宫颈癌中Survivin基因表达及临床意义

                          作者：杨凯，倪才方，谢其根，余进进，吕蓓，张震宇     

【摘要】  应用免疫组织化学SP法检测Survivin蛋白在43例宫颈癌组织标本、20例宫颈原位癌、20例正常宫颈组织标本中的表达情况。结果Survivin蛋白阳性表达率宫颈癌组织显著高于正常宫颈组织(P<0.01)，高于宫颈原位癌组织(P<0.05)；有淋巴结转移者显著高于无淋巴转移者(P<0.05)；病理分期为Ⅰ期者显著低于Ⅱ期者(P<0.05)；随临床分期增加及淋巴结转移Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高。提示Survivin在宫颈癌中的高表达与淋巴结转移及临床病理分期密切相关；Survivin可能是影响宫颈癌预后的重要指标。

【关键词】  Survivin；宫颈肿瘤；宫颈癌

　　宫颈癌发病率在女性恶性肿瘤中仅次于乳腺癌居第二位，该病发病的高峰年龄为35岁～39岁和60岁～64岁；全世界每年有50万新增宫颈癌病例，20万人死于宫颈癌，而家的发病率明显高于发达国家，我国每年有4万余妇女死于宫颈癌［1］。Survivin是凋亡抑制蛋白家族的一个新成员,是迄今发现最强的凋亡抑制因子［2］。近年研究表明，Survivin与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨宫颈癌组织中Survivin蛋白的表达及其临床意义。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料  取我院病理科2006年1月至12月存档的43例手术切除宫颈鳞状细胞癌组织石蜡标本，术前均未接受放疗和化疗。患者年龄31岁～79岁,平均年龄51岁。参照国际妇产科联盟(FIGO)1995年修订的临床分期标准:Ⅰa期 7例，Ⅰb期11例，Ⅱa期11例，Ⅱb期14例；有淋巴结转移者28例,无转移者15例，病理分化程度为高分化12例，中分化18例,低分化13例；另取20例正常宫颈组织及20例宫颈原位癌组织作对照。

　　1.2  Survivin检测  采用免疫组织化学链酶抗生物素蛋白?过氧化物酶(SP)法染色，SP试剂盒产于福州迈新生物制品公司，用兔抗人survivin多克隆抗体(福州迈新生物制品公司)检测survivin的表达，严格按照说明书操作。已知阳性宫颈癌切片作为阳性对照，PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。以胞质中出现棕黄色颗粒为阳性细胞，400倍镜下计数500个细胞，≥10%为阳性，<10%为阴性。

　　1.3  统计学方法  采用SPSS 10.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验,相关性采用Spearman相关分析,检验水准P<0.05。

　　2  结果

　　正常宫颈组织中Survivin无表达，宫颈原位癌组织中Survivin蛋白阳性表达率为35.4%；肿瘤组织中Survivin蛋白阳性表达率为62.8%；其阳性染色颗粒主要定位于肿瘤细胞胞质内,细胞膜有少量着色,周围间质亦见少量阳性染色。Survivin蛋白阳性表达与宫颈癌临床病理特征的关系见表1。Survivin阳性表达率有淋巴结转移者为75.0%(21/28),无淋巴转移者为46.2%(6/15),P<0.05;病理分期Ⅰ期者为50.0%(9/18),Ⅱ期者为72.0%(18/25),P<0.05；随临床分期增加及淋巴结的转移,Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高,P<0.05，见表1。

