三种样本管血液葡萄糖测定的稳定性比较
[关键词] 血液葡萄糖;样本管;稳定性
血液葡萄糖(血糖)检测是临床实验室常规生化测定项目之一,其意义是衡量机体葡萄糖有无代谢异常,故准确检测血糖是十分重要的,但由于血液抽取后,血细胞内葡萄糖酵解继续进行,引起血糖浓度不断下降,特别是住院患者的标本,一般要采集后4 h~8 h才能完成测定,导致测定值成比例降低,给临床带来误导。为了提高血糖测定的准确性,防止血糖在体外分解,近年来许多国内外学者做了大量研究,氟化钠对红细胞的抗糖酵解作用已经得到充分的肯定,有报道带分离胶的真空管有抗糖酵解的作用,但结果不甚相同。为探讨不同样本管对血糖的稳定性,我们对37例自愿受检者采用普通真空血清管、草酸钾?氟化钠真空抗凝管及带分离胶的真空管收集了血液标本分离血清或血浆,分别测定离心后室温放置0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、24 h、48 h的血糖浓度。现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源 随机选取来我院就诊自愿受检者37例,其中男18例,女19例,年龄24岁~63岁,平均年龄37.6岁。空腹12 h以上,早晨坐姿采取静脉血分别置于真空血清管、草酸钾?氟化钠真空管和血清分离胶真空管中(标本无重复,无防腐剂及表面活性剂)。
1.2 采血管 由湖南省浏阳市医用仪器厂提供。
1.3 试剂、标准品和质控品 试剂由中生北控生物科技股份有限公司提供,标准品和质控品均由RANDOX公司提供,批号分别为298 UN/2、193 UE及360 UN/3、286 UE。
1.4 血糖测定方法及仪器 己糖激酶法测定血糖,严格按试剂盒说明书操作(试剂在有效期内使用);仪器为日本OLYMPUS AU-600全自动生化分析仪。
1.5 统计方法 采用两样本均数的t检验。
1.6 方法 标本采集后,置室温30 min,3 000 r/min离心15 min,分离血清或血浆,分别测定离心后室温放置0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、24 h、48 h血糖浓度,每次测定后加盖保存于室温(21 ℃)。
2 结果
普通真空管血糖浓度在2 h有降低趋势,但与0 h测定值比较差异无显著性(P>0.05),而随后各时相血糖测定值与0 h测定值之间比较,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);草酸钾—氟化钠真空抗凝管在1 h、1 h、4 h、8 h的血糖浓度测定值与0 h测定值比较,差异均无显著性(P>0.05),但在随后的24 h、48 h测定中,差异有显著性(P<0.01);分离胶真空管血糖浓度虽在48 h内略有降低,但各时相血糖测定值与0 h测定值比较,差异无显著性(P>0.05),结果见表1。
表1 三种样本管各时相血糖测定结果(略)
注:分别与0 h测定比较△为P<0.05,*为P<0.01。
3 讨论
血糖测定是临床常用的检验项目,由于血液抽取后,血细胞内葡萄糖酵解继续进行,引起血糖浓度不断下降,尤其是普通真空管血球与血清不能分离,且无任何血糖保护剂,血糖下降更为明显。本次结果显示:普通真空管血糖浓度在2 h有降低趋势,但与0 h测定值比较差异并无显著性(P>0.05),而随后各时相血糖测定值与0 h测定值之间比较,差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。徐凤艳[1]报道全血标本在普通真空管中放置1 h,葡萄糖浓度可降低5%~7%;李广权[2]、张代明[3]等报道普通真空管在抽血1 h血糖结果差异有显著性,与本文结果不尽相同,可能与本文的标本处理、检测条件以及检测方法等因素不同有关。草酸钾?氟化钠能有效阻止血液葡萄糖的酵解已经得到广泛认可,氟化钠的抗糖酵解机制是氟化钠先阻断了烯醇化酶,使得丙酮酸生成下降,并抑制了甘油3?磷酸脱氢酶的活性,致使葡萄糖分解抑制。由于抑制的不是葡萄糖的限速酶,因此抗糖酵解速度慢、效果差;而草酸钾可抑制限速酶丙酮酸激酶,采血1 h即有效阻止乳酸形成,且可减少氟化物的用量,减轻溶血的程度[5]。本次结果显示草酸钾?氟化钠真空抗凝管大约血糖浓度稳定8 h左右。李广权[2]报道草酸钾?氟化钠真空抗凝管能在6 h内测定值与即刻测定值差异无显著性。带分离胶的负压管能在较长时间内有效阻止血糖的酵解,其机制是分离胶负压管内添加了惰性分离胶和促凝剂。惰性分离胶不溶于水,具有抗氧化性、耐高温、抗低温、高稳定性的特性,其比重为介于血清和血细胞之间。当离心分离标本时,惰性分离胶可分布在血清和血细胞之间而将他们分离。可避免血细胞对血清中的化学成分继续分解而血清保持原状。促凝剂(如硅土)涂布在试管壁外,可使血液凝固时间缩短到30 min以下。分离胶隔离层在标本离心后可紧密地黏附在试管壁上,真空管在原状况下可由自动分析仪直接吸取血清,或可直接冰箱冷藏保存,长途运输也不会影响测定结果。同样也可避免纤维蛋白和溶血的影响。本次结果显示血糖在分离胶真空管至少可以稳定48 h。李广权[2]报道,分离胶真空管与酸钾?氟化钠真空抗凝管在6 h内测定值与即刻测定值差异无显著性;范小斌[5]报道分离胶真空采血管可在72 h内用于对血液葡萄糖的分离保存;徐凤艳[1]报道分离胶真空采血管在96 h无明显下降。综上所述,本文建议在实际工作中,各实验室依据本血样送检情况选择合适的采血管。对于门诊患者的标本可使用普通真空管,但在测定血糖标本时,应立即测定,最好不超过2 h。对住院患者使用带分离胶的负压管或对有血糖检测项目的多抽一管氟化钠管,以保证对患者血糖值作出准确检测。
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[1] 徐凤艳.分离胶真空采血管在血糖检测中的临床应用体会[J].河北医学,2004,10(4):382?383.
[2] 李广权,周卫东,曾莉.不同样本管中血液葡萄糖的稳定性比较[J].医学检验杂志,2005,3(6):238?239.
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[4] 周雪艳.抗凝剂及稳定剂在实验室中的应用[J].国外医学(临床生物化学与检验学分册),2001,22(5):267?268.
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