夏膝口服液对自发性高血压大鼠血管细胞粘附因子表达的影响
【摘要】 目的:观察夏膝口服液对自发性高血压大鼠(SHR)血管细胞粘附因子(VCAM?1)表达的影响。方法:40只12周龄SHR随机分为SHR模型组、卡托普利组、夏膝口服液组、厄贝沙坦组，另选10只同龄WKY大鼠作为空白对照组。采用免疫组织化学方法测定实验8周后各组大鼠肾小球的VCAM?1的信号强度。结果:夏膝口服液组、厄贝沙坦组内皮细胞胞浆染色显著低于SHR对照组(P＜0.01)，卡托普利组明显低于SHR组(P＜0.05)。结论：夏膝口服液具有降低肾小球血管内皮细胞VCAM?1表达的作用。
【关键词】 夏膝口服液；自发性高血压大鼠；VCAM?1；血管内皮
夏膝口服液由夏枯草、牛膝、茺蔚子3药组成，具有调整肝肾，活血通络的作用，临床应用降压效果明显，副作用小。本实验通过观察夏膝口服液对SHR血压(前文已作报道)及VCAM?1表达的影响，为得出该药明确的降压机制提供进一步的实验依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 12周龄的雄性SHR 30只，12周龄的雄性Wistar?Kyoto大鼠(WKY)10只，体重(230±20)g，由北京维通利华公司提供。
1.2 药物与试剂 夏膝口服液(由吉林省中制剂室提供，60ml/瓶);厄贝沙坦片(修正药业集团股份有限公司，批号：060501)；VCAM?1免疫组化染色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)。
1.3 仪器 BP?6无创动物血压测量系统(成都泰盟科技有限公司);免疫组化切片系列仪器(德国LEICA公司)；Olympus DX40光学显微镜及光学显微照相系统(日本Olympus公司)。
2 实验方法
2.1 实验分组 按血压从低到高排序，查随机数字表随机把SHR分为3组：夏膝口服液组、厄贝沙坦组(阳性对照组)、SHR空白组，每组10只；设10只WKY大鼠为正常对照组。
2.2 给药剂量 夏膝口服液组10g/(kg·d)，厄贝沙坦组0.013g/(kg·d),卡托普利组0.0083g/(kg·d)，空白对照组及正常对照组给予等体积蒸馏水灌胃。均每日上午1次灌胃给药。
2.3 观察指标 血压值(同前文，略)；肾小球内皮细胞VCAM?1的表达。
2.4 检测方法 灌胃8周后，大鼠称重，处死后迅速剥离并摘取肾脏，置入4%多聚甲醛固定液中固定。采用免疫组织化学方法测定肾小球VCAM?1的表达。结果判定:以光镜下内皮细胞胞浆染成浅黄色、棕黄色或棕褐色为阳性着色。按阳性染色细胞所占比例分为3级:阳性染色细胞占15%-35%为弱阳性反应(＋)，占36%-75%为阳性反应(?)，占75%以上为强阳性反应(?)；应用LX70OLYMPUS显微镜Cooled CCD采集视野图片，并根据冷泉港实验室提供的形态计量分析系统Image?Pro Plus Analysis Software，测定肾小球ICAM?1灰度值(即反映组织化学染色产物深浅程度。灰度值越大，则反映产物浓度越小，反之，浓度越大)，每张切片取5个视野，取其平均值。
2.5 统计学处理 所有数据用均数±标准差(±s)表示，采用SPSS 11.5软件进行单因素方差分析检验。
3 实验结果
见表1，图1。
表1 各组VCAM?1染色情况比较及平均灰度值（略）
注：与WKY对照组比较，☆P＜0.05，★P＜0.01；与SHR空白组比较，▲P＜0.01
图1 各组大鼠肾小球VCAM?1平均灰度值（略）
4 讨论
高血压可以形成过高的血流剪切力和跨膜压，从而对血管内皮造成机械损伤，内皮细胞功能发生紊乱，产生一系列的炎症反应。粘附分子［1］表达的增加是血管炎症的特征之一。高血压［2］可以通过上调细胞粘附分子VCAM?1等炎症介质的表达来发挥促炎作用。VCAM?1的增加，强化白细胞和内皮细胞的粘附以及白细胞向内皮下的游走，促进了泡沫细胞的形成，使血管壁发生器质性病变而形成动脉硬化，最终导致高血压并发症的出现。有研究表明［3］，高血压的病变部位重在肝肾，肝肾阴阳失调是高血压病的发病基础。黄永生教授提出高血压病的病机关键为肝肾失调，毒伤血络。西医学的氧自由基、微小血栓、血中脂质、炎性介质等均可看成中医的“毒邪”。血管属血络，血管内皮细胞功能紊乱所产生的VCAM?1可看做中医“毒伤血络”的病理产物之一。本研究表明夏膝口服液能降低SHR的血压并在一定程度上能减少肾小球VCAM?1表达，故可推测夏膝口服液可通过抑制血管细胞粘附因子VCAM?1来发挥降压作用。
【】
［1］李建军.炎症可能是联接高血压和动脉粥样硬化的桥梁［J］.分子心脏病学杂志，2005，5(1):385-387.
［2］Hilgers KF，Hartnet A，Porst M，et al.Monocyte chemoattractant protein-I and macrophage infilteation in hypertensive kidney injury. Kidney Int，2000，58:2408-2419.
［3］徐淑楠，刘海丽.高血压病的中医病特点探微［J］.中国中医基础医学杂志，2003，9(9)：10.
