尿液分析联合检测的应用价值
【摘要】 目的：通过对尿液的联合检测，分析多个参数指标，探讨如何更准确的对异常的标本进行更规范的检查。方法：对随机收集的530例我院住院患者的尿液标本，同时用日本Sysmex公司生产的UF-100自动尿沉渣分析仪(简称UF-100)、UF-2100R尿干化学分析仪(简称UF-2100)以及显微镜进行联合检测，分析多个参数指标，探讨其应用价值。结果：UF-100与镜检相比，检测红细胞(RBC)阳性符合率为89%，有15.12%的假阳性。对于白细胞(WBC)的检测，干化学法检测WBC的敏感性较低，有45.97%的假阴性，干化学法检测WBC与镜检相比假阳性较低，为3.51%，UF-100与镜检法相比，WBC阳性符合率为92.31%，假阳性为8.23%,UF-100与镜检法相比上皮细胞的阳性符合率为80.60%，有19.4%的假阴性。UF-100与镜检法相比管型的阳性符合率较低，为66.67%。结论：当UF-100、US-2100和显微镜检查对尿液进行联合检测时,UF-100可弥补干化学法检测不出淋巴细胞及单核细胞的不足，显微镜检测可排除UF-100所致的假阳性及假阴性。因此，为保证检验结果的准确性，必须对尿液进行联合检测。
【关键词】 尿液；检测；价值
尿液分析中显微镜尿沉渣镜检仍是检测尿中有形成分的金标准，然而该方法具有精密性差和观察者之间变异较大的缺点［1］，而且其劳动强度大、费时，在大批量标本检查特别是门诊患者急需实验结果时，对每个标本都经严格操作得出沉渣报告是困难的，因此需要寻找一个简单快速的方法进行筛检，有利于对异常的标本进行规范性检查。干化学尿液分析提供了筛选的实验手段， 仍可能导致真阳性结果的丢失［2，3］。我们随机收集530例我院住院患者的尿液标本，同时用UF-100自动尿沉渣分析仪(简称UF-100)、尿干化学分析仪US?2100R(简称US-2100)以及显微镜进行联合检测,分析多个联合指标,探讨其应用价值。
1 材料和方法
1.1 仪器 UF-100、US-2100R、显微镜、离心机。
1.2 试剂 UF-100使用的全部试剂均为配套试剂和原装质控品(日本Sysmex公司生产)；US-2100使用的干化学试纸条为UROPAPER错误，未找到引用源。(希森美康医用有限公司生产)；质控品为上海伊华医学科技有限公司生产。
1.3 标本 随机收集我院住院患者尿样530例。
1.4 方法
1.4.1 进行室内质控 UF-100和US-2100均经校准，每天用质控品做室内质控。
1.4.2 UF-100检测 将一次性清洁尿杯收集的住院患者的清洁中段尿充分混匀后分2管，1管用于UF-100检测，按其使用说明进行操作。UF-100吸样800 μl，自动稀释4倍以溶解其结晶，检测其电导率，用电阻抗，前向散射光大小，膜和DNA的荧光染色来分析其有形成分，结果以直方图、散点图、每微升细胞数和xx/HPF表示。
1.4.3 US-2100检测 第二管尿液100 ml先用US-2100做干化学检测其尿胆素原、潜血、蛋白质、葡萄糖、酮体、胆红素、亚硝酸盐、比重、白血球、pH值。
1.4.4 显微镜检测 将做干化学检测后剩余的标本按全国临床检验操作规程第二版进行检测和报告。为了减少观察者之间的变异性，所有标本都由一人完成。UF-100与显微镜检测之间以双盲方式判读。
1.4.5 判断标准 UF-100结果：红细胞(RBC)>25/μl,白细胞(WBC)25/μl,上皮细胞(EC)>20/μl,管型(CAST)>2/μl，结晶(XTAL)，酵母细胞(YLC)，精子(SPERM)提示“+”为阳性。显微镜检测结果：RBC≥3/HPF,WBC≥5/HPF,EC≥5/HPF,CAST≥1/LPF为阳性。
2 结果
2.1 530例尿标本三种方式检测RBC和WBC结果比较 见表1。
2.2 以镜检结果为标准干化学法与常规镜检法之间RBC和WBC结果比较 见表2。
2.3 以镜检结果为标准UF-100与显微镜检查尿沉渣结果比较结果 见表3。
2.4 UF-100与干化学结果检查比较 见表4。
表1 530例尿标本三种方式检测RBC和WBC结果比较（略）
表2 干化学法与常规镜检法之间RBC和WBC结果比较（略）
表3 UF-100与显微镜检查尿沉渣结果比较（略）
表4 UF-100与干化学结果检查比较（略）
2.5 530例尿标本中干化学法白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐均阴性的267例标本UF-100及镜检结果 见表5。
表5 干化学法4项均阴性的267例标本UF-100及镜检结果（略）
3 讨论
