桂枝附子汤的抗炎镇痛作用试验研究

【摘要】  　　目的：通过动物实验验证桂枝附子汤的抗炎、镇痛作用。方法：抗炎实验：大鼠试剂关节炎实验，大鼠棉球肉芽肿实验。镇痛实验：热刺激致痛实验，醋酸致痛实验。结果：桂枝附子汤对各炎证模型均有一定的抑制作用。对热刺激致痛、醋酸致痛有明显的镇痛作用。结论：桂枝附子汤有一定的抗炎及镇痛作用。

【关键词】  桂枝附子汤；镇痛试验；抗炎试验；大鼠

　　桂枝附子汤出自《伤寒论》，具有温经散寒，祛风除湿，止痛之功效［1］。本文对该方进行了抗炎及镇痛试验，对其有效性作出客观评价，为临床用药提供。现将实验结果报告如下：

　　1  实验材料

　　1.1  实验动物  昆明种小白鼠，体重18-22g，SD大鼠，体重150-200g。二级，雌雄兼有。由昆明医学院动物科提供，合格证号：滇实动证2001040号。

　　1.2  实验仪器  天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；足趾容量测量仪，根据制作；微量移液器，上海求精生化试剂仪器有限公司；GJ?8402型热板测痛仪。

　　1.3  药物制备及试剂  按原方比例：桂枝12g，附子15g，生姜9g，大枣(12枚)25g，甘草6g配药，先煎附子40～60min，然后纳诸药水煎2次和并药液，过滤浓缩成1：1ml/mg，即每毫升水煎汤药相当于生药1g。阿司匹林肠溶片(昆明友谊制药厂)；弗氏完全佐剂(美国sigma公司)；冰醋酸(重庆南方试剂厂)。

　　2  实验方法及结果

　　2.1  抗炎实验

　　2.1.1  对大鼠佐剂关节炎原发病变的影响  取大鼠32只，雌雄各半，随机分成4组。分组及给药剂量如表1所示，连续给药7d。于末次给药前用容量法测量每只大鼠右后肢足趾容积2次，取其平均值为致炎前足趾容积。然后分别给药并于30min后，每只大鼠右后肢足趾皮下注射Freunds完全佐剂0.1ml致炎，分别于第3、4、5、24h测量右后趾容积，减去致炎前足趾容积作为肿胀度。结果见表1。

　　表1  对大鼠佐剂关节炎原发病变足趾肿胀的影响（略）

　　注：与生理盐水组比较**P＜0.01，*P＜0.05。(下同)

　　2.1.2  对大鼠佐剂关节炎继发病变的影响  分组及给药剂量如表2所示。实验前先用容量法测量每只大鼠左后肢足趾容积2次，取其平均值为用药前的容积。然后致炎(方法同上)。于致炎后第7d按表2所示剂量给药，连续7d。测量致炎后第10～14d左后肢足趾容积。根据给药前后左后肢的足趾容积之差，肿胀度。结果见表2。

　　表2  对大鼠佐剂关节炎继发病变足趾肿胀的影响（略）
　　
　　2.1.3  对大鼠棉球肉芽肿形成的影响  取大鼠32只，雌雄各半，随机分成4组。分组及给药剂量同上。1d灌胃给药后全部腹腔注射1%戊巴比妥钠30ml/kg麻醉后，于左右腋下剪毛，碘酒消毒后再用75%的酒精棉球脱碘，各切1个1cm长切口分别埋入1个处理过的20mg棉球。随即缝合皮肤。连续给药10d，于末次给药后1h处死大鼠，将棉球取出后，剔尽脂肪组织置于烘箱中(60℃)烘干，用天平秤其干重，肉芽肿的干重。结果：桂枝附子汤高、低剂量组与生理盐水组比较有非常显著性差异P＜0.01，P＜0.05。表明对大鼠棉球肉芽肿形成有一定的抑制作用。

　　2.2  镇痛实验

　　2.2.1  对热刺激致痛的影响(热板法)  参照方法［2］，筛选合格小鼠。按表3所列组别和剂量灌胃给药，连续给药3d，末次给药后分别测量第30、60、120、180、240min小鼠痛阈值。结果桂枝附子汤高、低剂量组对热刺激致痛有一定的抑制作用。

　　表3  对热刺激致痛的影响（略）

　　2.2.2  对醋酸致痛的影响(扭体法)  分组及给药剂量如表3所示。连续灌胃给药3d，于末次给药30min后，腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g，观察记录30min内小鼠出现扭体的次数，给药组与空白组比较计算镇痛百分率。结果与生理盐水组比较，桂枝附子汤高剂量组有显著性差异，低剂量组有非常显著性差异，表明对醋酸所致小鼠疼痛有明显的抑制作用。

　　3  小结
   
　　桂枝附子汤在风湿病方面应用广泛，临床主要用治风湿性关节炎、关节炎、腰膝痛、坐骨神经痛、产后痹痛［3］等。本实验表明桂枝附子汤对佐剂引起的免疫性炎症及棉球引起的一般性炎症有一定的抗炎作用，对热板法和扭体法引起的疼痛有明显的镇痛作用。

【文献】
  　　［1］王 付，石昕昕.仲景方剂临床应用指导［M］.北京：人民卫生出版社，2001：760.

　　［2］徐淑云.药理实验方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2002：886-887.

　　［3］马维智.桂枝附子汤风湿性关节炎20例分析［J］.甘肃医药，1994，13(4)：223-224.