慢性乙型肝炎患者外周血IL

                        作者：贾杰芳，杨文东，马庆海       

         【关键词】  慢性乙型肝炎；白细胞介素

　　［摘要］ 目的：探讨同为HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBVDNA高复制，抗HBc阳性与抗HBc阴性的慢性乙肝患者患者外周血白细胞介素18（IL18）水平与ALT的相关性，及其临床价值。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清IL18水平。把患者分为抗HBc阳性组和抗HBc阴性组，进行乙型肝炎病毒标志物（HBVM）、HBVDNA定量、ALT和IL18水平测定。结果：两组HBVDNA复制差异无显著性（P＞0.05）；血清ALT活性抗HBc阳性组显著高于抗HBc阴性组（P<0.01）；两组血清IL18水平显著高于对照组（P<0.01），抗HBc阳性组显著高于抗HBc阴性组（P<0.01）；血清IL18水平与ALT呈显著正相关（r=0.601，P<0.01）。结论：IL18可能参与了乙型肝炎的炎性损伤过程，血清IL18可作为判定乙型肝炎免疫状态及活动性监测的一项指标，对指导和预后具有一定的临床价值。

　　［关键词］ 慢性乙型肝炎；白细胞介素18；抗HBc

　　许多研究证实，肝病的发生与机体的免疫功能紊乱有密切的关系。临床治疗同为HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBVDNA高复制，抗HBc阳性与抗HBc阴性的慢性乙型肝炎患者，临床疗效存在差异。白细胞介素18（IL18）是一种前炎性细胞因子，又称干扰素γ诱导因子（IIF）［1］。IL18和IL12具有类似刺激干扰素γ（IFNγ）、增强NK细胞毒作用和诱导Th1介导的免疫反应的作用，但其效能超过IL12［2］。近年来，IL18被认为是调节Th1和Th2细胞因子的重要因子。本研究观察了抗HBc阳性和抗HBc阴性患者血清中IL18与肝功能指标ALT的变化，旨在探讨其相关性及临床价值。

　　1　对象与方法
　　
　　1.1　研究对象　　

　　研究对象为2004年3月至2006年2月，我院感染科门诊及住院就诊的慢性乙型肝炎患者81例，皆为HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBVDNA高复制。其中抗HBc阳性组42例，年龄11岁～71岁，平均（39.5±15.8）岁；抗HBc阴性组39例，年龄7岁～45岁，平均（26.8±10.5）岁。均符合2000年中华医学会传染病与寄生虫学会分会、肝病学会修订的病毒性肝炎诊断与分型标准［3］。正常对照（NC）组为本院同期健康体检者30名，年龄10岁～69岁，平均年龄为（30.5±11.3）岁。乙型肝炎病毒标志物（HBVM）均阴性，ALT＜40 U/L。以上各组2周内均未使用类固醇激素及免疫抑制剂。

　　1.2　方法

　　1.2.1　主要试剂和仪器　　

　　IL18试剂购自深圳晶美生物有限公司，澳大利亚Bender MedSystems公司试剂盒；HBVM试剂盒购自山东潍坊3V公司；HBVDNA定量试剂购自深圳匹基生物有限公司；ALT试剂为北京中生公司产品；芬兰产Multiskan MK3酶标仪、Wellwash 4 MK2洗板机；PE7000型荧光定量PCR仪。

　　1.2.2　研究项目及方法　　

　　IL18、HBVM采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法；HBVDNA定量采用实时荧光聚合酶链法；ALT采用采用赖氏法。

　　1.3　统计学处理　　

　　计量资料均以±s表示，组间显著性比较采用均数资料t检验及配对资料t检验。相关性分析进行直线回归，求出r值。

　　2　结果

　　2.1　各组外周血IL18、ALT及HBVDNA水平差异　　

　　表1显示：两组IL18水平显著高于对照组（P<0.01）；抗HBc阳性组血清IL18水平显著高于抗HBc阴性组（P<0.01）；两组HBVDNA复制差异无显著性（P＞0.05）；血清ALT活性抗HBc阳性组显著高于抗HBc阴性组（P<0.01）。表1　各组外周血IL18、ALT及HBVDNA的检测结果（略）注：vs NC组bP＜0.01；vs抗HBc阴性组cP＜0.01，dP＞0.05。