UF-100全自动尿沉渣分析仪采用流式细胞及电阻抗原理,通过检测经光染色后的尿沉渣中单个细胞的荧光强度和荧光波幅度、激光散射强度和散射波幅度及电阻抗的大小来识别尿中细胞、管型、结晶等各种有形成分。而干化学法的检测原理与UF-100并不相同，因此所检测的结果有差异。我们比较了UF-100、US-2100和显微镜对530例尿液标本的检测。从表1、表2可见，干化学法测RBC较UF-100和显微镜检查法敏感，这是由于干化学法测定RBC是利用的氧化酶法测定尿中血红蛋白，RBC破碎后仍能检出，如果尿中存在氧化性或还原性物质也可造成假阳性或假阴性。而UF-100和显微镜是检查尿中完整RBC;UF-100与镜检相比检测RBC阳性符合率为89%，有15.12%的假阳性，在这65例假阳性标本中通过镜检发现有23例标本发现有大量草酸钙结晶，有9例标本有大量细菌，13例标本有类酵母菌，另外一些镜检发现大量非晶型尿酸盐、磷酸盐、上皮细胞等；因UF-100利用对细胞膜和核酸亲和力不一样的两种荧光染料进行染色，RBC仅膜被染色，产生的荧光强度弱，位于散点图低荧光强度区，仪器根据荧光强度低和前项散射光强度低将其归为红细胞，一些大的、成双的及成堆的细菌颗粒、草酸钙及其他一些盐类结晶、酵母样菌等，其大小不等，部分与红细胞相似，其染色的敏感性及散射光强度与红细胞相似，在散光图中与RBC交叉分布干扰UF-100红细胞计数而将其误认为红细胞;表5中干化学白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐均阴性而UF-100检测RBC阳性的22例标本有15例为酵母样菌、结晶等引起的假阳性。UF-100与显微镜检查相比有11%的假阴性，这可能是因为某些特殊病例和特殊情况下，例如接受过眼底荧光血管造影的患者，由于尿中有荧光染料，还有某些服用过可以产生荧光染料类似作用的药物和抗生素等，RBC不易被染液染色或其他染料染色，会影响UF-100检测RBC的结果，而出现假阴性。因此当UF-100、US-2100和显微镜检查对尿液进行联合检测时，干化学可弥补镜检法和UF-100检测不出破碎红细胞及游离血红蛋白的不足，显微镜检查法可排除UF-100因结晶、类酵母菌等引起的假阳性及一些特殊情况下出现的假阴性，而UF-100还可对进行定量及形态学分类，以帮助判明血尿出血部位。对于WBC的检测，从表1、表2可见，干化学法检测WBC敏感性较低，有49.57%的假阴性，这是由于干化学法检测白细胞是测的白细胞酯酶，嗜中性粒细胞含此酶，部分标本放置过久引起的细胞酯酶失活也可出现假阴性，单核细胞含此酶很少，淋巴细胞不含此酶，干化学法白细胞只检测嗜中性粒细胞，UF-100和常规镜检法是检测的全部白细胞，因此干化学法的检出率低；干化学法检测WBC与镜检法相比假阳性较低为3.15%，这13例假阳性可能是因为部分尿中含有高浓度的胆红素或患者使用某些药物，干化学法可产生假阳性结果，还有尿液在膀胱储存时间过长或标本放置延长，导致WBC破坏，特异性酯酶释放到尿液中可造成尿干化学法阳性而UF-100与镜检阴性的“假阳性”现象；干化学法4项均阴性的267例标本中UF-100检测白细胞阳性的有25例，从表3可见，UF-100与镜检法相比，WBC阳性符合率为92.31%，假阳性为8.23%，在这36例假阳性标本中通过镜检发现有一部分有大量上皮细胞，一部分有大量非结晶型尿酸结晶及其他盐类结晶，还有一部分标本中含有大量细菌，因在散点图中，细菌位于RBC与WBC之间的下方，一些成堆聚集的细菌可误认为WBC而造成假阳性，还有一部分标本因镜检RBC为满视野而将数量本不高的WBC掩盖，使得镜检时未发现WBC而造成两者之间的不符；UF-100与镜检法相比假阴性率为7.69%，在这9例假阴性标本中，可能因为尿中有荧光染料，还有某些服用过可以产生荧光染料类似作用的药物和抗生素等，WBC不易被染料染色或是被其他染料染色，会影响UF-100检测RBC的结果,而出现假阴性。因此当UF-100、US-2100和显微镜检查对尿液进行联合检测时，UF-100可弥补干化学法检测不出淋巴细胞及单核细胞的不足，显微镜检测可排除UF-100所致假阳性和假阴性。从表3可见，UF-100与镜检法相比上皮细胞的阳性符合率为80.60%，有19.4%的假阴性，可能因为部分荧光强度高的单个细胞、细菌、精子、滴虫等凝聚成团，其散射光强度与上皮细胞接近而将其误认为上皮细胞造成的假阳性，小园上皮细胞的阳性符合率低，因为在蛋白阳性的尿标本中，部分WBC聚集成群而引起SRC假性增高。UF-100与镜检法相比管型的阳性符合率较低为66.67%，部分由于黏液丝粘附一些细胞或颗粒和一些非晶型盐类聚集而误认为管型。对提示性项目结晶、类酵母菌和精子阳性符合率低。因此对UF-100提示结晶、类酵母菌、管型和精子阳性的标本均应通过镜检确认。亚硝酸盐与细菌之间的阳性符合率较低，因仅部分革兰阴性杆菌含亚硝酸盐还原酶，革兰阳性杆菌及球菌不含此酶不能被测定，而UF-100是对全部细菌的定量测定，因此两者之间有较大的差异。总之，尿液干化学法与UF-100尿沉渣联合检测可以作为一种有效的过筛工具，再与显微镜检查联合可以提高检验质量，保证检验结果的准确性。
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［1］ 丛玉隆．尿液沉渣检查标准化的建议［J］．中华检验医学杂志，2002，25（4）：249?250.
［2］ 马政辉．UF-100全自动尿沉渣分析仪各检测项目假阳性结果得分析［J］．临床检验杂志，2004，22（1）：67?68.
［3］ 丛玉隆，王淑娟．今日临床检验学［M］．北京：技术出版社，1997.
