GGT的测定在肝癌诊断中的临床应用

【关键词】  ,肝癌

    摘要：目的：评价血清GGT测定指标在肝癌诊断中的应用价值。方法：取我院2001年至2004年中，已确诊断为原发性肝癌及转移性肝癌患者血清。AFP采用美国Everlong  Inc，生产ALPHA-FETOROTEIN（AFP）生多试剂进行酶免疫测定。GGT采用上海复星长征γ-谷氨酰转移酶医学有限公司生产的试剂，在日本岛津L-8000全自动生化分析仪上机测定。结果：392例肝癌患者测定AFP阳性率68%，GGT阳性率为99%。结论：在作肝癌诊断及早期普查活动中，应增加GGT作为诊断指标，以及早发现肝癌特别不明来因的转移性肝癌诊断、治疗提供更敏感、更高应用价值的一项重要指标。

　　关键词：  甲脂蛋白（AFP）；  γ-谷氨酰转移酶（GGT）；  肝癌

　　本文应用日本岛津L-8000全自动生化分析仪对我院已确诊肝癌患者392例作GGT测定，以及采用免疫学酶法对AFP进行测定，并进行比较分析现报告如下。

　　1  材料和方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  检测对象：来自我院外科手术病人和肿瘤科介入治疗病人，还有部分门诊肝癌患者复诊患者，抽取受检者清晨空腹血约6.0ml，分两支真空管，送检。

　　1.1.2  仪器：日本岛津L-8000、芬兰雷勃公司生产Well Wash 4μk2洗板机，芬兰雷勃公司生产Mutisraw  MK3酶标仪。

　　1.1.3  试剂：上海复星长征医学科学有限公司生产的γ-谷氨酰转移酶试剂盒，美国Everlong  Inc.生产的ALPHA-FETOPROTEINCAFP、ENZYME IMMUNOASSY TEST  KIT。质量监控血清为卫生部临床检验中心提供。

　　1.2  方法

　　1.2.1  GGT采用真空管采血，离心分离血清（无溶血），严格按试剂盒使用说明书内技术性能指标，在日本岛津L-8000全自动生化分析仪上机测定，在取血3h内完成测试，并用卫生部临床检验中心提供质量监控血清，结果准确可靠。

　　1.2.2  AFT测定采用真空管采血3ml，离心分离血清（无溶血）按试剂说明要求，根据标本份数取出反应包被反应槽，同时多取七个标准孔和一个空白对照孔，所用试剂从冰藏柜取出回复到室温（18～25℃）具体如下：①用反应孔架按标本份数及标准与空白对照孔取出反应孔数量，并固定于反应孔架上，并编号。②每孔加入标本20ul，标准孔分别加入含量为0、5、20、50、150、300、600、1000ug/ml AFP，标准液20ul，空白对照加入Iero  butter 170ul。③标本孔及标准孔每孔加入Iero  butter 150ul，轻轻摇动10次，混匀。④放置室温（18～25℃）反应30min。⑤取出用蒸馏水洗板机上洗涤5次，每次约1min。⑥用干净纱布上拍干。⑦每孔加入酶液（Enzyme  Lonjugate  Keageat）200ul，轻轻摇动5次、混匀，空白孔不加。⑧放置室温（18～25℃）30min。⑨过15min后，把显色剂A、B、（color  ReageatA、color Reageat B），根据标本数量按1:1取出A、B液混匀，即成TMB。⑩取出洗板机用蒸馏水洗涤5次，每次约1min,孔。(11)在干净纱布上拍干。⑿每孔加入TMB液 200ul，摇匀5次、放置室温20min。⒀每孔加入终止液（2NHCl）50ul，轻轻摇动30次、充分混匀。⒁在芬兰雷勃公司生产的酶标仪上，选波长为450nm，进行OD值测定，并根据标准值得到OD值，得到曲线，出样本AFP的值。

　　2  结果

　　将原发性肝癌转移癌的测定结果的范围、均值及阳性率列表。（GGT正常值为0～47u，AFP参考值为0～20ug/ml），当GGT大于47u时为阳性，AFP大于20ug/ml为阳性，并出阳性率。结果见表1。

　　表1  392例肝癌患者GGT及AFP结果（略）

　　3  讨论

　　血清γ-谷氨酰转移酶（GGT）测定人体各器官中GGT含量按下列顺序排列：肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。在肾脏、胰腺和肝脏中，此酶含量之比约为100：8：4。肾脏中GGT含量最高。但肾脏疾病时，血液中该酶活性增高却不明显。有人认为，肾单位病变时，GGT经尿排出，测定尿中酶活性可能有助于诊断肾脏疾患。
　　
　　GGT主要用于诊断肝胆疾病。原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时，血清GGT活力显著升高，特别在诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时，阳性率可达90%。
　　
　　嗜酒或长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥因钠、安替比林等者，血清GGT活性常常升高。口服避孕药会使GGT值增高20%。
　　
　　但是，GGT作为且癌标志物的特异性欠高，急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆结石、急性胰腺炎时都可以升高。
　　
　　AFP是胚胎发育早期的一种主要血清蛋白，成人由肝细胞产生，含量极微。AFP有很强的免疫抑制功能。肝细胞癌患者血清AFP含量升高。但15%～20%患者AFP正常范围。少数其他癌肿患者AFP也可阳性。
　　
　　原发性肝细胞患者血清AFP阳性率均为75%～80%。其他恶性肿瘤如胚胎细胞瘤（germell tumouros）、胃癌、胆道癌、胰癌和肺癌，某些肝脏良性疾病如病毒性肝炎、新生儿肝炎、肝硬变等。以高酪氨酸血症，囊性纤维变性，运动失调性毛细血管扩张症患者的血清AFP含量也可升高。故检测AFP对原发性肝细胞癌有重要的辅助诊断价值，但无特异性。
　　
　　随着各国化社会日益增长化学，造成大气污染，以及人们饮食方面受到不同程度化学添加剂食品应运而生，乙型肝炎病毒感染等，使肝癌发病率有上升趋势并且逐渐年轻化，所以我们对肝癌诊断与方面要提高，特别要早期发现，早诊断、早治疗，对提高患者治疗后果起到极大作用。随着基层医疗单位全自动生化分析仪普及使用，改变过去不能测定GGT状况，为了早期诊断肝癌提供一个有效、灵敏、快捷的重要依据。GGT测定应作为肝癌检查及健康检查的常规检查的一项指标，这样才更利于疾病的诊断和治疗。

　　参考：

　　［1］  全国临床检验操作规程［Ｍ］.第2版.217-220.

　　（广东省茂名市人民检验科，  广东  茂名  525000）