　　表1  Survivin蛋白阳性表达与宫颈癌病理特征的关系（略）

　　3  讨论

　　多细胞生物体细胞数量恒定取决于细胞增殖与凋亡间的动态平衡,平衡破坏可导致肿瘤的发生。在恶性肿瘤中细胞增殖与凋亡同时增加,但增殖速率明显大于凋亡速率。如抑制肿瘤细胞增殖和(或)促进肿瘤细胞凋亡,则会影响肿瘤的生长。Survivin基因是1997年Altieri等［2］发现的一个细胞凋亡抑制基因,具有强大的凋亡抑制功能,与人类多种肿瘤的发生及预后相关［3］。正常情况下Survivin只表达于胚胎和发育的胎儿组织,但研究发现,大多数肿瘤组织中均可检测到Survivin表达［4，5］。Survivin的主要生物学功能是抑制凋亡,是目前已知作用最强的凋亡抑制蛋白。细胞凋亡主要有两条途径:死亡受体途径和线粒体途径,均最终通过激活下游效应因子使细胞凋亡。Survivin可以直接黏附于活化的效应因子上,使其不能发挥作用,从而阻断细胞凋亡过程［6］。本研究显示，Survivin在正常宫颈组织中不表达，宫颈癌组织中Survivin高表达，并在正常宫颈组织、原位癌与浸润癌中差别有显著性意义。提示Survivin基因的表达发生在宫颈癌恶性转化的早期,Survivin基因在宫颈癌组织中的表达可能抑制了异常突变的细胞凋亡,扰乱了细胞生长和凋亡途径,促进细胞逃离生长监控,导致肿瘤的发生。Wang等［6］用免疫组化SP法对宫颈癌中Survivin进行检测发现，59例宫颈癌组织中41例有Survivin表达,而10例正常宫颈组织中未现Survivin表达，本文结果与其相似。Aziz等检测皮肤癌和癌前病变组织发现,皮肤癌组织中Survivin基因高表达(87%),皮肤癌前病变组织中Survivin基因部分表达,认为Survivin基因表达可能参与皮肤癌的发生、发展，是癌变早期事件。本研究证实,淋巴结转移者Survivin蛋白阳性表达率显著高于无淋巴转移者；临床病理分期Ⅰ期者Survivin蛋白阳性表达率显著低于Ⅱ期者；随临床分期增加,Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高。提示Survivin基因不但参与原位肿瘤形成过程的调节,促进其发展,还可能参与癌细胞转移过程的调节,在转移过程中发挥作用。Sarele等［7］认为,在恶性肿瘤中,脱落的癌细胞因为Survivin对凋亡的抑制而受到保护,继续存活并分裂增殖,进而形成肿瘤邻近或远离部位的转移。综上所述,Survivin的异常表达与宫颈癌的发生、发展相关,可作为早期宫颈癌的辅助诊断指标;为临床判断宫颈癌转移及病理分期提供依据,其可能是影响宫颈癌预后的重要分子指标。

【】
  　　［1］ 章文华，吴令英.关于子宫颈癌综合的商榷［J］.中华肿瘤杂志，2003，25（2）：206.

　　［2］ Ambrosini G, Adida DC, Altier DC. A novel anti?apoptosis gene, survivin, expressde in cancer and lymphoma［J］. Nat Med,1997,3(8):917?921.

　　［3］ Salz W, Eisenberg D, Plescia J, et al. A survivn gene sign aturepre?dict saggressive tumor behavio［J］.Cancer Res,2005,65(9):3531?3534.

　　［4］ Suga K, Yamamoto T, Yamada Y, et al. Correlation between transcriptional expression of survivn is of orms and clinic opatological findings in human colorectal carcinomas［J］. Oncol Rep,2005,13(5):891?897.

　　［5］ Li JX, Zhou KY, Liang T, et al. Knockdown of survivin Expression by Small Interfering RNA Induces Apoptosisin Human Breast Carcinoma Cell Line MCF?7［J］.Ai Zheng, 2005,24(3):268?272.

　　［6］ Tamm I, Macadam Y, Sausville E, et al. IAP?family protein survivn inhibits caspaseactivity and apoptosis induced by Fas(CD95), Bax, caspases, and anticancer drugs［J］.Cancer Res,1998,58(23):5315?5320.

　　［7］ Wang M, Wang B, Wang X. A novel antiapoptosis gene, survivin, bcl?2, p53 expression in cervical carcinomas［J］.Zhong Ha Fu Chan Ke Za Zhi,2001,36(9):546?548.

　　［8］ Sarele AI, Macadam Rc, Farmery SM, et al. Expression of the antiapoptosis gene, survivn, predicts death from recurrent colorectal carcinoma［J］.Gut,2000,6(5):645?650.