洁菌灵溶液中甲硝唑的含量测定方法的改进
【摘要】 改进洁菌灵溶液的含量测定方法。方法：利用甲硝唑与羟苯乙酯在乙醚中的溶解度有差异，用乙醚萃取羟苯乙酯。结果：排除了羟苯乙酯对甲硝唑造成的波长短移，使结果偏高等干扰，平均回收率为99.31%，RSD=0.68%(n=6)结论：本测定方法简便，快速，准确，可用于改进原标准的含量测定方法。
【关键词】 洁菌灵溶液 甲硝唑 含量测定 改进
［Abstract］ Objective： To improve the content determination of Jiejunling solution.Methods： According to the difference of the solubility in aether between metronidazole and ethyl hydroxybenzoate wether was used to extract ethyl hydroxybenzoate.Results： This method eliminated the interference of the imfluence of ethyl hydroxybenzoate， such as hypsochromic shift of wave and a bit higher of the results. The average recovery was 99.31%, RSD=0.68% (n=6). Conclusions： This method was simple, fast and accurate， and was suitable for improving the original criteria.
［Key words］ Jiejunling solution; Metronidazole; Content Determination; Improvement
洁菌灵溶液是我院自制的外用制剂，应用于临床多年，主要用于炎症性皮肤感染，痤疮及毛囊虫引起的感染．该制剂主要成分是甲硝唑和庆大霉素，原申报资料采用紫外分光光度法测定甲硝唑的含量［1］123，结果准确，且其它成分均无干扰．由于在使用及贮存过程中易霉变，因此在原处方中加入了防腐剂羟苯乙酯。羟苯乙酯对G+、G－、真菌、酵母菌、霉菌均有很强的杀灭作用，尤其对霉菌抑菌作用强，与原处方药无配伍禁忌。经过多次试验证明，羟苯乙酯对含量测定有干扰，使最大吸收波长短移，含量结果偏高。笔者利用甲硝唑与羟苯乙酯在乙醚中溶解度的差异［1］910，［2］，用乙醚萃取除去羟苯乙酯，可排除干扰，结果准确，且方法快速、简便，可以用于洁菌灵溶液质量控制的快速分析。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
UV1101型紫外分光光度计（上海天美仪器有限公司），BS210S型天平（德国赛多利斯股份公司）。
1. 2 试药
甲硝唑对照品(药品生物制品检定所，批号：100191?200305)；甲硝唑原料药（宜昌长江药业有限分司，批号：051025，含量为99.7%）；庆大霉素（安阳路德药业有限分司，批号：061029）；羟苯乙酯(台山市新宁制药有限公司，批号：０70801 )；甘油(湖南尔康制药有限公司，批号：070828)；95%乙醇（广西农垦思源酒业有限公司，批号：071204）；水为自制纯化水；且均符合《中国药典》（二部）2005版的规定。
1.3 处方
甲硝唑2.0 g，庆大霉素、羟苯乙酯、甘油、乙醇（95%），纯化水加至1 000 mL。
2 方法与结果
2.1 甲硝唑的测定方法
2.1.1 原方法 精取样品溶液5 mL置100 mL量瓶中，加盐酸溶液（（9→1 000）定容至刻度，摇匀，精取25 mL置200 mL量瓶中，加盐酸溶液（（9→1 000）定容至刻度，摇匀，照分光光度法（2005年药典附录ⅣA）在277 nm波长处测定吸光度，按C6H9N3O3的吸收系数(E1%1 cm)为377甲硝唑的含量。
2.1.2 改进法 精取样品溶液5 mL置分液漏斗中，用乙醚10 mL萃取，静置，分取水层，乙醚层用盐酸溶液（9→1 000）洗涤2次，每次10 mL，合并水层置分液漏斗中，于“用乙醚10 mL萃取……”处重复上述操作，合并水层置100 mL量瓶中，用盐酸溶液（9→1 000）定容至刻度，摇匀，精取25 mL置200 mL量瓶中，加盐酸溶液（（9→1 000）定容至刻度，摇匀，照分光光度法（2005年药典附录ⅣA）在277 nm波长处测定吸光度，按C6H9N3O3的吸收系数(E1 m)为377计算甲硝唑的含量。
2.2 溶液的配制
2.2.1 甲硝唑对照液 精密称取经105 ℃干燥2 h的甲硝唑对照品0.0626 g，加盐酸溶液（9→1 000）稀释制成每毫升含12.52 μg。
2.2.2 供试品溶液 精密吸取样品5 mL按原方法和改进法分别配成待测液。
2.2.3 阴性对照溶液 按处方比例称取除甲硝唑外的其它各药依法配制，按原方法和改进法分别配成待测溶液。
2.3 紫外吸收图谱
取上述各种待测溶液于230～400 nm的波长范围内扫描，结果见图1。可见按原方法测定，羟苯乙酯有干扰，且样品溶液的最大吸收波长从277 nm移至271.5 nm，改进后，测得阴性对照溶液的图谱基本与基线重叠，表明处方中其它成分对甲硝唑的含量测定无干扰，样品溶液的最大吸收波长为277 nm，与中国药典中的甲硝唑原料药最大吸收波长一致［1］123。
2.4 精密度试验
精密称取甲硝唑适量加少量95%乙醇溶解，以盐酸溶液（9→1 000）为溶媒配成0.18 g/mL、0.20 g/mL、0.22 g/mL，按“2.1”方法测定，连续测定6次，结果表明精密度良好，RSD分别为0.67％、1.2%、0.48%。
2.5 重复性试验
取同一批供试品（批号080220）5份，按“2.1”方法测定，RSD=0.56%，结果表明本文测定方法重复性良好。
2.6 稳定性试验
取供试品（批号080220）按“2.1”处理样品，在室温下放置0、2、4、12、24 h，按“2.1”方法测定，RSD=0.73%，结果表明，洁菌灵溶液在24 h内稳定。
取同一批供试品(批号070807)在室温下放置，分别在0、1、2、3、6个月按“2.1”方法测定，RSD=1.1%，结果表明，洁菌灵溶液制剂在6个月内稳定［3-4］。
2.7 回收率试验
按处方量80%、100%、120%比例准确称取甲硝唑原料各2份，分别加入处方量辅料，制成模拟样品，按“2.1”测定方法测定其含量，回收率，结果见表1。
2.8 样品测定结果
按“2.1”方法测定样品含量，结果见表2。 表1 回收率试验结果表2 样品测定结果
3 讨论
甲硝唑含量测定方法有高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法［5?10］，前两者因仪器昂贵，运行成本高而受到限制。紫外分光光度法中有四种含量测定方法。药典收载的紫外分光光度法，不需要对照品，以盐酸溶液（9→1 000）为溶媒，于277 nm波长处测定吸收度，但该处方中含有其它成分，对结果有干扰，经实验表明，原方法测定的含量结果明显偏高，而且最大吸收波长短移后与规定波长值最大差值可达6.5 nm，导致最大吸收波长不符合规定。改进后的方法排除了羟苯乙酯的干扰，结果准确，回收率试验结果表明方法可行，可以为原测定方法提供一定的依据，保证临床用药的安全性和有效性。
【参考】
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