参麻通络胶囊的质量控制标准研究
【关键词】 黄芪；当归；赤芍药；白芍药；天麻；质量；评价标准
参麻通络胶囊（批准文号：冀药制字Z20051611）具有益气活血、化瘀通络、滋补肝肾功效。临床上用于气血两虚、肝肾不足、瘀血阻络所致的头晕健忘、肢体不遂，多见于脑梗死及其后遗症、脑动脉硬化、老年性痴呆见上述证候者。由黄芪、丹参、天麻、半夏、赤芍药、当归、桃仁、红花、鸡血藤、竹茹、石菖蒲、白僵蚕、枸杞子、郁金、白芍药、牛膝16味药材组成。当归为该制剂主药之一，其中阿魏酸是当归的主要有效成分。药理研究表明，当归能增加心肌血液供给，降低心肌耗氧量，降低血管阻力，增加循环血流量，并有抗心律失常，抑制血小板聚集作用 。测定处方中的有效成分阿魏酸的含量对临床合理用药具有指导意义。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药
1.1.1 仪器
高效液相色谱仪（series III 泵，Model 500检测器，N2000工作站）；1/10万分析天平（德国METTLER TOLEDO公司）
1.1.2 试药
中药材由河北省唐山市丰南区中制剂室提供，阿魏酸对照品（生物制品检定所，批号：0773-9910），黄芪甲苷对照品（中国生物制品检定所，批号0781-200311），当归对照药材（中国生物制品检定所，批号120511-200405），芍药苷对照品（中国生物制品检定所，批号110736-200526），天麻对照药材（中国生物制品检定所，批号0944-200006），甲醇色谱纯（天津四友试剂厂），磷酸、三氯甲烷、甲醇、乙醚、乙醇、正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、甲酸均为分析纯，水是纯化水，硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂）。
1.2 方法
1.2.1 薄层鉴别
1.2.1.1 黄芪的鉴别
取本品5 g，加甲醇50 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水30 mL使溶解，用水饱和的正丁醇提取2 次，每次30 mL，合并正丁醇液；加氨试液三倍量，摇匀，放置分层，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法［1］试验，吸取供试品溶液15 μL，对照品溶液2 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－甲醇－水（13∶7∶2）的下层溶液为展开剂， 低温展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
1.2.1.2 当归的鉴别
取本品5 g，加乙醚30 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液，另取当归对照药材1 g，加水60 mL，煎煮40 min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚振摇提取2次，每次30 mL，乙醚液低温蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，制成对照药材溶液。照薄层色谱法［1］试验，吸取上述2种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷－乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。
1.2.1.3 赤芍药、白芍药的鉴别
取本品5 g，加乙醇50 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水15 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15 mL，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次10 mL，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5 mL使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加无水乙醇制成每mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法［1］试验，吸取供试品溶液15 μL，对照品溶液3 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
1.2.1.4 天麻的鉴别
取本品5 g，加水饱和的正丁醇50 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水2 mL使溶解，通过D101大孔树脂柱（内径1 cm，柱高16 cm），用10％乙醇25 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇0.5 mL使溶解，作为供试品溶液。另取天麻对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法［1］试验，分别吸取上述2种溶液各5 μL，分别点于同一以羧甲基纤维钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－甲酸（8∶1∶3∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
1.2.2 含量测定
1.2.2.1 溶液的配制
①阿魏酸对照品储备液：精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇制成每mL含阿魏酸5 μg的溶液，即得。②供试品溶液的配制：取参麻通络胶囊10粒的内容物，研细，取1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15 mL，密塞，称定质量，超声处理（功率160 W，频率50 kHz）60 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜过滤即得。
1.2.2.2 色谱条件
色谱柱为Kromasil C18分析柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），甲醇－0.1％磷酸溶液（30∶70）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为320 nm。进样量为20 μL。
1.2.2.3 测定方法
1.2.2.3.1 线性关系的考察
分别精密吸取对照品储备液，1、2、4、6、8、10 mL至量瓶中，加甲醇稀释至刻度，和原储备液，分别吸取上述溶液20 μL进样，在上述色谱条件下进行高效液相色谱法(HPLC)分析。
1.2.2.3.2 精密度试验
在上述色谱条件下，取浓度为5.1 μg／mL的对照品溶液，连续进样5次，测相对标准偏差(RSD)值。
1.2.2.3.3 稳定性试验
取制备好的供试品溶液，分别于0、2、4、8、12、24 h分别进样20 μL，测阿魏酸的RSD值。
1.2.2.3.4 重复性试验
取同一批次的供试品5份，分别按1.2.1.2项下方法操作，在上述色谱条件下进行分析，检测阿魏酸的平均含量及RSD值。
1.2.2.3.5 加样回收率试验
精密称取已测含量的供试品0.5 g，5份，分别至具塞锥形瓶中，分别精密加入已配制好的浓度为5.1 μg／mL的对照品溶液8 mL，按
1.2.1.2项下的方法制备所需溶液并进行测定，回收率。
1.2.2.3.6 样品测定 取060201批、060202批、060203批样品，按1.2.1.2项下方法进行处理，检测含量。
2 结 果
2.1 薄层鉴别
2.1.1 黄芪的鉴别
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。见图1（封3）。
2.1.2 当归的鉴别
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照无干扰。见图2（封3）。
2.1.3 赤芍药、白芍药的鉴别
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。见图3（封3）。
2.1.4 天麻的鉴别
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。见图4（封3）。
2.2 含量测定
2.2.1 线性关系的考察
以峰面积Y对浓度X回归分析，得回归方程为：y=3652813x-3013.33，r=0.9998。见图5。
实验结果表明，阿魏酸浓度在0.0102～0.1020 μg/mL范围内呈良好的线性关系。
2.2.2 精密度试验
测得RSD为0.67%。见表1，图6。表1 精密度试验结果（略）
2.2.3 稳定性试验
测得阿魏酸的RSD值为0.82％，结果表明样品溶液在24 h内含量稳定。见表2。表2 稳定性试验结果（略）
2.2.4 重复性试验
测得阿魏酸的平均含量为30 μg/粒，RSD值为0.86％。见表3。表3 重复性试验结果（略）
2.2.5 加样回收率试验
结果平均回收率为100.05％，RSD为1.23％。见表4。表4 加样回收率试验结果（略）
2.2.6 样品测定
测得含量见表5。表5 样品测定含量（略）
3 讨 论
本试验对参麻通络胶囊进行了质量控制标准研究，增加了黄芪、赤芍药、白芍药、天麻的薄层鉴别，建立了采用高效液相色谱法测定处方中当归的有效成分阿魏酸含量测定的方法，样品处理方法简单，薄层色谱图清晰，含量测定结果准确，重复性良好，可用于该制剂的质量控制。
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［1］国家药典委员会.药典：一部［M］.北京：化学出版社，2005：328