　　2.2　血清IL18水平与ALT相关性　　

　　经直线相关分析显示，r=0.601、P<0.01，血清IL18水平与ALT呈显著正相关。

　　2.3　两组患者年龄的差异　　

　　抗HBc阳性组年龄为（39.5±15.8）岁，抗HBc阴性组年龄为（26.8±10.5）岁，前者显著高于后者（t=4.191，P<0.01）。

　　3　讨论

　　IL18具有多种生物活性，在抗肿瘤、抗感染等方面有一定作用。在多种器官、组织和细胞中都可检测到IL18mRNA，如胸腺、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、Kupffer细胞等。IL18通过核因子κB（NFκB）直接诱导Th1型细胞产生IFNγ，刺激T细胞增殖，激活杀伤（NK）细胞，增强淋巴细胞的细胞毒作用，介导细胞免疫。IL18的生物学功能对HBV肝炎患者具有双重作用：一方面通过促IFNγ的产生而抑制病毒复制，有利于病毒消除及肝功能恢复［2，3］；另一方面通过调动宿主对HBV的细胞免疫，促进吞噬细胞和NK细胞介导的非特异性免疫和辅助性T（Th）细胞、细胞毒性T（Tc）细胞介导的特异性免疫，在免疫激活清除HBV的同时导致肝脏损害。目前认为乙型肝炎肝细胞病变主要由细胞免疫反应所致，免疫反应攻击的靶抗原主要是HBcAg，而效应细胞主要是特异性Tc淋巴细胞，是宿主的免疫反应对感染肝细胞的攻击，导致肝细胞的破坏和溶解［4］。肝细胞的损伤并不取决于病毒数量的多少，而是取决于机体的免疫系统情况。本研究结果显示：抗HBc阳性组与抗HBc阴性组相比，HBVDNA复制均处于高水平，但差异无显著性，说明均存在大量乙肝病毒的复制；血清ALT活性抗HBc阳性组显著高于抗HBc阴性组，说明抗HBc阳性患者肝细胞损伤严重。血清IL18水平与ALT呈显著正相关，表明IL18水平越高肝脏炎症越重，提示IL18可能参与了乙型肝炎的炎性损伤过程。抗HBc阳性组血清IL18水平显著高于抗HBc阴性组，这两组患者的机体免疫状态明显不同，抗HBc阳性者机体处于免疫活跃状态，适合应用抗病毒药物进行，而抗HBc阴性者相对处于一种免疫耐受或缺陷状态［5］，机体免疫系统对HBV的攻击相对较弱，治疗时应使用免疫调节药物。又抗HBc阴性组年龄显著低于抗HBc阳性组，可能前者免疫系统未发育成熟处于耐受状态，至血清IL18水平降低，尚需进一步研究。总之，IL18可能参与了乙型肝炎的炎性损伤过程，血清IL18可作为判定乙型肝炎免疫状态及活动性监测的一项指标，对指导治疗和预后具有一定的临床价值。

　　：

　　［1］Okamura H,Tsutsi H,Komatsu T,et al.Cloning of a new cytokine that induces IFNgamma production by T cells［J］.Nature,1995,378:88.

　　［2］Conti B,Jahng JW,Tinti C,et al.Induction of interferongamma inducing fctor in the adrenal cortex ［J］.Biol Chem,1997,272:2035.

　　［3］中华医学会传染病与寄生虫学会分会、肝病学会联合修订病毒性肝炎防治方案（试行）［J］.中华肝脏病杂志，2001，13（4）：241243.

　　［4］赵采彦，冯忠军，张素环，等.慢性肝炎患者IL2及受体与IL6及T细胞亚群的关系［J］.河北医科大学学报，2000，21（5）：260261.

　　［5］司端勤,周均启,张雷,等.抗HBc阴性的乙肝病毒携带者血清学分析［J］.临床荟萃,1997,12(10):443.