

　　1.1  材料  65例宫颈鳞癌标本均来自于武汉大学中南病理科近  年来送检的手术标本，年龄最小者26岁，最大者84岁，中位  年龄56岁。按1985年FIGO临床分期，Ⅰ期27例，Ⅱ期38  例;高、中、低分化者分别为21、23、21例;有淋巴结转移者45  例，无转移者20例。

　　1.2  方法  标本经10% Formalin固定，常规脱水，石蜡包埋，连续  4μm厚切片，分别作HE、免疫组化染色及Feulgen DNA染色。  Survivin染色采用SP法。Survivin抗血清及SP试剂盒购  于福建迈新生物技术公司，操作步骤按说明书进行。以已知  阳性片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。背景清亮、  以肿瘤细胞胞浆或/和胞核染棕黄色为阳性染色。  DNA倍体分析采用Feulgen染色法。用北京航空航天工  业大学CMIBAS图像分析系统对DNA含量进行检测，每例检  测约100个癌细胞核积分光密度（ID），同时检测同切片中约  30个淋巴细胞ID为正常二倍体对照值，每例的DNA含  量指数（DI值）。

　　1.3  统计学处理采用SPSS 10.0软件对相关资料进行统计学处理。

    2  结果

　　65例鳞癌中，Survivin阳性表达者43例，阳性表达率为  66.15%。DNA倍体DI值范围为1.58～6.64，均值为3.14±  0.67。  随着宫颈鳞癌临床分期进展、分化程度的降低及发生淋  巴结转移，Survivin的表达逐渐增强（ P<0.01 ），其DI值也逐  渐升高（ P<0.05或P<0.01） ，见表1。同时DI值在Survivin  阳性表达者中明显高于其阴性表达者（ P<0.05 ），见表2。但  两者均与患者年龄无关（ P>0.05） 。    表1 宫颈鳞癌Survivin表达及DNA含量（DI值）与临床病理因素的关系注:* 高、中分化组与低分化组相比较。表2 宫颈鳞癌中Survivin的表达与   DNA含量（DI值）的关系 

    3  讨论

　　Survivin是一个新近克隆的细胞凋亡抑制蛋白（IAP）家族  的成员，其选择性的表达于多种恶性肿瘤组织中，癌旁正常组  织和成熟组织中几乎不表达。肿瘤细胞凋亡是在众多IAP成  员及其它基因调控 下的细胞自杀行为，其中Survivin抗凋亡  作用是最强的。Survivin的抗凋亡功能具有细胞周期依赖性，  在G2/M期表达，通过与细胞有丝分裂中纺锤体的微管结合，  参与对细胞基因转录的调节    ［1］    。经研究发现，Survivin与大多  数恶性肿瘤发生、、肿瘤的预后密切相关 ［2，3］  。本组宫颈   鳞癌中Survivin阳性表达率一方面随着癌临床分期的进展、分  化程度的降低而明显增高，同时在其有淋巴结转移病例中显  著高于无淋巴结转移者，这与大多数报道基本一致    ［4，5］  。 提示Survivin的表达状态能较好地反映宫颈鳞癌的转移能力。  我们认为，PCNA可以作为宫颈鳞癌患者的预后评估指标之  一。  肿瘤细胞核DNA含量及倍体变化是反映瘤细胞生长繁  殖能力的重要生物学指标，肿瘤的染色体倍性程度与增殖程  度呈正相关。高的DNA含是数总是和高的细胞增殖率相关  联的。大量的文献资料证明，DNA倍体和DNA含量指数对判  断肿瘤的恶性程度、分化、分级及预后的推测均具有重要意  义，已成为肿瘤研究的热点之一 ［6］ 。 本研究65例宫颈鳞癌中的DI值检测的结果发现，DI值  范围为1.58～6.64，均值为3.14±0.67，说明宫颈鳞癌中绝大  多数癌细胞具有超出正常二倍体DNA含量的异常值。癌细  胞DNA含量（DI值）与癌临床分期、分化程度和淋巴结转移  均密切相关。  我们的研究结果还发现，一方面随着肿瘤临床分期的进  展、分化程度的降低及发生淋巴结转移，其Survivin阳性表达  率升高，DI值也增加;另一方面随着Survivin阳性表达率升  高，DI值也增加，显示了Survivin及DI值之间的正相关性。充  分表明了高的Survivin阳性表达率（高的肿瘤细胞凋亡抑制能  力）及高的DI值（高的肿瘤细胞增殖能力）常提示宫颈鳞癌的  低分化和高转移能力，表明两者均可以作为判断宫颈鳞癌预  后不良的指标。 

　　参 考 文 献 

　　1 Tamm I， Wang Y， Sansville E， et al. IAP-family protein Survivin in-  hibits capase activity and apoptosis induced by fas（CD95）， caspases，   and anticancer drugs.Cancer Res， 1998，58（23）:5312.

　　2 罗仪，陈双郧，张台军.Survivin， MMP-2，TIMP-2在宫颈癌中的表达  及其与侵袭、转移的关系.西安大学学报，2005，26（2）:176.

　　3 Kim HS， Shiraki K， Park SH， et al. Expression of survivin in CIN and   invasive squamous cell carcinoma of uterine cervix（J）. Anticancer   Res，2002，22（2A）:805.

　　4 徐咏莲，刘少阳，江大琼.宫颈癌中Survivin， ki-67，CyclinB1的表  达及临床意义.妇产科进展，2004，13（3）:184.

　　5 陈娟，席红琳，李志美，等.凋亡相关基因Survivin蛋白在宫颈癌中  的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系.陕西医学杂志，2004，33（2）:  102.

　　6 马俊华，熊艳，汪必成，等.宫颈鳞状细胞癌PCNA表达及DNA倍  体与癌转移关系的研究.医学新知杂志，2001，11（2）:78.